| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 1 前言 | 第11-16页 |
| 1.1 香蕉果实采后冷害研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 JA及其衍生物MeJA与冷胁迫应答 | 第12-13页 |
| 1.3 WRKY转录因子 | 第13-14页 |
| 1.4 WRKY转录因子在植物逆境胁迫中的功能 | 第14-15页 |
| 1.5 VQ蛋白研究概况 | 第15-16页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-35页 |
| 2.1 供试材料 | 第16页 |
| 2.2 果实处理及取样方法 | 第16-17页 |
| 2.3 香蕉果皮总RNA的提取及检测 | 第17-18页 |
| 2.3.1 果皮总RNA的提取 | 第17页 |
| 2.3.2 果皮总RNA浓度的测定及完整性检测 | 第17页 |
| 2.3.3 cDNA第一链的合成 | 第17-18页 |
| 2.4 实时荧光定量PCR (RT-qPCR) | 第18页 |
| 2.5 香蕉MaWRKY26基因全长cDNA的克隆及检测 | 第18-19页 |
| 2.5.1 目的基因片段的获取与回收 | 第18-19页 |
| 2.5.2 与载体连接 | 第19页 |
| 2.5.3 转化 | 第19页 |
| 2.5.4 阳性克隆的鉴定 | 第19页 |
| 2.5.5 阳性克隆的测序 | 第19页 |
| 2.6 MaWRKY26氨基酸序列及进化树分析 | 第19-20页 |
| 2.6.1 MaWRKY26氨基酸序列分析 | 第19-20页 |
| 2.6.2 MaWRKY26进化树分析 | 第20页 |
| 2.7 MaWRKY26在烟草中的亚细胞定位 | 第20-21页 |
| 2.7.1 瞬时表达载体的构建 | 第20页 |
| 2.7.2 农杆菌电击转化法及烟草叶背面注射 | 第20-21页 |
| 2.8 MaWRKY26的转录活性分析 | 第21页 |
| 2.9 MaWRKY26与JA合成相关基因的启动子的结合情况 | 第21-28页 |
| 2.9.1 JA合成相关基因启动子的克隆 | 第21-23页 |
| 2.9.2 MaWRKY26-GST融合蛋白的表达纯化 | 第23页 |
| 2.9.3 凝胶阻滞实验（EMSA） | 第23-28页 |
| 2.10 MaWRKY26互作蛋白的筛选 | 第28-33页 |
| 2.10.1 香蕉VQ基因的全长克隆 | 第28页 |
| 2.10.2 酵母双杂交实验(Yeast Two-Hybrid Assays) | 第28-30页 |
| 2.10.3 双分子荧光互补实验（BiFC） | 第30-31页 |
| 2.10.4 免疫共沉淀实验（Co-IP） | 第31-33页 |
| 2.11 MaVQ5的表达特性和亚细胞定位 | 第33-34页 |
| 2.11.1 MaVQ5在低温胁迫及MeJA处理中表达特性 | 第33页 |
| 2.11.2 MaVQ5的亚细胞定位 | 第33-34页 |
| 2.12 双荧光素酶报告基因实验 | 第34页 |
| 2.13 数据统计分析及作图 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-50页 |
| 3.1 香蕉果皮总RNA的提取 | 第35页 |
| 3.2 MaWRKY26对冷胁迫和MeJA的响应 | 第35-36页 |
| 3.2.1 MaWRKY26基因荧光引物的筛选 | 第35页 |
| 3.2.2 香蕉果实冷害和MeJA诱导耐冷性过程中MaWRKY26基因的表达分析 | 第35-36页 |
| 3.3 MaWRKY26基因全长cDNA的克隆 | 第36-37页 |
| 3.4 香蕉MaWRKY26的序列分析 | 第37-39页 |
| 3.4.1 MaWRKY26的基本特性 | 第37页 |
| 3.4.2 MaWRKY26的氨基酸序列分析 | 第37-38页 |
| 3.4.3 MaWRKY26的进化关系分析 | 第38-39页 |
| 3.5 MaWRKY26蛋白的亚细胞定位分析 | 第39-40页 |
| 3.6 MaWRKY26的转录活性分析 | 第40-41页 |
| 3.7 MaLOXs、MaAOSs、MaAOCs和MaOPRs启动子的克隆及序列分析 | 第41-43页 |
| 3.8 凝胶阻滞实验（EMSA）分析MaWRKY26与JA合成相关基因启动子的结合 | 第43-45页 |
| 3.9 MaWRKY26与MaVQs的蛋白互作 | 第45-48页 |
| 3.9.1 酵母双杂交分析MaWRKY26与MaVQ4/5/6 的蛋白互作 | 第45-46页 |
| 3.9.2 双分子荧光互补（BiFC）验证MaWRKY26与MaVQ5的蛋白互作 | 第46-47页 |
| 3.9.3 免疫共沉淀（Co-IP）验证MaWRKY26与MaVQ5的蛋白互作 | 第47-48页 |
| 3.10 MaVQ5基因表达特性和亚细胞定位分析 | 第48-49页 |
| 3.10.1 MaVQ5在香蕉果实冷胁迫和MeJA诱导耐冷性过程中的表达特性 | 第48-49页 |
| 3.10.2 MaVQ5的亚细胞定位分析 | 第49页 |
| 3.11 MaVQ5对MaWRKY26结合JA合成相关基因的启动子的影响 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| 4.1 MaWRKY26是植物特有的WRKY类转录因子 | 第50-52页 |
| 4.2 MaWRKY26参与调控香蕉果实耐冷性的机制分析 | 第52-53页 |
| 4.3 MaVQ蛋白对MaWRKY26调控能力的影响 | 第53-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 附录 | 第64页 |
