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多菌灵降解菌的分离鉴定、生物学特性及多菌灵水解酶基因的克隆和表达研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
符号与缩略语说明第11-12页
前言第12-13页
第一章 文献综述第13-25页
 1 多菌灵概述第13-17页
   ·多菌灵的理化性质第13-14页
   ·多菌灵的杀菌机理及生产使用情况第14页
   ·多菌灵的毒性第14-16页
   ·多菌灵残留的情况及相关标准第16页
   ·多菌灵的检测方法第16-17页
 2 多菌灵的降解研究第17-20页
   ·多菌灵的物理化学降解研究第17-18页
   ·多菌灵的生物降解研究第18-20页
 3 本研究的目的和内容第20-21页
 参考文献第21-25页
第二章 多菌灵降解菌的分离和生物学特性研究第25-41页
 1 材料与方法第25-27页
   ·培养基与试剂第25页
   ·多菌灵降解菌的分离第25-26页
   ·降解菌株的培养特征及生理生化鉴定第26页
   ·降解菌株16S rRNA基因序列的测定第26-27页
   ·降解菌株系统发育地位的确定第27页
   ·菌体生长量的测定第27页
   ·多菌灵的含量测定第27页
 2 结果与讨论第27-38页
   ·多菌灵降解菌株的分离第27-28页
   ·降解菌株mbc-1和mbc-2的菌落形态及生理生化特征第28-29页
   ·菌株mbc-1和mbc-2的16S rRNA基因扩增第29-30页
   ·降解菌株mbc-1和mbc-2的鉴定结果第30-32页
   ·环境条件对降解菌株mbc-1和mbc-2生长的影响第32-37页
   ·菌株mbc-1和mbc-2的抗性谱第37-38页
 3 小结第38-39页
 参考文献第39-41页
第三章 多菌灵降解菌的降解特性及代谢途径研究第41-53页
 第一节 菌株mbc-1、mbc-2降解多菌灵的特性研究第41-47页
  1 材料与方法第41-42页
   ·供试菌株、培养基与试剂第41-42页
   ·菌体生长量的测定第42页
   ·多菌灵的含量测定第42页
   ·种子液培养第42页
  2 结果与讨论第42-46页
   ·菌株mbc-1和mbc-2的生长和多菌灵降解的关系第42-43页
   ·多菌灵起始浓度对mbc-1和mbc-2降解多菌灵的影响第43-44页
   ·温度对菌株mbc-1、mbc-2降解多菌灵的影响第44-45页
   ·pH对菌株mbc-1和mbc-2降解多菌灵的影响第45-46页
  3 小结第46-47页
 第二节 菌株mbc-1和mbc-2降解多菌灵途径分析第47-52页
  1 材料与方法第47页
   ·培养基与试剂第47页
   ·代谢产物提取第47页
  2 结果与讨论第47-51页
   ·多菌灵代谢产物的HPLC初步检测第47-50页
   ·2-氨基和2-羟基苯并咪唑的降解研究第50-51页
   ·代谢途径的推测第51页
  3 小结第51-52页
 参考文献第52-53页
第四章 多菌灵降解酶基因(mheⅠ)的克隆及表达第53-63页
 1 材料和方法第53-58页
   ·培养基与试剂第53页
   ·菌株与质粒第53-54页
   ·菌体基因组DNA的提取第54页
   ·质粒DNA的小量提取第54页
   ·普通感受态细胞的制备第54-55页
   ·多菌灵降解酶基因的引物设计和PCR扩增第55页
   ·PCR产物的纯化及酶切第55-56页
   ·表达载体pET29a的制备第56页
   ·酶连及酶连产物的转化第56页
   ·阳性克隆筛选第56页
   ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第56-57页
   ·酶活分析第57-58页
 2 结果与讨论第58-61页
 3 小结第61-62页
 参考文献第62-63页
第五章 多菌灵降解酶基因(mheⅠ)的侧翼序列扩增及分析第63-69页
 1 材料与方法第63-65页
 2 结果与讨论第65-67页
 3 小结第67-68页
 参考文献第68-69页
全文总结第69-71页
附录一 文中所用培养基及试剂配方第71-73页
附录二 相关DNA序列第73-81页
攻读硕士学位期间发表或已接收的学术论文第81-83页
致谢第83页

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