摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
符号说明 | 第7-11页 |
文献综述 | 第11-25页 |
参考文献 | 第19-25页 |
第一章 H9N2亚型禽流感病毒抗原变异株单抗的制备 | 第25-40页 |
1. 材料 | 第25-28页 |
1.1. 毒株 | 第25页 |
1.2. 鸡胚、实验动物及细胞 | 第25页 |
1.3. 主要仪器设备 | 第25-26页 |
1.4. 主要试剂 | 第26页 |
1.5. 试剂配制方法 | 第26-28页 |
2. 方法 | 第28-34页 |
2.1. 动物的免疫 | 第28-29页 |
2.2. 细胞融合 | 第29-30页 |
2.3. ELISA筛选方法的建立 | 第30-31页 |
2.4. 杂交瘤细胞的筛选 | 第31页 |
2.5. 杂交瘤细胞的克隆化 | 第31-32页 |
2.6. 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第32页 |
2.7. 单克隆抗体的生产 | 第32页 |
2.8. 单克隆抗体的检测 | 第32-34页 |
3. 结果 | 第34-37页 |
3.1. 纯化抗原蛋白含量的测定 | 第34页 |
3.2. ELISA最佳抗原包被浓度和最佳血清稀释度的确定 | 第34-35页 |
3.3. 动物免疫结果 | 第35页 |
3.4. 杂交瘤细胞的建株 | 第35页 |
3.5. 单克隆抗体的特异性检测结果 | 第35-36页 |
3.6. 单抗的western-blot鉴定 | 第36页 |
3.7. 单克隆抗体效价的检测结果 | 第36-37页 |
4. 讨论 | 第37-38页 |
5. 小结 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-40页 |
第二章 H9N2亚型禽流感病毒抗原变异株单抗在抗原变异机制研究中的应用 | 第40-59页 |
1. 材料 | 第40-42页 |
1.1. 毒株 | 第40页 |
1.2. 细胞系 | 第40页 |
1.3. 单抗 | 第40页 |
1.4. 菌株和质粒载体 | 第40页 |
1.5. 主要试剂 | 第40-41页 |
1.6. 主要试剂的配制 | 第41-42页 |
1.7. 主要仪器设备 | 第42页 |
2. 方法 | 第42-46页 |
2.1. H9N2亚型禽流感病毒HA基因上4个氨基酸位点的自然变异率检测 | 第42页 |
2.2. 16株单克隆抗体对mF50和F株病毒HI效价的检测 | 第42页 |
2.3. 单克隆抗体所针对位点的初步筛选 | 第42-46页 |
3. 结果 | 第46-54页 |
3.1. H9N2亚型禽流感病毒HA基因上4个氨基酸位点的自然变异率结果 | 第46页 |
3.2. PCR结果 | 第46-51页 |
3.3. 突变HA基因连T载体结果 | 第51-52页 |
3.4. 突变HA基因连pCAGGS真核载体结果 | 第52-53页 |
3.5. 重组真核表达载体质粒测序结果 | 第53页 |
3.6. 16株单抗对mF50和F株病毒HI效价结果 | 第53页 |
3.7. 细胞ELISA检测结果 | 第53-54页 |
4. 讨论 | 第54-56页 |
5. 小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
全文小结 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |