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白斑综合征病毒(WSSV)重复单元ORF94的序列差异分析及囊膜蛋白的相互作用

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语第11-12页
第一篇 文献综述第12-42页
 第一章 白斑综合征病毒的研究进展第12-28页
  1 病原学第12-14页
  2 流行病学第14页
  3 易感动物与传播机制第14-16页
  4 临床症状和病理变化第16-17页
  5 对虾白斑综合征病毒的诊断第17-18页
   ·临床症状的观察第17页
   ·组织病理学和电子显微镜的观察第17-18页
   ·免疫学方法第18页
   ·分子生物学方法第18页
  6 小结第18-20页
  参考文献第20-28页
 第二章 白斑综合征病毒的分子生物学研究进展第28-42页
  1 对虾白斑综合征病毒的基因组学研究第28-33页
   ·对虾白斑综合征病毒的基因组特征第28-29页
   ·对虾白斑综合征病毒的基因组可变区位点研究进展第29-33页
  2 对虾白斑综合征病毒的蛋白组学研究第33-36页
   ·对虾白斑综合征病毒结构蛋白研究第33-35页
   ·对虾白斑综合征病毒结构蛋白相互作用的研究第35-36页
  3 小结第36-37页
  参考文献第37-42页
第二篇 试验研究第42-78页
 第一章 白斑综合征病毒(WSSV)分离株重复单元ORF94的序列差异分析及毒力比较第42-58页
  1 材料第42-44页
   ·毒株第42-43页
   ·试验动物第43页
   ·主要试剂、质粒与菌株第43页
   ·主要仪器设备第43页
   ·PCR引物设计第43-44页
  2 方法第44-47页
   ·病料组织中总病毒的提取第44页
   ·PCR第44-45页
   ·产物克隆及测序第45页
   ·ORF94基因序列重复单元数量分析第45页
   ·WSSV人工接种克氏原螯虾第45-46页
   ·人工接种WSSV死亡的克氏原螯虾ORF94重复单元数量差异比对第46-47页
   ·人工接种WSSV死亡的克氏原螯虾电镜观察第47页
  3 结果第47-53页
   ·各毒株检测结果第47页
   ·不同分离株株ORF94片段长度第47-48页
   ·不同毒株ORF94中单向重复单元数量第48-49页
   ·半数致死量(LD50)测定结果第49-51页
   ·人工接种不同毒株测定其毒力第51页
   ·人工接种WSSV死亡的克氏原螯虾ORF94重复单元数量差异比对第51-53页
   ·电镜观察第53页
  4 讨论第53-55页
  参考文献第55-58页
 第二章 白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28与VP31、VP36A之间的相互作用第58-78页
  1 材料第59-60页
   ·毒株第59页
   ·主要试剂、质粒与菌株第59页
   ·PCR引物设计第59-60页
   ·主要仪器设备第60页
  2 方法第60-67页
   ·病料组织中总病毒组的提取第60页
   ·PCR第60-61页
   ·重组克隆质粒pMD-VP28、pMD-VP31和pMD-VP36A的构建第61页
   ·原核表达质粒pET-VP28、pGEX-VP31和pGEX-VP36A的构建第61-64页
   ·重组质粒在大肠杆菌BL21中的诱导表达第64页
   ·SDS-PAGE检测重组蛋白的表达第64-65页
   ·重组蛋白的纯化与复性第65页
   ·Far-Western第65-66页
   ·Pull-Down assay第66-67页
  3 结果第67-72页
   ·VP28、VP31和VP36A的PCR扩增第67页
   ·重组质粒pET-VP28、pGEX-VP31和pGEX-VP36A的PCR鉴定和双酶切鉴定结果第67-68页
   ·重组质粒的诱导表达及包涵体的复性第68-69页
   ·Far-Western第69页
   ·Pull-Down assay第69-72页
  4 讨论第72-74页
  参考文献第74-78页
全文总结第78-80页
附录第80-84页
致谢第84页

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