| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章：绪论 | 第11-30页 |
| 1.1 背景 | 第11-14页 |
| 1.2 早期诊断 | 第14-16页 |
| 1.3 肿瘤的转移和诊断 | 第16-18页 |
| 1.3.1 肿瘤转移 | 第16-17页 |
| 1.3.2 肿瘤诊断 | 第17-18页 |
| 1.4 循环肿瘤细胞检测 | 第18-24页 |
| 1.4.1 循环肿瘤细胞 | 第18-19页 |
| 1.4.2 循环肿瘤细胞研究平台—Cell Search | 第19-20页 |
| 1.4.3 CTC捕获的快速发展 | 第20-24页 |
| 1.4.3.1 基于单抗体的捕获 | 第20-21页 |
| 1.4.3.2 上皮间质转化 | 第21-23页 |
| 1.4.3.3 负性选择 | 第23-24页 |
| 1.5 肺癌中的常见基因检测 | 第24-30页 |
| 1.5.1 非小细胞肺癌（NSCLC） | 第24页 |
| 1.5.2 常见的基因突变检测 | 第24-29页 |
| 1.5.2.1 KRAS | 第25-27页 |
| 1.5.2.2 EGFR | 第27-29页 |
| 1.5.3 主要研究基因 | 第29-30页 |
| 第二章：单个肿瘤细胞的基因突变检测 | 第30-47页 |
| 2.1 研究目的 | 第30页 |
| 2.2 材料与方法 | 第30-47页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第30-35页 |
| 2.2.1.1 细胞系 | 第30-31页 |
| 2.2.1.2 实验试剂 | 第31-33页 |
| 2.2.1.3 实验设备 | 第33-34页 |
| 2.2.1.4 基因突变引物 | 第34-35页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第35-47页 |
| 2.2.2.1 显微操作获取单细胞 | 第35-37页 |
| 2.2.2.2 单细胞检测 | 第37-47页 |
| 2.2.2.2.1 少量细胞（10个）基因组DNA放大 | 第37-44页 |
| 2.2.2.2.2 检测方法的灵敏度 | 第44-46页 |
| 2.2.2.2.3 悬浮状态的单细胞基因检测 | 第46页 |
| 2.2.2.2.4 微操获取经固定的单个细胞 | 第46-47页 |
| 第三章：单个肿瘤细胞核的基因突变检测 | 第47-66页 |
| 3.1 细胞裂解产物的基因检测 | 第47-51页 |
| 3.1.1 A549的实验结果 | 第47-48页 |
| 3.1.2 NCI-H1650的实验结果 | 第48-49页 |
| 3.1.3 NCI-H1975的实验结果 | 第49-51页 |
| 3.2 芯片内单个细胞核的基因检测 | 第51-60页 |
| 3.2.1 微流控芯片设计 | 第52-53页 |
| 3.2.2 显微操作取微芯片中裂解后的细胞核 | 第53-56页 |
| 3.2.2.1 无修饰操作 | 第53页 |
| 3.2.2.2 BSA修饰微芯片后的显微操作 | 第53-54页 |
| 3.2.2.3 双重修饰后操作 | 第54-55页 |
| 3.2.2.4 优化 | 第55-56页 |
| 3.2.3 芯片内单个细胞核的基因检测 | 第56-60页 |
| 3.3 临床患者单个循环肿瘤细胞的基因检测 | 第60-66页 |
| 第四章：肿瘤细胞的分选 | 第66-76页 |
| 4.1 鱼骨型芯片中负载DNA的验证 | 第67页 |
| 4.2 同质性CTC捕获理论 | 第67-68页 |
| 4.3 CTC捕获的模拟 | 第68-70页 |
| 4.4 临床样本检测 | 第70-71页 |
| 4.5 CTC的释放 | 第71-73页 |
| 4.6 CTC的纯化 | 第73-74页 |
| 4.7 分离具有特定表型的CTC子群 | 第74-76页 |
| 第五章：结论 | 第76-78页 |
| 5.1 研究结论 | 第76-77页 |
| 5.2 研究展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术成果 | 第86页 |