项目资金来源 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词中英文对照表 | 第10-15页 |
第1部分 综述 | 第15-22页 |
1. 昆虫细胞系的发展 | 第15-16页 |
2. 昆虫细胞培养技术的发展与应用 | 第16-17页 |
3. 昆虫细胞杆状病毒表达系统 | 第17页 |
4. 昆虫细胞培养基的发展 | 第17-19页 |
5. 昆虫细胞培养基的基础组分 | 第19-20页 |
6. 昆虫细胞无血清培养基中的添加物 | 第20-21页 |
7. 论文的研究目的和意义 | 第21-22页 |
第2部分 试验研究 | 第22-70页 |
第1章:Hi-five悬浮细胞系的建立及鉴定 | 第22-37页 |
1. 材料及仪器设备 | 第22-24页 |
1.1 主要材料 | 第22页 |
1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
1.3 实验动物 | 第23页 |
1.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
1.5 主要溶液及培养基配制 | 第24页 |
2. 实验方法 | 第24-26页 |
2.1 Hi-five悬浮细胞系的建立 | 第24-25页 |
2.2 复苏细胞活力测定 | 第25页 |
2.3 Hi-five悬浮细胞系的形态学观察 | 第25页 |
2.4 细胞生长及代谢特性检测 | 第25-26页 |
2.5 无菌检查 | 第26页 |
2.6 支原体检查 | 第26页 |
2.7 外源病毒污染检查 | 第26页 |
2.8 致瘤性 | 第26页 |
3. 结果 | 第26-35页 |
3.1 Hi-five悬浮细胞系的建立 | 第26页 |
3.2 复苏细胞活力 | 第26-27页 |
3.3 无血清培养Hi-five悬浮细胞的形态 | 第27页 |
3.4 细胞生长及代谢特性 | 第27-30页 |
3.5 无菌检查 | 第30页 |
3.6 支原体检查 | 第30-31页 |
3.7 外源病毒污染检查 | 第31-34页 |
3.7.1 细胞病变因子检查 | 第31页 |
3.7.2 血吸附因子检查 | 第31-32页 |
3.7.3 直接荧光抗体法特异性病毒检查 | 第32-34页 |
3.8 致瘤性检查 | 第34-35页 |
4. 小结与分析 | 第35-37页 |
第2章:Hi-five悬浮细胞无血清培养基的设计 | 第37-47页 |
1. 材料及仪器设备 | 第37-40页 |
1.1 主要材料 | 第37页 |
1.2 主要试剂 | 第37-39页 |
1.3 主要仪器设备 | 第39-40页 |
2. 方法 | 第40-44页 |
2.1 主要溶液及培养基配制 | 第40-44页 |
2.1.1 无机盐混合液的配制 | 第40页 |
2.1.2 微量元素混合液的配制 | 第40页 |
2.1.3 氨基酸混合液的配制 | 第40-42页 |
2.1.4 维生素类混合液的配制 | 第42-43页 |
2.1.5 碳水化合物混合液的制备 | 第43页 |
2.1.6 其它成分浓缩液的配制 | 第43-44页 |
2.2 基础培养基的制备及测试 | 第44页 |
3. 结果 | 第44-46页 |
4. 小结与分析 | 第46-47页 |
第3章:Hi-five悬浮细胞无血清培养基的优化 | 第47-65页 |
1. 材料及仪器设备 | 第47-48页 |
1.1 主要材料 | 第47页 |
1.2 主要试剂 | 第47页 |
1.3 主要仪器设备 | 第47-48页 |
2. 方法 | 第48-52页 |
2.1 单因素实验 | 第48-50页 |
2.1.1 葡萄糖含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第48页 |
2.1.2 酵母抽提物含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第48-49页 |
2.1.3 水解乳蛋白含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第49页 |
2.1.4 脂类复合物含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第49页 |
2.1.5 Pluronic F-68含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第49-50页 |
2.2 正交试验配方组合的筛选 | 第50-51页 |
2.3 不同接种密度实验 | 第51-52页 |
2.4 新培养基与HyQ SFX-Insect对比实验 | 第52页 |
2.5 连续传代培养实验 | 第52页 |
3 结果 | 第52-64页 |
3.1 单因素实验结果 | 第52-58页 |
3.1.1 葡萄糖含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第52-54页 |
3.1.2 酵母抽提物含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第54-55页 |
3.1.3 水解乳蛋白含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第55-56页 |
3.1.4 脂类复合物含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第56-57页 |
3.1.5 Pluronic F-68含量对Hi-five悬浮细胞生长的影响 | 第57-58页 |
3.2 正交试验配方组合的筛选 | 第58-60页 |
3.3 Hi-five悬浮细胞在H-SFM-2培养基悬浮培养实验 | 第60-64页 |
3.3.1 不同接种密度实验 | 第60页 |
3.3.2 H-SFM-2与HyQ SFX-Insect对比实验 | 第60-61页 |
3.3.3 连续传代培养实验 | 第61-64页 |
4 小结与分析 | 第64-65页 |
第4章:H-SFM-2培养基应用于Hi-five悬浮细胞的培养 | 第65-70页 |
1. 材料及仪器设备 | 第65-66页 |
1.1 主要材料 | 第65页 |
1.2 主要仪器设备 | 第65页 |
1.3 主要溶液配制 | 第65-66页 |
2. 方法 | 第66页 |
2.1 生物反应器准备 | 第66页 |
2.2 批式培养 | 第66页 |
3. 结果 | 第66-69页 |
3.1 批式培养Hi-five悬浮细胞的过程控制 | 第66-67页 |
3.2 批式培养Hi-five悬浮细胞结果 | 第67-69页 |
4. 小结与分析 | 第69-70页 |
第3部分:结论 | 第70-71页 |
1. Hi-five细胞的引进、驯化和鉴定 | 第70页 |
2. 无血清培养基的设计 | 第70页 |
3. H-SFM-2培养基应用于Hi-five悬浮细胞的生物反应器培养 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
作者简介 | 第76页 |