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水稻盐敏感突变基因rss2的定位、克隆与功能分析

摘要第8-11页
ABSTRACT第11-13页
全文缩略语第14-16页
第一章 文献综述第16-42页
    1 植物盐胁迫研究概述第16-24页
        1.1 植物耐盐性遗传分类第16页
        1.2 植物盐害第16-17页
            1.2.1 渗透胁迫第16-17页
            1.2.2 离子毒害第17页
        1.3 植物在细胞水平对盐的适应第17-21页
            1.3.1 胞内Na~+平衡第17-20页
            1.3.2 细胞响应盐胁迫的信号传导途径第20-21页
        1.4 植物在整体水平对盐的适应第21-24页
            1.4.1 调节土壤Na~+向木质部的运输第21-23页
            1.4.2 Na~+从地下部向地上部的转运第23-24页
            1.4.3 Na~+在叶片中的平衡第24页
            1.4.4 Na~+通过韧皮部的回流第24页
    2 耐盐性QTL第24-28页
        2.1 水稻耐盐QTL定位第24-27页
        2.2 耐盐或盐敏感突变体筛选及基因克隆第27-28页
    3 ABC转运蛋白第28-40页
        3.1 PDR分类与结构第30-32页
        3.2 PDR转运机理第32-34页
        3.3 PDR基因表达谱第34-36页
        3.4 PDR功能第36-40页
            3.4.1 PDR参与对重金属的解毒第36-37页
            3.4.2 PDR参与植物激素转运第37页
            3.4.3 PDR参与防止水分流失第37-38页
            3.4.4 PDR参与植物次生代谢物的分泌第38-40页
    4 本研究的目的和意义第40-42页
第二章 水稻盐敏感突变体rss2的形态学和耐盐性相关的生理特征第42-54页
    1 材料第42-43页
    2 方法第43-45页
        2.1 水稻耐盐或感盐突变体的筛选第43页
        2.2 rss2突变体农艺性状分析第43页
        2.3 水稻幼苗室内培养第43-44页
            2.3.1 rss2突变体水培及盐处理第43页
            2.3.2 rss2突变体土培及盐处理第43-44页
        2.4 离子含量测定方法第44页
            2.4.1 Na~+和K~+含量测定方法第44页
            2.4.2 Cl~-含量测定方法第44页
        2.5 萌发率测定第44页
        2.6 rss2突变体失水率和蒸腾速率的测定第44-45页
    3 结果和分析第45-52页
        3.1 rss2突变体的农艺性状分析第45页
        3.2 rss2突变体的耐盐性分析第45-50页
            3.2.1 rss2突变体耐盐表型第45-47页
            3.2.2 rss2突变体耐盐生理分析第47-50页
            3.2.3 rss2突变体土培耐盐分析第50页
        3.3 rss2突变体盐胁迫下萌发率降低第50-51页
        3.4 rss2突变体失水率和蒸腾速率分析第51-52页
    4 小结与讨论第52-54页
第三章 RSS2基因的图位克隆和互补验证第54-80页
    1 材料第55-58页
        1.1 植物材料第55页
        1.2 载体、菌株和培养基第55-57页
        1.3 主要试剂和试剂盒第57-58页
    2 方法第58-66页
        2.1 水稻基因组DNA提取方法(CTAB法)第58-59页
        2.2 分子标记的开发和应用第59页
        2.3 QTL定位第59页
        2.4 RSS2基因突变位点的鉴定第59-60页
        2.5 植物总RNA提取和反转录方法第60-61页
        2.6 RSS2转基因互补验证第61-63页
            2.6.1 RSS2互补载体的构建第61-62页
            2.6.2 RSS2互补载体转化第62页
            2.6.3 T_0和T_2转基因阳性植株的鉴定第62-63页
        2.7 载体构建第63-65页
        2.8 水稻转基因方法第65-66页
    3 结果和分析第66-77页
        3.1 rss2突变体的遗传分析第66-67页
        3.2 定位群体耐盐性鉴定第67-68页
        3.3 分子连锁图谱的构建第68-69页
        3.4 RSS2基因的QTL定位第69-72页
        3.5 RSS2基因的精细定位和候选基因的鉴定第72-74页
        3.6 ospdr12突变体的鉴定和耐盐性分析第74-75页
        3.7 RSS2基因的转基因互补验证第75-77页
    4 小结和讨论第77-80页
第四章 RSS2.3基因生物信息学和功能分析第80-104页
    1 材料第80-83页
        1.1 植物材料第80页
        1.2 载体、菌株和培养基第80-81页
        1.3 试剂和试剂盒第81-83页
    2 方法第83-91页
        2.1 RSS2氨基酸序列分析第83页
        2.2 RSS2.3转运蛋白的跨膜拓扑结构分析第83页
        2.3 RSS2.3基因RT-PCR表达分析第83-85页
        2.4 35S::RSS2.3::GFP融合基因的亚细胞定位第85-87页
            2.4.1 35S::RSS2.3::GFP融合载体的构建第85页
            2.4.2 35S::RSS2.3::GFP融合基因在水稻中的亚细胞定位分析第85-86页
            2.4.3 35S::RSS2.3::GFP融合基因在洋葱表皮细胞的亚细胞定位分析第86页
            2.4.4 GFP荧光的观察第86-87页
        2.5 大量提取质粒的方法第87-88页
        2.6 RSS2.3蛋白在水稻中的组织定位第88页
        2.7 RSS2.3酵母异源表达第88-90页
            2.7.1 酵母感受态的制备和转化方法第88-89页
            2.7.2 酵母功能互补第89-90页
        2.8 RSS2.3电生理分析第90页
        2.9 木质部液和韧皮部液的收集第90-91页
    3 结果和分析第91-101页
        3.1 OsPDR12基因的序列分析第91页
        3.2 RSS2氨基酸序列分析第91-93页
        3.3 RSS2.3转运蛋白的跨膜拓扑结构分析第93页
        3.4 35S::RSS2.3::GFP融合基因的亚细胞定位第93-94页
        3.5 RSS2.3基因的RT-PCR表达分析第94-96页
        3.6 RSS2.3在酵母中的功能分析第96-98页
        3.7 RSS2.3电生理分析第98-99页
        3.8 韧皮部液中Na~+含量的测定第99-100页
        3.9 木质部液中Na~+含量的测定第100-101页
    4 小结和讨论第101-104页
全文结论和创新之处第104-106页
参考文献第106-120页
附录第120-124页
博士期间发表和完成的论文第124-126页
致谢第126页

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