| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-26页 |
| 1 课题的提出 | 第14-15页 |
| 2 多胺代谢 | 第15-17页 |
| 2.1 多胺合成 | 第15-16页 |
| 2.2 多胺分解 | 第16-17页 |
| 3 多胺与逆境响应 | 第17-19页 |
| 3.1 多胺与低温胁迫 | 第17-18页 |
| 3.2 多胺与干旱胁迫 | 第18页 |
| 3.3 多胺与盐胁迫 | 第18-19页 |
| 4 多胺合成酶基因与逆境胁迫 | 第19-21页 |
| 4.1 精氨酸脱羧酶 | 第19-20页 |
| 4.2 亚精胺合成酶 | 第20页 |
| 4.3 精胺合成酶 | 第20-21页 |
| 4.4 热精胺合成酶 | 第21页 |
| 4.5 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶 | 第21页 |
| 5 转录因子与逆境胁迫的关系 | 第21-24页 |
| 5.1 CBF家族转录因子 | 第22-23页 |
| 5.2 NAC家族转录因子 | 第23-24页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 甜橙多胺合成酶基因的发掘 | 第26-49页 |
| 1 引言 | 第26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-34页 |
| 2.1 植物材料 | 第26-27页 |
| 2.2 胁迫处理 | 第27页 |
| 2.3 甜橙多胺合成酶基因发掘 | 第27页 |
| 2.4 生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.5 定量表达分析 | 第28-31页 |
| 2.6 内源游离态多胺提取和测定 | 第31-34页 |
| 2.7 统计分析 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-46页 |
| 3.1 甜橙中多胺合成酶基因的鉴定 | 第34-36页 |
| 3.2 进化树和基因结构预测 | 第36-37页 |
| 3.3 基因染色体分布 | 第37-38页 |
| 3.4 多胺合成酶基因启动子顺式作用元件分析 | 第38-42页 |
| 3.5 多胺合成酶基因表达模式 | 第42-46页 |
| 3.6 低温处理下甜橙叶片和愈伤中多胺含量变化 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 甜橙多胺合成酶基因的鉴定 | 第46-47页 |
| 4.2 顺式作用元件和胁迫响应的关系 | 第47-48页 |
| 4.3 多胺合成酶基因和多胺含量 | 第48-49页 |
| 第三章 甜橙CBF1诱导调控ADC基因表达和腐胺合成的功能研究 | 第49-76页 |
| 1 引言 | 第49页 |
| 2 材料与方法 | 第49-63页 |
| 2.1 植物材料 | 第49-50页 |
| 2.2 胁迫处理 | 第50页 |
| 2.3 酵母单杂交 | 第50-54页 |
| 2.4 双荧光素酶活性检测 | 第54-56页 |
| 2.5 亚细胞定位 | 第56-58页 |
| 2.6 甜橙的遗传转化 | 第58-61页 |
| 2.7 浸花法转染拟南芥 | 第61-63页 |
| 2.8 转基因材料多胺测定 | 第63页 |
| 2.9 统计分析 | 第63页 |
| 3 结果与分析 | 第63-73页 |
| 3.1 CBFs基因染色体分布 | 第63-64页 |
| 3.2 甜橙愈伤CBFs胁迫下表达分析 | 第64-65页 |
| 3.3 CBFs与ADC启动子酵母单杂交分析 | 第65-66页 |
| 3.4 双荧光素酶活性分析 | 第66-67页 |
| 3.5 进化树分析与序列比对 | 第67-68页 |
| 3.6 亚细胞定位 | 第68-69页 |
| 3.7 甜橙CsCBF1超表达系鉴定及表达分析 | 第69-70页 |
| 3.8 拟南芥CsCBF1超表达系鉴定及抗性分析 | 第70-73页 |
| 4 讨论 | 第73-74页 |
| 4.1 多胺的转录调控路径 | 第73-74页 |
| 4.2 CBFs转录因子与其靶基因 | 第74页 |
| 5 本章小结 | 第74-76页 |
| 第四章 枳NAC72抑制ADC基因表达和腐胺合成参与胁迫应答的功能及机制 | 第76-99页 |
| 1 引言 | 第76页 |
| 2 材料与方法 | 第76-83页 |
| 2.1 植物材料 | 第76-77页 |
| 2.2 胁迫处理 | 第77页 |
| 2.3 RNA提取和基因表达 | 第77-78页 |
| 2.4 内源游离态多胺提取 | 第78页 |
| 2.5 亚细胞定位 | 第78页 |
| 2.6 转录活性分析 | 第78-79页 |
| 2.7 酵母单杂交 | 第79页 |
| 2.8 GAL4/UAS分析 | 第79-81页 |
| 2.9 生理指标测定 | 第81-83页 |
| 2.10 统计分析 | 第83页 |
| 3 结果与分析 | 第83-95页 |
| 3.1 PtrNAC72表达分析 | 第83-84页 |
| 3.2 PtrNAC72亚细胞定位 | 第84-85页 |
| 3.3 PtrNAC72转录活性分析 | 第85-86页 |
| 3.4 PtrNAC72与ADC启动子酵母单杂交分析 | 第86-87页 |
| 3.5 转录抑制活性分析 | 第87-88页 |
| 3.6 PtrNAC72烟草超表达系抗性分析 | 第88-92页 |
| 3.7 腐胺处理后抗旱性分析 | 第92-95页 |
| 3.8 拟南芥突变体及恢复系多胺含量测定 | 第95页 |
| 4 讨论 | 第95-97页 |
| 4.1 NAC家族转录因子结合特性 | 第95-96页 |
| 4.2 NAC家族转录因子的靶基因 | 第96-97页 |
| 4.3 活性氧和腐胺的关系 | 第97页 |
| 5 本章小结 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-117页 |
| 附录Ⅰ 原生质体提取试剂配制 | 第117-119页 |
| 附录Ⅱ DAPI染色 1×PBS溶液配方 | 第119-120页 |
| 附录Ⅲ 0.1mol/L磷酸缓冲液配方 | 第120-121页 |
| 附录Ⅳ 多胺合成酶序列比对 | 第121-122页 |
| 附录Ⅴ 顺式作用元件的功能 | 第122-125页 |
| 附录Ⅵ 柑橘多胺出峰图例 | 第125-126页 |
| 附录Ⅶ 已发表文章 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
