摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-16页 |
1.1 WRKY 转录因子的研究进展 | 第9-11页 |
1.1.1 WRKY 转录因子的结构及分类 | 第9页 |
1.1.2 WRKY 转录因子的功能研究 | 第9-11页 |
1.2 抗病基因 Xa21 研究进展 | 第11-13页 |
1.2.1 Xa21 的克隆及其生化特性 | 第11-12页 |
1.2.2 Xa21 抗病途径研究 | 第12-13页 |
1.3 Western blotting 技术在蛋白质组学中的应用 | 第13-14页 |
1.4 生物分子相互作用的研究 | 第14页 |
1.5 本研究目的与意义 | 第14-16页 |
2 材料和方法 | 第16-23页 |
2.1 实验材料 | 第16-17页 |
2.1.1 水稻材料 | 第16页 |
2.1.2 白叶枯病菌株 | 第16页 |
2.1.3 质粒和菌株 | 第16页 |
2.1.4 主要试剂和用品 | 第16页 |
2.1.5 仪器与设备 | 第16-17页 |
2.2 水稻种植与取材 | 第17-18页 |
2.2.1 水稻的种植 | 第17页 |
2.2.2 培养水稻白叶枯病菌 | 第17页 |
2.2.3 接菌及取材 | 第17-18页 |
2.3 多克隆抗体制备 | 第18页 |
2.4 Western blotting | 第18-19页 |
2.4.1 水稻叶片材料的蛋白质提取 | 第18页 |
2.4.2 Western blotting 检测 | 第18-19页 |
2.5 细菌表达载体构建 | 第19-20页 |
2.5.1 寡核苷酸引物的设计合成与 PCR 产物扩增 | 第19页 |
2.5.2 PCR 产物的纯化 | 第19页 |
2.5.3 PCR 产物和质粒载体的双酶切 | 第19页 |
2.5.4 重组载体的构建 | 第19页 |
2.5.5 细菌感受态制备 | 第19-20页 |
2.5.6 热激法将重组载体转入宿主细胞 | 第20页 |
2.5.7 质粒 DNA 提取及酶切鉴定 | 第20页 |
2.5.8 测序验证目的片段 | 第20页 |
2.6 融合蛋白质的小量诱导表达 | 第20-21页 |
2.7 融合蛋白质的大量表达和纯化 | 第21页 |
2.7.1 融合蛋白质的大量表达 | 第21页 |
2.7.2 融合蛋白质的纯化 | 第21页 |
2.8 寡核苷酸探针的合成 | 第21-22页 |
2.9 微量热泳动 | 第22页 |
2.10 转录数据分析 | 第22-23页 |
3 结果与分析 | 第23-31页 |
3.1 水稻 WRKY42 基因 | 第23页 |
3.2 WRKY42 基因的转录 | 第23-24页 |
3.3 WRKY42 蛋白质在水稻叶片不同发育时期的表达 | 第24-25页 |
3.4 WRKY42 蛋白质在水稻抗白叶枯病中的表达 | 第25-26页 |
3.5 WRKY42 蛋白质在不同水稻-Xoo 互作反应中的表达 | 第26-27页 |
3.6 WRKY42 蛋白质的体外表达及纯化 | 第27-28页 |
3.7 WRKY42 蛋白质与病程相关基因启动子区 W-box 的结合特性分析 | 第28-29页 |
3.8 WRKY 转录因子在水稻-Xoo 互作过程中的作用模式 | 第29-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
4.1 WRKY 转录因子在水稻抗病中的协同作用 | 第31页 |
4.2 WRKY 转录因子与水稻的生长发育 | 第31页 |
4.3 W-box 在 WRKY 转录因子抗病中的作用 | 第31-32页 |
4.4 MST 在蛋白质与核酸相互作用中的应用 | 第32-33页 |
5 结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-40页 |
附录 | 第40-41页 |
在读期间发表的学术论文 | 第41-42页 |
作者简历 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |