摘要 | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-16页 |
1 植物油脂与脂肪酸 | 第8-9页 |
2 棕榈油酸及其合成积累的生物化学过程 | 第9-10页 |
3 酰基-Δ9脱氢酶(acyl-A9 desaturase,A9D)的研究进展 | 第10-13页 |
4 叶绿体转运肽(TP,Transit Peptide)及其作用机制 | 第13-14页 |
5 本论文的研究目的、意义及主要内容 | 第14-15页 |
6 本论文的技术路线 | 第15-16页 |
第二章 质体转运肽分子克隆及生物信息学分析 | 第16-25页 |
1 材料 | 第16页 |
1.1 植物材料 | 第16页 |
1.2 供试菌株和载体 | 第16页 |
1.3 主要试剂 | 第16页 |
1.4 主要仪器设备 | 第16页 |
2 试验方法 | 第16-22页 |
2.1 叶绿体转运肽的生物信息学分析 | 第16-17页 |
2.2 植物叶片总RNA的提取与检测 | 第17-18页 |
2.3 植物质体转运肽的分子克隆 | 第18-22页 |
3 结果与分析 | 第22-24页 |
3.1 拟南芥和猫爪草质体转运肽的生物进化树分析 | 第22页 |
3.2 两种植物RNA提取质量的检测 | 第22-23页 |
3.3 阳性克隆载体的筛选与鉴定 | 第23-24页 |
4 讨论 | 第24页 |
5 小结 | 第24-25页 |
第三章 ScΔ9D质体定位表达载体的构建及烟草的遗传转化 | 第25-38页 |
1 材料 | 第25-26页 |
1.1 供试材料、菌株与载体 | 第25页 |
1.2 主要仪器和试剂 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-30页 |
2.1 植物表达载体的构建 | 第26-27页 |
2.2 选择培养中选择压及抑菌抗生素浓度的确定 | 第27-28页 |
2.3 农杆菌菌液的制备及烟草叶片的侵染 | 第28-29页 |
2.4 转基因植株的鉴定 | 第29-30页 |
3 结果分析 | 第30-37页 |
3.1 质体定位表达载体的构建 | 第30-31页 |
3.2 质体定位表达载体的鉴定 | 第31-32页 |
3.3 抗生素选择培养中选择压确定 | 第32-33页 |
3.4 选择培养中抑菌抗生素浓度的确定 | 第33-35页 |
3.5 烟草的转基因流程示意图 | 第35页 |
3.6 转基因烟草的阳性鉴定 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37页 |
5 小结 | 第37-38页 |
第四章 AtTP和MucTP介导ScΔ9D质体定位及其对烟叶油脂相关表型的影响 | 第38-52页 |
1 材料 | 第38页 |
1.1 实验材料 | 第38页 |
1.2 试剂与药品 | 第38页 |
1.3 实验仪器 | 第38页 |
2 试验方法 | 第38-44页 |
2.1 烟草叶片总脂肪酸含量的测定 | 第38-39页 |
2.2 烟叶中可溶性糖含量的测定 | 第39-40页 |
2.3 烟叶总蛋白含量的分析 | 第40-41页 |
2.4 烟草叶片叶绿体中Δ9-去饱和酶活性的测定 | 第41-43页 |
2.5 气相色谱法(GC)分析烟草叶片组织油脂成分 | 第43-44页 |
3 结果分析 | 第44-50页 |
3.1 烟草叶片总脂肪酸含量的分析 | 第44-45页 |
3.2 烟叶总糖含量与油脂含量的相关性分析 | 第45-47页 |
3.3 烟草叶片总蛋白含量的结果分析 | 第47-49页 |
3.4 烟草叶片叶绿体中Δ9-去饱和酶酶活性分析 | 第49页 |
3.5 烟草叶片脂肪酸GC-MS结果分析 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
Abstract | 第56页 |
附录 | 第58-60页 |
致谢 | 第60页 |