| 摘要 | 第9-11页 |
| 主要符号表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1 棉花细胞质雄性不育的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1 细胞学研究 | 第12-13页 |
| 1.2 生理生化研究 | 第13-14页 |
| 1.3 分子水平研究 | 第14页 |
| 2 细胞质雄性不育与细胞凋亡 | 第14-16页 |
| 2.1 细胞凋亡过程 | 第15页 |
| 2.2 植物生殖生长过程中的细胞凋亡 | 第15-16页 |
| 2.3 绒毡层细胞的降解 | 第16页 |
| 2.4 绒毡层与细胞质雄性不育 | 第16页 |
| 3 细胞质雄性不育与活性氧 | 第16-20页 |
| 3.1 活性氧的产生 | 第17-19页 |
| 3.2 活性氧诱导细胞发生凋亡 | 第19-20页 |
| 3.3 活性氧的防御与清除机制 | 第20页 |
| 3.4 活性氧与细胞质雄性不育 | 第20页 |
| 4 交替氧化酶(AOX)的研究进展 | 第20-24页 |
| 4.1 AOX的结构 | 第21页 |
| 4.2 AOX1基因的克隆 | 第21-22页 |
| 4.3 交替氧化酶的功能 | 第22-24页 |
| 4.3.1 AOX与能量代谢 | 第22页 |
| 4.3.2 AOX与活性氧 | 第22-23页 |
| 4.3.3 AOX与细胞凋亡 | 第23-24页 |
| 5 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
| 6 技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 棉花细胞质雄性不育生理生化研究 | 第26-34页 |
| 1 材料与方法 | 第26-29页 |
| 1.1 材料 | 第26页 |
| 1.1.1 花蕾的采集 | 第26页 |
| 1.2 实验仪器与主要试剂 | 第26-27页 |
| 1.2.1 过氧化氢含量测定试剂 | 第26页 |
| 1.2.2 丙二醛含量测定试剂 | 第26-27页 |
| 1.2.3 类胡萝卜素含量测定试剂 | 第27页 |
| 1.2.4 实验仪器 | 第27页 |
| 1.3 实验方法 | 第27-29页 |
| 1.3.1 过氧化氢含量测定 | 第27-28页 |
| 1.3.2 丙二醛含量测定 | 第28页 |
| 1.3.3 类胡萝卜素含量测定 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-32页 |
| 2.1 棉花晋A不育系败育过程中活性氧指标的变化 | 第29-30页 |
| 2.2 棉花亚棉A不育系败育过程中活性氧指标的变化 | 第30-31页 |
| 2.3 棉花晋A不育系败育过程中类胡萝卜素含量的变化 | 第31-32页 |
| 2.4 棉花亚棉A不育系败育过程中类胡萝卜素含量的变化 | 第32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 3.1 活性氧物质代谢失调与细胞质雄性不育 | 第32页 |
| 3.2 活性氧清除系统紊乱与细胞质雄性不育 | 第32-34页 |
| 第三章 晋A不育系及其保持系细胞凋亡检测和过氧化氢的亚细胞定位 | 第34-46页 |
| 1 材料与方法 | 第34-38页 |
| 1.1 材料 | 第34页 |
| 1.1.1 花蕾的采集 | 第34页 |
| 1.2 实验仪器与主要试剂 | 第34-35页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第34-35页 |
| 1.2.2 实验仪器 | 第35页 |
| 1.3 实验方法 | 第35-38页 |
| 1.3.1 石蜡切片的制作 | 第35页 |
| 1.3.2 DAPI染色 | 第35-36页 |
| 1.3.3 TUNEL细胞凋亡检测 | 第36-37页 |
| 1.3.4 超薄切片制作 | 第37-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-43页 |
| 2.1 晋A不育系及其保持系晋B花药发育的显微结构观察 | 第38-40页 |
| 2.2 晋A不育系及其保持系晋B花粉败育的TUNEL细胞凋亡检测 | 第40-41页 |
