摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
全文缩略语 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-42页 |
1 植物盐胁迫研究概述 | 第16-24页 |
1.1 植物耐盐性遗传分类 | 第16页 |
1.2 植物盐害 | 第16-17页 |
1.2.1 渗透胁迫 | 第16-17页 |
1.2.2 离子毒害 | 第17页 |
1.3 植物在细胞水平对盐的适应 | 第17-21页 |
1.3.1 胞内Na~+平衡 | 第17-20页 |
1.3.2 细胞响应盐胁迫的信号传导途径 | 第20-21页 |
1.4 植物在整体水平对盐的适应 | 第21-24页 |
1.4.1 调节土壤Na~+向木质部的运输 | 第21-23页 |
1.4.2 Na~+从地下部向地上部的转运 | 第23-24页 |
1.4.3 Na~+在叶片中的平衡 | 第24页 |
1.4.4 Na~+通过韧皮部的回流 | 第24页 |
2 耐盐性QTL | 第24-28页 |
2.1 水稻耐盐QTL定位 | 第24-27页 |
2.2 耐盐或盐敏感突变体筛选及基因克隆 | 第27-28页 |
3 ABC转运蛋白 | 第28-40页 |
3.1 PDR分类与结构 | 第30-32页 |
3.2 PDR转运机理 | 第32-34页 |
3.3 PDR基因表达谱 | 第34-36页 |
3.4 PDR功能 | 第36-40页 |
3.4.1 PDR参与对重金属的解毒 | 第36-37页 |
3.4.2 PDR参与植物激素转运 | 第37页 |
3.4.3 PDR参与防止水分流失 | 第37-38页 |
3.4.4 PDR参与植物次生代谢物的分泌 | 第38-40页 |
4 本研究的目的和意义 | 第40-42页 |
第二章 水稻盐敏感突变体rss2的形态学和耐盐性相关的生理特征 | 第42-54页 |
1 材料 | 第42-43页 |
2 方法 | 第43-45页 |
2.1 水稻耐盐或感盐突变体的筛选 | 第43页 |
2.2 rss2突变体农艺性状分析 | 第43页 |
2.3 水稻幼苗室内培养 | 第43-44页 |
2.3.1 rss2突变体水培及盐处理 | 第43页 |
2.3.2 rss2突变体土培及盐处理 | 第43-44页 |
2.4 离子含量测定方法 | 第44页 |
2.4.1 Na~+和K~+含量测定方法 | 第44页 |
2.4.2 Cl~-含量测定方法 | 第44页 |
2.5 萌发率测定 | 第44页 |
2.6 rss2突变体失水率和蒸腾速率的测定 | 第44-45页 |
3 结果和分析 | 第45-52页 |
3.1 rss2突变体的农艺性状分析 | 第45页 |
3.2 rss2突变体的耐盐性分析 | 第45-50页 |
3.2.1 rss2突变体耐盐表型 | 第45-47页 |
3.2.2 rss2突变体耐盐生理分析 | 第47-50页 |
3.2.3 rss2突变体土培耐盐分析 | 第50页 |
3.3 rss2突变体盐胁迫下萌发率降低 | 第50-51页 |
3.4 rss2突变体失水率和蒸腾速率分析 | 第51-52页 |
4 小结与讨论 | 第52-54页 |
第三章 RSS2基因的图位克隆和互补验证 | 第54-80页 |
1 材料 | 第55-58页 |
1.1 植物材料 | 第55页 |
1.2 载体、菌株和培养基 | 第55-57页 |
1.3 主要试剂和试剂盒 | 第57-58页 |
2 方法 | 第58-66页 |
2.1 水稻基因组DNA提取方法(CTAB法) | 第58-59页 |
2.2 分子标记的开发和应用 | 第59页 |
2.3 QTL定位 | 第59页 |
2.4 RSS2基因突变位点的鉴定 | 第59-60页 |
2.5 植物总RNA提取和反转录方法 | 第60-61页 |
2.6 RSS2转基因互补验证 | 第61-63页 |
2.6.1 RSS2互补载体的构建 | 第61-62页 |
2.6.2 RSS2互补载体转化 | 第62页 |
2.6.3 T_0和T_2转基因阳性植株的鉴定 | 第62-63页 |
2.7 载体构建 | 第63-65页 |
2.8 水稻转基因方法 | 第65-66页 |
3 结果和分析 | 第66-77页 |
3.1 rss2突变体的遗传分析 | 第66-67页 |
3.2 定位群体耐盐性鉴定 | 第67-68页 |
3.3 分子连锁图谱的构建 | 第68-69页 |
3.4 RSS2基因的QTL定位 | 第69-72页 |
3.5 RSS2基因的精细定位和候选基因的鉴定 | 第72-74页 |
3.6 ospdr12突变体的鉴定和耐盐性分析 | 第74-75页 |
3.7 RSS2基因的转基因互补验证 | 第75-77页 |
4 小结和讨论 | 第77-80页 |
第四章 RSS2.3基因生物信息学和功能分析 | 第80-104页 |
1 材料 | 第80-83页 |
1.1 植物材料 | 第80页 |
1.2 载体、菌株和培养基 | 第80-81页 |
1.3 试剂和试剂盒 | 第81-83页 |
2 方法 | 第83-91页 |
2.1 RSS2氨基酸序列分析 | 第83页 |
2.2 RSS2.3转运蛋白的跨膜拓扑结构分析 | 第83页 |
2.3 RSS2.3基因RT-PCR表达分析 | 第83-85页 |
2.4 35S::RSS2.3::GFP融合基因的亚细胞定位 | 第85-87页 |
2.4.1 35S::RSS2.3::GFP融合载体的构建 | 第85页 |
2.4.2 35S::RSS2.3::GFP融合基因在水稻中的亚细胞定位分析 | 第85-86页 |
2.4.3 35S::RSS2.3::GFP融合基因在洋葱表皮细胞的亚细胞定位分析 | 第86页 |
2.4.4 GFP荧光的观察 | 第86-87页 |
2.5 大量提取质粒的方法 | 第87-88页 |
2.6 RSS2.3蛋白在水稻中的组织定位 | 第88页 |
2.7 RSS2.3酵母异源表达 | 第88-90页 |
2.7.1 酵母感受态的制备和转化方法 | 第88-89页 |
2.7.2 酵母功能互补 | 第89-90页 |
2.8 RSS2.3电生理分析 | 第90页 |
2.9 木质部液和韧皮部液的收集 | 第90-91页 |
3 结果和分析 | 第91-101页 |
3.1 OsPDR12基因的序列分析 | 第91页 |
3.2 RSS2氨基酸序列分析 | 第91-93页 |
3.3 RSS2.3转运蛋白的跨膜拓扑结构分析 | 第93页 |
3.4 35S::RSS2.3::GFP融合基因的亚细胞定位 | 第93-94页 |
3.5 RSS2.3基因的RT-PCR表达分析 | 第94-96页 |
3.6 RSS2.3在酵母中的功能分析 | 第96-98页 |
3.7 RSS2.3电生理分析 | 第98-99页 |
3.8 韧皮部液中Na~+含量的测定 | 第99-100页 |
3.9 木质部液中Na~+含量的测定 | 第100-101页 |
4 小结和讨论 | 第101-104页 |
全文结论和创新之处 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-120页 |
附录 | 第120-124页 |
博士期间发表和完成的论文 | 第124-126页 |
致谢 | 第126页 |