| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第12-29页 |
| 1.1 DMIs类药物研究及真菌抗药性的产生 | 第12-15页 |
| 1.1.1 DMIs类药物研究 | 第12-14页 |
| 1.1.2 真菌抗药性的产生 | 第14-15页 |
| 1.2 真菌对DMIs类药物的抗性机制 | 第15-21页 |
| 1.2.1 CYP51与真菌抗药性 | 第15-18页 |
| 1.2.2 药泵蛋白与真菌抗药性 | 第18-20页 |
| 1.2.3 转录因子与真菌抗药性 | 第20-21页 |
| 1.3 MFS转运蛋白 | 第21-27页 |
| 1.3.1 MFS转运蛋白概述 | 第21-23页 |
| 1.3.2 MFS转运蛋白的结构 | 第23-26页 |
| 1.3.3 MFS转运蛋白的作用机理 | 第26-27页 |
| 1.4 本文研究内容及意义 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第29页 |
| 2.1.2 培养基 | 第29-30页 |
| 2.1.3 化学试剂及药品 | 第30页 |
| 2.1.4 工具酶与试剂盒 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-40页 |
| 2.2.1 真菌基因组DNA与总RNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.2 Pdmfs2基因的克隆 | 第32页 |
| 2.2.3 基因及蛋白质序列分析 | 第32页 |
| 2.2.4 反转录与荧光定量(RT-PCR) | 第32-33页 |
| 2.2.5 基因敲除质粒的构建 | 第33-34页 |
| 2.2.6 基因回补质粒的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.7 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第35页 |
| 2.2.8 指状青霉的遗传转化与转化子筛选 | 第35-37页 |
| 2.2.9 Southern blot分析 | 第37-38页 |
| 2.2.10 对于咪酰胺EC_(50)值测定 | 第38页 |
| 2.2.11 生长速率测定 | 第38-39页 |
| 2.2.12 产孢率测定 | 第39页 |
| 2.2.13 对于柑橘类水果侵染毒力测定 | 第39页 |
| 2.2.14 统计分析 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-55页 |
| 3.1 Pdmfs2基因的克隆及序列分析 | 第40-43页 |
| 3.2 Pdmfs2的转录水平分析 | 第43-44页 |
| 3.3 Pdmfs2基因敲除及回补质粒构建 | 第44-48页 |
| 3.4 Pdmfs2突变菌株的筛选与分析 | 第48-51页 |
| 3.5 PdMFS2对于指状青霉咪酰胺抗性及生长速率的作用 | 第51-52页 |
| 3.6 PdMFS2影响指状青霉产孢率及致毒力 | 第52-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67页 |
| 衷心感谢以下基金资助 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |