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矿物风化细菌的筛选及谷氨酰胺抑制菌株S71风化黑云母机制研究

摘要第9-11页
ABSTRACT第11-12页
符号及缩略语说明第13-14页
第一章 文献综述第14-28页
    第一节 矿物风化细菌资源第14-16页
    第二节 细菌矿物风化作用的研究意义第16-17页
    第三节 微生物风化矿物机理及其影响因素第17-22页
        1 有机酸的酸解与络合作用第17-18页
        2 微生物形成生物膜第18-19页
        3 氧化还原作用第19-20页
        4 微生物产铁载体等络合物风化矿物研究第20-21页
        5 微生物风化矿物其他机理第21页
        6 环境条件对细菌风化矿物的影响第21-22页
    第四节 谷氨酰胺(Glutamine,Gln)的生理作用第22-24页
        1 谷氨酰胺第22页
        2 谷氨酰胺与铵同化第22-23页
        3 谷氨酰胺与细菌耐酸第23页
        4 谷氨酰胺与细菌氮代谢调控第23-24页
    第五节 与丙酮酸相关的代谢产物合成第24-27页
        1 丙氨酸合成第24-25页
        2 缬氨酸合成第25页
        3 乙酸合成第25-27页
    第六节 本课题的研究目的与意义第27-28页
第二章 高效黑云母风化细菌的分离与鉴定第28-62页
    第一节 黑云母风化细菌的分离与鉴定及其对黑云母的风化作用第28-37页
        1 材料第28-29页
            1.1 植物与土壤样品采集第28页
            1.2 水洗黑云坶矿粉准备第28页
            1.3 培养基第28-29页
            1.4 仪器第29页
        2 方法第29-32页
            2.1 细菌分离纯化第29-30页
            2.2 供试菌株对黑云母风化作用第30页
            2.3 供试菌株的限制性片段长度多态性分析(Amplified ribosomal DNA restriction analysis,ARDRA)第30-32页
            2.4 发酵液中有机酸含量测定第32页
        3 结果与分析第32-35页
            3.1 细菌分离纯化第32页
            3.2 高效黑云母风化细菌筛选第32-33页
            3.3 供试菌株ARDRA分析第33-35页
        4 讨论第35-37页
    第二节 菌株S71生理生化特征及其对黑云母的风化作用第37-52页
        1 材料第37-38页
            1.1 供试菌株与培养基第37页
            1.2 实验试剂第37页
            1.3 仪器设备第37-38页
        2 方法第38-41页
            2.1 菌株S71生理生化特征第38-39页
            2.2 菌株S71产铁载体类型分析第39页
            2.3 菌株S71系统发育关系确定第39页
            2.4 菌株S71 rpoB基因克隆、测序与系统进化分析第39-40页
            2.5 菌株S71在改良BHm培养基条件下产有机酸测定第40页
            2.6 环境条件对菌株S71风化黑云母影响第40-41页
        3 结果与分析第41-50页
            3.1 菌株S71生理生化特征第41-42页
            3.2 菌株S71产铁载体测定第42页
            3.3 菌株S71 16S rDNA系统发育地位分析第42-43页
            3.4 菌株S71 rpoB系统发育地位分析第43-44页
            3.5 菌株S71在改良BHm培养基中风化黑云母作用及产有机酸类型第44-46页
            3.6 环境条件对菌株S71风化黑云母影响第46-50页
        4 讨论第50-52页
    第三节 矿物风化细菌TH-19的分类地位研究第52-62页
        1 材料第52-53页
            1.1 菌株第52页
            1.2 培养基第52-53页
            1.3 仪器设备第53页
        2 方法第53-56页
            2.1 菌株TH-19体形态观察第53页
            2.2 菌株TH-19生理生化与碳源利用测定第53-54页
            2.3 菌体细胞脂肪酸成份分析第54页
            2.4 菌体醌类型分析第54-55页
            2.5 细菌16S rDNA序列分析第55页
            2.6 细菌DNA的G+C mol%含量的测定第55-56页
            2.7 DNA-DNA同源性分析第56页
        3 结果与分析第56-62页
            3.1 菌株TH-19菌形态第56-57页
            3.2 菌株TH-19生理生化与碳源利用测定第57-58页
            3.3 菌株TH-19菌体细胞脂肪酸与醌组成分析第58-59页
            3.4 菌株TH-19 16S rDNA系统发育分析第59-60页
