| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 1 实验材料 | 第13-16页 |
| 1.1 细胞及组织 | 第13页 |
| 1.2 主要试剂 | 第13-15页 |
| 1.3 主要仪器 | 第15-16页 |
| 2 实验方法 | 第16-21页 |
| 2.1 液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)条件 | 第16页 |
| 2.2 p53和MDM2贮备液、标准曲线和质控样品的配制 | 第16-17页 |
| 2.3 细胞培养和组织收集 | 第17-18页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第17页 |
| 2.3.2 组织收集 | 第17-18页 |
| 2.4 基质溶液的制备 | 第18页 |
| 2.5 总蛋白的提取 | 第18-19页 |
| 2.5.1 细胞总蛋白的提取 | 第18页 |
| 2.5.2 组织总蛋白的提取 | 第18-19页 |
| 2.6 免疫共沉淀(Co-IP) | 第19页 |
| 2.7 溶液内酶解反应及固相萃取(SPE)的富集纯化 | 第19-20页 |
| 2.8 稳定同位素标记的肽段内标物 | 第20页 |
| 2.9 方法学的考察 | 第20页 |
| 2.10 蛋白免疫印迹(westem blotting) | 第20-21页 |
| 2.11 nutlin3抑制试验 | 第21页 |
| 3 结果与讨论 | 第21-34页 |
| 3.1 特异性肽段的选择 | 第21-23页 |
| 3.2 p53和MDM2胰蛋白酶水解效率的考察 | 第23-25页 |
| 3.3 p53-MDM2的相互作用 | 第25-27页 |
| 3.4 p53和MDM2的LC-MS/MS方法的建立及验证 | 第27-29页 |
| 3.5 乳腺癌细胞中p53、MDM2总量及p53-MDM2结合量的测定 | 第29-31页 |
| 3.6 乳腺癌组织中p53、MDM2总量及p53-MDM2结合量的测定 | 第31-32页 |
| 3.7 nutlin-3抑制剂对MCF-7细胞中p53-MDM2的作用 | 第32-34页 |
| 4 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-40页 |
| 综述 | 第40-52页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 硕士研究生期间发表文章情况 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
