摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-12页 |
第一篇 文献综述 | 第12-42页 |
第一章 白斑综合征病毒的研究进展 | 第12-28页 |
1 病原学 | 第12-14页 |
2 流行病学 | 第14页 |
3 易感动物与传播机制 | 第14-16页 |
4 临床症状和病理变化 | 第16-17页 |
5 对虾白斑综合征病毒的诊断 | 第17-18页 |
·临床症状的观察 | 第17页 |
·组织病理学和电子显微镜的观察 | 第17-18页 |
·免疫学方法 | 第18页 |
·分子生物学方法 | 第18页 |
6 小结 | 第18-20页 |
参考文献 | 第20-28页 |
第二章 白斑综合征病毒的分子生物学研究进展 | 第28-42页 |
1 对虾白斑综合征病毒的基因组学研究 | 第28-33页 |
·对虾白斑综合征病毒的基因组特征 | 第28-29页 |
·对虾白斑综合征病毒的基因组可变区位点研究进展 | 第29-33页 |
2 对虾白斑综合征病毒的蛋白组学研究 | 第33-36页 |
·对虾白斑综合征病毒结构蛋白研究 | 第33-35页 |
·对虾白斑综合征病毒结构蛋白相互作用的研究 | 第35-36页 |
3 小结 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-42页 |
第二篇 试验研究 | 第42-78页 |
第一章 白斑综合征病毒(WSSV)分离株重复单元ORF94的序列差异分析及毒力比较 | 第42-58页 |
1 材料 | 第42-44页 |
·毒株 | 第42-43页 |
·试验动物 | 第43页 |
·主要试剂、质粒与菌株 | 第43页 |
·主要仪器设备 | 第43页 |
·PCR引物设计 | 第43-44页 |
2 方法 | 第44-47页 |
·病料组织中总病毒的提取 | 第44页 |
·PCR | 第44-45页 |
·产物克隆及测序 | 第45页 |
·ORF94基因序列重复单元数量分析 | 第45页 |
·WSSV人工接种克氏原螯虾 | 第45-46页 |
·人工接种WSSV死亡的克氏原螯虾ORF94重复单元数量差异比对 | 第46-47页 |
·人工接种WSSV死亡的克氏原螯虾电镜观察 | 第47页 |
3 结果 | 第47-53页 |
·各毒株检测结果 | 第47页 |
·不同分离株株ORF94片段长度 | 第47-48页 |
·不同毒株ORF94中单向重复单元数量 | 第48-49页 |
·半数致死量(LD50)测定结果 | 第49-51页 |
·人工接种不同毒株测定其毒力 | 第51页 |
·人工接种WSSV死亡的克氏原螯虾ORF94重复单元数量差异比对 | 第51-53页 |
·电镜观察 | 第53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
第二章 白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28与VP31、VP36A之间的相互作用 | 第58-78页 |
1 材料 | 第59-60页 |
·毒株 | 第59页 |
·主要试剂、质粒与菌株 | 第59页 |
·PCR引物设计 | 第59-60页 |
·主要仪器设备 | 第60页 |
2 方法 | 第60-67页 |
·病料组织中总病毒组的提取 | 第60页 |
·PCR | 第60-61页 |
·重组克隆质粒pMD-VP28、pMD-VP31和pMD-VP36A的构建 | 第61页 |
·原核表达质粒pET-VP28、pGEX-VP31和pGEX-VP36A的构建 | 第61-64页 |
·重组质粒在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第64页 |
·SDS-PAGE检测重组蛋白的表达 | 第64-65页 |
·重组蛋白的纯化与复性 | 第65页 |
·Far-Western | 第65-66页 |
·Pull-Down assay | 第66-67页 |
3 结果 | 第67-72页 |
·VP28、VP31和VP36A的PCR扩增 | 第67页 |
·重组质粒pET-VP28、pGEX-VP31和pGEX-VP36A的PCR鉴定和双酶切鉴定结果 | 第67-68页 |
·重组质粒的诱导表达及包涵体的复性 | 第68-69页 |
·Far-Western | 第69页 |
·Pull-Down assay | 第69-72页 |
4 讨论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-78页 |
全文总结 | 第78-80页 |
附录 | 第80-84页 |
致谢 | 第84页 |