            3.5 菌株TH-19 DNA的G+C mol%含量分析第60页
            3.6 菌株TH-19 DNA-DNA同源性分析第60-62页
第三章 谷氨酰胺对菌株S71风化黑云母的影响第62-86页
    第一节 谷氨酰胺对菌株S71风化黑云母的影响第62-77页
        1 材料与试剂第62-63页
            1.1 菌株第62页
            1.2 培养基第62页
            1.3 试剂第62-63页
            1.4 仪器第63页
        2 方法第63-65页
            2.1 谷氨酰胺对菌株S71风化黑云母的影响第63-64页
            2.2 不同浓度Gln对菌株S71风化黑云母的影响第64页
            2.3 Gln对不同种属细菌风化黑云母的影响第64-65页
            2.4 不同氨基酸对S71风化黑云母的影响第65页
        3 结果与分析第65-75页
            3.1 Gln对菌株S71风化黑云母的影响第65-69页
            3.2 不同浓度Gln对菌株S71风化黑云母的影响第69-71页
            3.3 Gln对不同种属细菌风化黑云母的影响第71-73页
            3.4 氨基酸对菌株S71风化黑云母的影响第73-75页
        4 讨论第75-77页
    第二节 谷氨酰胺对菌株S71细胞内代谢物的影响第77-86页
        1 材料与试剂第77-78页
            1.1 材料第77页
            1.2 培养基第77页
            1.3 试剂第77页
            1.4 仪器第77-78页
        2 方法第78-79页
            2.1 细胞内代谢物提取第78页
            2.2 细胞内代谢物衍生化第78页
            2.3 细胞内代谢物GC-MS分析条件第78-79页
            2.4 特征代谢物的鉴定第79页
            2.5 代谢物数据分析第79页
        3 结果与分析第79-83页
            3.1 菌株S71细胞内代谢物分析第79-83页
        4 讨论第83-86页
第四章 乙酸合成基因突变对菌株S71风化黑云母的影响第86-122页
    第一节 poxB基因突变对菌株S71风化黑云母的影响第86-102页
        1 试验材料第86-88页
            1.1 菌株与质粒第86-87页
            1.2 培养基第87页
            1.3 仪器第87-88页
            1.4 酶和试剂第88页
        2 方法第88-95页
            2.1 细菌总DNA提取第88页
            2.2 感受态细胞制备第88页
            2.3 发酵液中Al含量测定-铝试剂比色法第88-89页
            2.4 发酵液中Fe含量测定-邻菲罗啉比色法第89页
            2.5 poxB基因序列扩增第89页
            2.6 poxB基因的敲除第89-95页
            2.7 poxB基因敲除对S71产乙酸及其风化黑云母的影响第95页
        3 结果第95-100页
            3.1 poxB基因及其侧翼序列扩增与序列测定第95页
            3.2 菌株S71 poxB基因敲除第95-97页
            3.3 poxB墓因敲除对S71产乙酸及其风化黑云母的影响第97-100页
        4 讨论第100-102页
    第二节 pta、ackA基因突变对菌株S71风化黑云母的影响第102-122页
        1 试验材料第102页
            1.1 菌株与质粒第102页
            1.2 培养基与培养条件第102页
            1.3 仪器第102页
            1.4 酶和试剂第102页
        2 方法第102-110页
            2.1 细菌总DNA提取第102页
            2.2 pta、ackA基因序列扩增第102-103页
            2.3 pta、ackA基因的敲除第103-108页
            2.4 pta、ackA基因功能回补第108-110页
            2.5 pta、ackA基因敲除对S71风化黑云母以及其产乙酸的影响第110页
        3 结果与分析第110-120页
            3.1 pta、ackA基因序列扩增第110-111页
            3.2 pta、ackA基因的敲除第111-113页
            3.3 pta、ackA基因的功能回补第113-114页
            3.4 pta、ackA基因敲除对菌株S71产乙酸及其风化黑云母的影响第114-120页
        4 讨论第120-122页
全文总结第122-124页
本文创新之处第124-126页
研究展望第126-128页
参考文献第128-142页
附录第142-160页
攻读博士学位期间发表与待发表论文第160-162页
致谢第162页

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