| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-28页 |
| 1 引言 | 第10-11页 |
| 2 病毒的发现 | 第11-12页 |
| 2.1 猪圆环病毒 | 第11页 |
| 2.2 P1病毒 | 第11-12页 |
| 3 病原学 | 第12-13页 |
| 3.1 猪圆环病毒 | 第12-13页 |
| 3.2 P1病毒 | 第13页 |
| 4 流行病学 | 第13-14页 |
| 4.1 PCV | 第13-14页 |
| 4.2 P1病毒 | 第14页 |
| 5 临床症状及致病机理 | 第14-15页 |
| 5.1 PCV2 | 第14页 |
| 5.2 P1病毒 | 第14-15页 |
| 6 实验室诊断技术的研究进展 | 第15-17页 |
| 6.1 病毒的分离鉴定 | 第15-16页 |
| 6.2 电镜 | 第16页 |
| 6.3 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第16页 |
| 6.4 免疫组织化学(IHC) | 第16-17页 |
| 6.5 聚合酶链式反应(PCR) | 第17页 |
| 7 大肠杆菌及昆虫细胞表达系统的研究进展 | 第17-20页 |
| 7.1 大肠杆菌表达系统 | 第18页 |
| 7.2 昆虫细胞表达系统 | 第18-20页 |
| 参考文献 | 第20-28页 |
| 第二部分 试验部分 | 第28-72页 |
| 第一章 类猪圆环病毒P1 ORF2和ORF3的鉴定 | 第28-50页 |
| 1 材料和方法 | 第29-37页 |
| 1.1 分子克隆、细胞和实验动物 | 第29-30页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第30页 |
| 1.3 引物设计与合成 | 第30-31页 |
| 1.4 pSK-P1的转染 | 第31-32页 |
| 1.5 P1病毒RNA的提取及纯化 | 第32页 |
| 1.6 转录分析 | 第32-36页 |
| 1.7 P1病毒ORF2、ORF3抗原表位的分析、多肽的合成及偶联 | 第36页 |
| 1.8 兔抗P1 ORF2、ORF3抗体的制备 | 第36-37页 |
| 1.9 免疫组化 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-44页 |
| 2.1 RT-PCR结果 | 第37-39页 |
| 2.2 5'-RACE和3'-RACE | 第39-41页 |
| 2.3 抗原表位分析及多克隆抗体的效价 | 第41-43页 |
| 2.4 免疫组化染色结果 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 第二章 类猪圆环病毒P1三种主要蛋白在昆虫细胞中的表达分析 | 第50-72页 |
| 1 材料与方法 | 第51-60页 |
| 1.1 试验材料 | 第51页 |
| 1.2 主要仪器及试剂 | 第51-52页 |
| 1.3 基因表达载体的构建及鉴定 | 第52-56页 |
| 1.4 重组杆状病毒的获得、传代及PCR鉴定 | 第56-57页 |
| 1.5 目的基因表达的鉴定 | 第57-59页 |
| 1.6 电镜观察 | 第59-60页 |
| 2 结果 | 第60-67页 |
| 2.1 目的基因的扩增及pFast-ORF1、pFast-ORF2和pFast-ORF3的构建 | 第60-61页 |
| 2.2 重组杆粒及重组杆状病毒的获得及鉴定 | 第61-63页 |
| 2.3 目的基因表达的鉴定 | 第63-67页 |
| 2.4 电镜观察 | 第67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-72页 |
| 全文总结 | 第72-74页 |
| 附录 常用试剂的配制 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第78页 |
