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H5N1亚型禽流感病毒感染鸡脾脏蛋白质组和转录组差异研究

摘要第10-13页
英文摘要第13-16页
1 前言第17-29页
    1.1 禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)概述第17-20页
        1.1.1 AIV生物学特性第17-18页
        1.1.2 AIV致病的分子基础第18-20页
    1.2 蛋白质组学概述第20-25页
        1.2.1 蛋白质组学起源与发展第20-21页
        1.2.2 蛋白质组学主要技术第21-24页
        1.2.3 蛋白质组学在流感病毒研究中的应用第24-25页
    1.3 基因组芯片技术第25-28页
        1.3.1 基因组芯片简介第25-26页
        1.3.2 芯片数据分析与注释第26-27页
        1.3.3 基因组芯片技术在流感病毒研究中的应用第27-28页
    1.4 研究目的与意义第28-29页
2 材料与方法第29-44页
    2.1 实验材料第29-31页
        2.1.1 实验动物与毒株第29页
        2.1.2 主要试剂第29页
        2.1.3 主要溶液配制第29-30页
        2.1.4 主要仪器第30-31页
    2.2 实验方法第31-44页
        2.2.1 动物实验第31-32页
        2.2.2 组织病毒含量检测第32页
        2.2.3 病理学分析第32-33页
        2.2.4 H5N1亚型AIV感染鸡脾脏差异蛋白质组学分析第33-37页
        2.2.5 H5N1亚型AIV感染鸡脾脏转录组分析第37-41页
        2.2.6 实时荧光定量PCR(RT-q PCR)验证第41-42页
        2.2.7 Western blot验证第42-44页
3 结果第44-76页
    3.1 SPF鸡感染实验第44-50页
        3.1.1 组织病毒含量检测第44-45页
        3.1.2 病理变化分析第45页
        3.1.3 组织免疫学分析第45-50页
    3.2 AIV感染鸡脾脏差异蛋白质组学分析第50-56页
        3.2.1 样品制备第50-51页
        3.2.2 IPG胶条选择第51页
        3.2.3 AIV感染鸡脾脏蛋白差异表达分析第51-52页
        3.2.4 质谱鉴定第52-54页
        3.2.5 差异蛋白GO分析第54-56页
    3.3 AIV感染鸡脾脏转录组分析第56-72页
        3.3.1 RNA样品质控信息第56-57页
        3.3.2 基因组芯片检测第57页
        3.3.3 芯片数据分析第57-58页
        3.3.4 差异基因GO聚类分析第58-64页
        3.3.5 差异基因信号通路分析第64-70页
        3.3.6 2-DE与基因芯片比较分析第70-72页
    3.4 差异基因与蛋白验证第72-76页
        3.4.1 RT-q PCR验证第72-75页
        3.4.2 Western blot验证第75-76页
4 讨论第76-83页
    4.1 H5N1亚型AIV感染鸡脾脏差异蛋白分析第76-79页
        4.1.1 2-DE条件选择第76页
        4.1.2 脾脏差异蛋白分离与鉴定第76页
        4.1.3 流感病毒抗原的 2-DE检测第76-77页
        4.1.4 其它蛋白的 2-DE检测第77页
        4.1.5 H5N1亚型AIV感染鸡脾脏差异蛋白功能分析第77-79页
    4.2 H5N1亚型AIV感染鸡脾脏差异基因筛选第79-81页
        4.2.1 芯片对流感病毒基因的检测分析第80页
        4.2.2 H5N1亚型AIV感染鸡脾脏差异蛋白功能分析第80页
        4.2.3 2-DE与芯片比较分析第80-81页
    4.3 差异蛋白与基因表达水平验证第81-82页
        4.3.1 RT-q PCR验证第81-82页
        4.3.2 Western blot验证第82页
    4.4 本研究的创新与不足第82-83页
        4.4.1 本研究的创新之处第82页
        4.4.2 本研究的不足之处第82-83页
5 结论第83-84页
致谢第84-85页
参考文献第85-98页
攻读博士学位期间发表的学术论文第98页

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