基金项目资助 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-11页 |
1 前言 | 第11-18页 |
1.1 候选基因概述 | 第11-14页 |
1.1.1 生长分化因子9(GDF9)基因 | 第11页 |
1.1.2 骨形态发生蛋白15(BMP15)基因 | 第11-12页 |
1.1.3 骨形态发生蛋白IB(BMPR-IB)基因 | 第12-13页 |
1.1.4 促卵泡素受体(FSHR)基因 | 第13页 |
1.1.5 抑制素A(INHA)基因 | 第13-14页 |
1.2 限制性片段长度多态性PCR-RFLP | 第14-16页 |
1.2.1 PCR-RFLP的原理和方法 | 第14-15页 |
1.2.2 PCR-RFLP的发展 | 第15页 |
1.2.3 PCR-RFLP的优缺点 | 第15-16页 |
1.3 单链构象多态性PCR-SSCP | 第16-17页 |
1.3.1 PCR-SSCP的原理和方法 | 第16页 |
1.3.2 PCR-SSCP的发展 | 第16-17页 |
1.3.3 PCR-SSCP的优缺点 | 第17页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 试验研究 | 第18-30页 |
2.1 试验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 试验样本来源 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂和药品 | 第18页 |
2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
2.1.4 主要溶液的配制 | 第19-20页 |
2.2 试验方法 | 第20-22页 |
2.2.1 DNA提取 | 第20-21页 |
2.2.2 DNA提取量及浓度和纯度的检测 | 第21-22页 |
2.3 PCR扩增 | 第22-24页 |
2.3.1 引物设计 | 第22页 |
2.3.2 PCR扩增体系和条件 | 第22-23页 |
2.3.3 PCR扩增产物的检测 | 第23-24页 |
2.4 PCR-RFLP分析 | 第24页 |
2.5 PCR-SSCP分型 | 第24-25页 |
2.6 克隆测序 | 第25-26页 |
2.6.1 PCR产物的纯化与回收 | 第25-26页 |
2.6.2 目的基因的克隆 | 第26页 |
2.7 基因型的判定 | 第26-27页 |
2.8 统计分析方法 | 第27-30页 |
2.8.1 基因频率和基因型频率 | 第27页 |
2.8.2 基因位点Hardy-Weinberg平衡状态检验 | 第27-28页 |
2.8.3 品种之间基因型分布的卡方独立性检验 | 第28页 |
2.8.4 遗传多样性的部分参数 | 第28-29页 |
2.8.5 FSHR、INHA基因与山羊高繁殖力关系的研究 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-45页 |
3.1 DNA提取结果 | 第30页 |
3.2 GDF9基因研究结果 | 第30-32页 |
3.2.1 PCR扩增结果 | 第30-31页 |
3.2.2 PCR-RFLP电泳结果 | 第31页 |
3.2.3 GDF9的PCR产物克隆测序的结果 | 第31-32页 |
3.3 BMP15基因研究结果 | 第32-34页 |
3.3.1 PCR扩增结果 | 第32页 |
3.3.2 P2引物扩增产物的PCR-SSCP结果 | 第32-33页 |
3.3.3 P3引物扩增产物的PCR-RFLP结果 | 第33页 |
3.3.4 BMP15基因P2、P3的PCR产物克隆测序结果 | 第33-34页 |
3.4 BMPR-IB基因的研究结果 | 第34-35页 |
3.4.1 PCR扩增结果 | 第34页 |
3.4.2 BMPR-IB基因的PCR-RFLP结果 | 第34-35页 |
3.4.3 PCR产物的克隆测序结果 | 第35页 |
3.5 FSHR基因的研究结果 | 第35-36页 |
3.5.1 PCR扩增结果 | 第35页 |
3.5.2 PCR-SSCP分析 | 第35-36页 |
3.5.3 PCR产物的克隆测序结果 | 第36页 |
3.6 INHA基因的研究结果 | 第36-38页 |
3.6.1 PCR扩增结果 | 第36页 |
3.6.2 PCR-RFLP结果 | 第36-37页 |
3.6.3 PCR产物的克隆测序结果 | 第37-38页 |
3.7 GDF9、BMP15和BMPR-IB基因的基因频率和基因型频率分析 | 第38页 |
3.8 FSHR和INHA基因的基因频率和基因型频率 | 第38-39页 |
3.8.1 FSHR基因分析结果 | 第38页 |
3.8.2 INHA基因的分析结果 | 第38-39页 |
3.9 FHSR和INHA基因的Hardy-Weinberg平衡检测 | 第39-40页 |
3.9.1 FSHR基因的分析结果 | 第39-40页 |
3.9.2 INHA基因的分析结果 | 第40页 |
3.10 FHSR和INHA基因不同品种基因型分布差异检验分析 | 第40-42页 |
3.10.1 FSHR基因的分析结果 | 第40-41页 |
3.10.2 INHA基因的分析结果 | 第41-42页 |
3.11 遗传多样性参数分析 | 第42-43页 |
3.11.1 FSHR基因遗传多样性参数分析 | 第42页 |
3.11.2 INHA基因的遗传多样性参数分析 | 第42-43页 |
3.12 FSHR和INHA基因多态性与产羔数关系 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-49页 |
4.1 试验材料与方法的选择 | 第45页 |
4.2 PCR扩增的影响因素 | 第45-47页 |
4.2.1 模板的质量和浓度 | 第46页 |
4.2.2 引物设计 | 第46页 |
4.2.3 退火温度 | 第46-47页 |
4.3 基因多态性分析 | 第47-49页 |
4.3.1 GDF9、BMP15、BMPR-IB基因多态性分析 | 第47页 |
4.3.2 FSHR基因多态性 | 第47-48页 |
4.3.3 INHA基因多态性 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
6 参考文献 | 第50-55页 |
在读期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
个人简历 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附件 | 第58-59页 |