摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-31页 |
1 叶色突变体的研究概况 | 第13-25页 |
1.1 叶色突变体的分类 | 第13页 |
1.2 叶色突变体的来源 | 第13-14页 |
1.3 叶色突变体的基因克隆 | 第14-23页 |
1.3.1 叶绿素合成和降解途径相关基因的克隆 | 第14-19页 |
1.3.2 叶绿体发育相关基因的克隆 | 第19-23页 |
1.4 叶色突变体的应用 | 第23-25页 |
1.4.1 在基础研究中的应用价值 | 第23-24页 |
1.4.2 在生产实践中的应用价值 | 第24-25页 |
2 酰胺-tRNA合酶的研究进展 | 第25-30页 |
2.1 酰胺-tRNA合成酶的分类 | 第25-26页 |
2.2 酰胺-tRNA合成酶的其它功能及应用 | 第26-27页 |
2.3 酰胺-tRNA合成酶的亚细胞定位 | 第27-29页 |
2.4 植物中酰胺-tRNA合成酶的克隆及功能分析 | 第29-30页 |
3 本研究的目的意义 | 第30-31页 |
第二章 水稻白穗突变体wp1的表型及精细定位 | 第31-45页 |
1 材料与方法 | 第31-34页 |
1.1 实验材料和种植条件 | 第31-32页 |
1.2 叶绿素含量测定 | 第32页 |
1.3 叶绿素荧光观察 | 第32页 |
1.4 叶绿体透射电镜观察 | 第32页 |
1.5 农艺性状调查 | 第32页 |
1.6 wp1的遗传分析 | 第32页 |
1.7 WP1的定位 | 第32-34页 |
1.7.1 DNA样品制备 | 第32-33页 |
1.7.2 PCR反应 | 第33页 |
1.7.3 PAGE凝胶电泳 | 第33-34页 |
1.7.4 标记筛选,设计及定位 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-43页 |
2.1 wp1突变体苗期表型观察 | 第34-37页 |
2.2 wp1抽穗期表型观察 | 第37-39页 |
2.3 wp1早期叶绿体发育过程观察 | 第39-41页 |
2.4 wp1的遗传分析 | 第41-42页 |
2.5 WP1基因的定位 | 第42-43页 |
3 小结 | 第43-45页 |
第三章 WP的克隆和功能研究 | 第45-75页 |
1 材料和方法 | 第45-51页 |
1.1 实验材料及种植 | 第45-46页 |
1.2 RNA提取及反转录 | 第46-47页 |
1.3 Real-TimePCR分析 | 第47页 |
1.4 互补载体构建,遗传转化及转基因植株鉴定 | 第47页 |
1.5 水稻原生质体分离及亚细胞定位 | 第47-48页 |
1.6 烟草细胞中的亚细胞定位 | 第48-49页 |
1.7 RNA-seq分析 | 第49页 |
1.8 植物蛋白提取 | 第49-50页 |
1.9 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第50页 |
1.10 Western-Blot分析 | 第50-51页 |
1.11 叶绿体RNA分析 | 第51页 |
2 结果与分析 | 第51-73页 |
2.1 突变基因wp1的确定 | 第51-52页 |
2.2 wp1的转基因互补 | 第52-53页 |
2.3 WP1同源比对 | 第53-55页 |
2.4 WP1的表达分析 | 第55-56页 |
2.5 叶绿素合成途径相关基因的表达 | 第56页 |
2.6 WP1及水稻中另外两个缬氨酸-tRNA合成酶的表达 | 第56-58页 |
2.7 WP1及OsValRS1在水稻原生质体中的定位 | 第58页 |
2.8 WP1在烟草表皮细胞以及AtValRS2在水稻原生质体中的定位 | 第58-60页 |
2.9 wp1突变体和野生型中的表达差异分析 | 第60-66页 |
2.9.1 RNA-seq分析的基本分析 | 第60-62页 |
2.9.2 核编码光合系统相关基因的差异分析及氨基酸代谢相关基因差异分析 | 第62-64页 |
2.9.3 质体基因组编码基因差异分析 | 第64-66页 |
2.10 Rubisco相关蛋白的含量分析 | 第66-67页 |
2.11 质体编码蛋白含量分析 | 第67-69页 |
2.12 线粒体结构观察及线粒体编码蛋白含量分析 | 第69-70页 |
2.13 突变体中质体核糖体分析 | 第70-71页 |
2.14 野生型和突变体中线粒体核糖体分析 | 第71-73页 |
3 小结 | 第73-75页 |
第四章 全文结论与讨论 | 第75-79页 |
1 全文结论与讨论 | 第75-78页 |
1.1 WP1在质体的早期发育中起到关键的作用 | 第75-76页 |
1.2 WP1是一个双定位在叶绿体和线粒体的蛋白 | 第76-77页 |
1.3 WP1影响质体的基因表达和蛋白合成 | 第77-78页 |
2 本文的创新之处 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-87页 |
附录 | 第87-95页 |
在读期间发表的论文 | 第95-97页 |
致谢 | 第97页 |