致谢 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
缩写词(Abbreviation) | 第16-18页 |
氨基酸缩写符号(Amino acid abbreviation) | 第18-19页 |
前言 | 第19-21页 |
1 文献综述 | 第21-31页 |
1.1 MtN3/Saliva/SWEETs基因家族研究进展 | 第21-26页 |
1.1.1 MtN3/Saliva/SWEETs家族的发现和基本信息 | 第21-22页 |
1.1.2 与植物发育有关的MtN3/Saliva/SWEETs家族成员 | 第22-26页 |
1.1.3 研究展望 | 第26页 |
1.2 十字花科植物蜜腺研究进展 | 第26-31页 |
1.2.1 蜜腺 | 第26-27页 |
1.2.2 蜜汁的形成和分泌 | 第27-28页 |
1.2.3 蜜腺分子生物学研究 | 第28-31页 |
2 白菜MtN3/Saliva/SWEETs基因家族成员的分离及序列分析 | 第31-49页 |
2.1 实验方法 | 第31-32页 |
2.1.1 序列查找 | 第31页 |
2.1.2 基因序列染色体定位和序列特征分析 | 第31-32页 |
2.2 结果与分析 | 第32-48页 |
2.2.1 白菜MtN3/Saliva/SWEETs家族基因的获得 | 第32-34页 |
2.2.2 白菜MtN3/Saliva/SWEETs家族基因的序列分析 | 第34-38页 |
2.2.2.1 白菜MtN3/Saliva/SWEETs家族基因的染色体定位 | 第34页 |
2.2.2.2 白菜MtN3/Saliva/SWEETs基因结构及进化分析 | 第34-35页 |
2.2.2.3 白菜MtN3/Saliva/SWEETs基因启动子序列的分析 | 第35-38页 |
2.2.3 白菜MtN3/Saliva/SWEETs家族蛋白特征分析 | 第38-48页 |
2.2.3.1 白菜MtN3/Saliva/SWEETs家族多序列比对 | 第38-40页 |
2.2.3.2 白菜MtN3/Saliva/SWEETs跨膜区域分析 | 第40-41页 |
2.2.3.3 白菜MtN3/Saliva/SWEETs的疏水性分析 | 第41-42页 |
2.2.3.4 白菜MtN3/Saliva/SWEETs的信号肽分析 | 第42页 |
2.2.3.5 白菜MtN3/Saliva/SWEETs的亚细胞定位分析 | 第42-44页 |
2.2.3.6 白菜MtN3/Sa1iva/SWEETs的二级结构分析 | 第44-45页 |
2.2.3.7 白菜、拟南芥和水稻MtN3/Saliva/SWEETs氨基酸保守短序列分析 | 第45-48页 |
2.3 讨论 | 第48-49页 |
3 白菜MtN3/Saliva/SWEETs基因在不同组织及不同花器官中的表达特征分析 | 第49-57页 |
3.1 材料与方法 | 第49-52页 |
3.1.1 植物材料与试剂 | 第49页 |
3.1.2 RNA的提取与检测和cDNA的合成 | 第49-51页 |
3.1.2.1 RNA的提取与检测 | 第49-50页 |
3.1.2.2 cDNA的合成 | 第50-51页 |
3.1.3 qRT-PCR分析MtN3/Saliva/SWEETs基因家族成员的表达模式 | 第51-52页 |
3.1.3.1 定量引物设计 | 第51-52页 |
3.2 结果与分析 | 第52-55页 |
3.2.1 RNA的提取 | 第52-53页 |
3.2.2 实时荧光定量PCR的结果分析 | 第53-55页 |
3.2.2.1 不同组织及不同花器官MtN3/Saliva/SWEETs基因的表达分析 | 第53-55页 |
3.3 讨论 | 第55-57页 |
4 白菜蜜腺发育相关MtN3/Saliva/SWEETs基因BcNS亚细胞定位分析 | 第57-67页 |
4.1 材料与方法 | 第57-62页 |
4.1.1 植物材料与试剂 | 第57-58页 |
4.1.2 植物总RNA的提取和cDNA合成 | 第58页 |
4.1.3 BcNS的CDS片段的获得 | 第58-60页 |
4.1.3.1 BcNS的CDS片段的获得 | 第58-59页 |
4.1.3.2 cDNA测序 | 第59-60页 |
4.1.4 BcNS过表达载体的构建 | 第60-61页 |
4.1.4.1 入门载体构建 | 第60页 |
4.1.4.2 LR反应 | 第60-61页 |
4.1.5 BcNS过表达载体的瞬时表达 | 第61-62页 |
4.2 结果与分析 | 第62-65页 |
4.2.1 pB7YWG2.0-BcNS-YFP过表达载体构建 | 第62-64页 |
4.2.2 BcNS过表达载体的瞬时表达分析 | 第64-65页 |
4.3 讨论 | 第65-67页 |
5 BcNS转基因植株的分子检测与功能验证 | 第67-75页 |
5.1 材料与方法 | 第67-69页 |
5.1.1 植物材料与试剂 | 第67页 |
5.1.2 反义表达载体的构建 | 第67-68页 |
5.1.3 转基因植株的分子检测 | 第68-69页 |
5.1.3.1 转基因植株的PCR检测 | 第68-69页 |
5.1.3.2 转基因植株的GUS组织化学染色检测 | 第69页 |
5.1.3.3 转基因植株的荧光定量检测 | 第69页 |
5.1.4 转基因植株的形态学观察 | 第69页 |
5.2 结果与分析 | 第69-73页 |
5.2.1 转化植株的获得 | 第69-70页 |
5.2.2 转化植株的PCR检测 | 第70-71页 |
5.2.3 转化植株的X-Gluc组织化学染色检测 | 第71-72页 |
5.2.4 转化植株的荧光定量PCR检测 | 第72页 |
5.2.5 转基因植株的形态学观察 | 第72-73页 |
5.3 讨论 | 第73-75页 |
结论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
作者简历 | 第83-85页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第85页 |