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家蚕T-box基因Bmtbx20与Bmtbx1的功能研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
1 前言第13-24页
   ·转录因子家族的研究现状第13-14页
   ·T-box转录因子家族的研究进展第14-21页
     ·T-box基因第15-16页
     ·T-box结构域第16页
     ·tbx20基因第16-18页
     ·tbx1基因第18-19页
     ·其他亚家族T-box基因第19-21页
       ·T(Brachyury)亚家族成员第19页
       ·Tbx2亚家族成员第19-20页
       ·Tbx6亚家族成员第20页
       ·Tbr亚家族成员第20-21页
   ·家蚕丝腺研究进展第21-22页
   ·家蚕神经研究进展第22-23页
   ·本研究的目的与意义第23-24页
2 材料与方法第24-42页
   ·实验材料第24-29页
     ·实验动物第24页
     ·质粒与菌株第24页
     ·生化试剂第24-27页
       ·试剂与试剂盒第24-25页
       ·主要试剂的配制第25-27页
     ·PCR引物第27页
     ·生物信息学分析所用网站和软件第27-28页
     ·实验所用主要仪器设备第28-29页
   ·实验方法第29-42页
     ·蚁蚕cDNA的合成第29-31页
       ·蚁蚕RNA的提取第29-30页
       ·cDNA的合成第30-31页
     ·家蚕Bmtbx1与家蚕Bmtbx20的克隆第31-32页
       ·目的基因的鉴定第31-32页
       ·PCR扩增目的基因第32页
     ·克隆载体的构建第32-35页
       ·PCR产物的琼脂糖凝胶回收第32-33页
       ·连接反应第33页
       ·连接反应产物的转化第33-34页
       ·菌液PCR鉴定第34页
       ·测序结果比对第34页
       ·质粒DNA的提取第34-35页
     ·原核表达载体的构建第35-37页
       ·质粒与原核表达载体的酶切第35-36页
       ·连接反应第36-37页
     ·重组表达载体的原核表达第37-38页
       ·蛋白表达第37-38页
       ·蛋白纯化第38页
     ·SDS-PAGE电泳检测第38-39页
       ·样品第38页
       ·分离胶的制备第38-39页
       ·浓缩胶的制备第39页
       ·电泳第39页
     ·重组蛋白透析复性第39-40页
     ·抗体制备第40页
     ·ELISA法检测抗体效果第40页
     ·组织抗体染色第40-42页
       ·抗体稀释第40页
       ·实验材料制备第40-41页
       ·蚕卵及各组织抗体染色第41-42页
3 结果与分析第42-58页
   ·Bmtbx20与Bmtbx1基因的克隆第42-47页
     ·Bmtbx20的克隆与序列分析第42-44页
     ·Tbx20的进化树的构建第44-45页
     ·Bmtbx1的克隆与序列分析第45-47页
     ·Tbx1的进化树的构建第47页
   ·BmTbx20与BmTbx1的多克隆抗体的获得第47-51页
     ·表达载体的构建第47-48页
     ·重组蛋白的表达与纯化第48-49页
     ·多克隆抗体效价的检测第49-51页
   ·BmTbx20与BmTbx1的组织定位第51-58页
     ·BmTbx20在家蚕胚胎的组织定位第51-52页
     ·BmTbx20与BmTbx1在家蚕幼虫气管的组织定位第52-53页
     ·BmTbx20与BmTbx1在家蚕幼虫的脂肪体表达第53页
     ·BmTbx20与BmTbx1在家蚕幼虫的丝腺表达第53-58页
4 讨论第58-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-71页
附录第71-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间发表论文情况第73页

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