| 2.3 晋A不育系及其保持系晋B花粉败育过程中过氧化氢的亚细胞定位 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-46页 |
| 3.1 绒毡层细胞与细胞质雄性不育 | 第43-44页 |
| 3.2 细胞凋亡与细胞质雄性不育 | 第44页 |
| 3.3 过氧化氢过度积累与细胞质雄性不育 | 第44-46页 |
| 第四章 交替氧化酶基因及cDNA的克隆及分析 | 第46-66页 |
| 1 材料与方法 | 第46-51页 |
| 1.1 材料 | 第46-47页 |
| 1.1.1 黄化苗的培育 | 第46页 |
| 1.1.2 花蕾的采集 | 第46页 |
| 1.1.3 不同发育时期花蕾的划分 | 第46-47页 |
| 1.2 实验仪器与主要试剂(试剂盒) | 第47页 |
| 1.2.1 主要试剂(试剂盒) | 第47页 |
| 1.2.2 实验仪器 | 第47页 |
| 1.3 试验方法 | 第47-51页 |
| 1.3.1 引物设计 | 第47-48页 |
| 1.3.2 DNA的提取 | 第48-49页 |
| 1.3.3 RNA的提取 | 第49页 |
| 1.3.4 cDNA的合成 | 第49-50页 |
| 1.3.5 PCR反应 | 第50页 |
| 1.3.6 凝胶电泳检测 | 第50-51页 |
| 1.3.7 切胶回收 | 第51页 |
| 1.3.8 载体连接、大肠杆菌转化 | 第51页 |
| 1.3.9 序列生物信息学分析 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-65页 |
| 2.1 提取DNA与RNA质量检测 | 第51-52页 |
| 2.2 晋A、亚棉A不育系及各自对应保持系晋B、亚棉B AOX1基因及cDNA的克隆 | 第52-53页 |
| 2.3 晋A不育系及保持系晋B交替氧化酶AOX1基因及cDNA测序结果及序列分析 | 第53-58页 |
| 2.4 AOX1基因cDNA同源性分析 | 第58-59页 |
| 2.5 AOX1蛋白同源性分析 | 第59页 |
| 2.6 AOX1基因cDNA编码蛋白质结构预测 | 第59-63页 |
| 2.6.1 AOX1基因编码蛋白质一级结构分析 | 第59-62页 |
| 2.6.2 AOX1基因编码蛋白质二级结构分析 | 第62-63页 |
| 2.7 亚棉A及保持系亚棉B交替氧化酶AOX1基因及cDNA测序结果及序列分析 | 第63页 |
| 2.8 亚棉AAOX1基因cDNA编码蛋白质结构分析 | 第63-64页 |
| 2.8.1 亚棉A AOX1基因编码蛋白质一级结构分析 | 第63-64页 |
| 2.8.2 AOX1基因编码蛋白质二级结构分析 | 第64页 |
| 2.9 晋A与亚棉AAOX1基因组DNA、cDNA及蛋白差异比较 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 3.1 AOX基因多样性 | 第65-66页 |
| 第五章 棉花AOX1基因表达分析 | 第66-73页 |
| 1 材料与方法 | 第66-68页 |
| 1.1 材料 | 第66页 |
| 1.1.1 花蕾的采集 | 第66页 |
| 1.1.2 不同发育时期花蕾的划分 | 第66页 |
| 1.2 实验仪器与主要试剂(试剂盒) | 第66-67页 |
| 1.2.1 主要试剂(试剂盒) | 第66-67页 |
| 1.2.2 实验仪器 | 第67页 |
| 1.3 实验方法 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-70页 |
| 2.1 晋A不育系及其保持系晋B小孢子败育过程中AOX1基因表达量的变化 | 第68-69页 |
| 2.2 亚棉A不育系及其保持系亚棉B花药败育过程中AOX1基因表达量的变化 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-73页 |
| 3.1 抗氰呼吸与细胞质雄性不育 | 第70页 |
| 3.2 交替氧化酶与细胞质雄性不育 | 第70-71页 |
| 3.3 反向调节与细胞质雄性不育 | 第71-73页 |
| 第六章 全文讨论 | 第73-75页 |
| 第七章 全文结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| Abstract | 第83-84页 |
| 致谢 | 第85页 |
