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拟南芥UF1基因响应非生物胁迫的初步研究

符号说明第1-8页
中文摘要第8-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-24页
   ·ABA的信号转导途径第11-20页
     ·ABA信号转导的核心通路第11-12页
     ·植物PP2C蛋白磷酸酯酶负调控ABA信号通路第12页
     ·植物SnRK2蛋白激酶正调控ABA信号通路第12-14页
       ·SnRK2蛋白激酶家族分类第12页
       ·SnRK2.6 的蛋白结构及功能第12-13页
       ·SnRK2.6 与SnRK2.2、SnRK2.3 在ABA信号途径中的作用第13-14页
     ·ABA信号通路中的转录因子第14-20页
       ·AP2/ERF转录因子家族第14-15页
       ·ABI5调控种子萌发及萌发后植株生长第15-16页
       ·ABI3、ABI4、ABI5共同调控种子萌发第16-20页
   ·植物微丝骨架第20-22页
     ·微丝与非生物胁迫第21-22页
       ·微丝与冷胁迫第21页
       ·微丝与盐胁迫第21-22页
       ·微丝与渗透胁迫第22页
   ·拟南芥UF1研究进展第22-23页
   ·本实验的目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-48页
   ·实验材料第24-26页
     ·植物材料第24页
     ·菌株与载体第24页
     ·酶与各种生化试剂第24-25页
     ·引物第25-26页
   ·实验方法第26-48页
     ·植物基因组DNA的粗提第26-27页
     ·CTAB法精提植物基因组DNA第27-28页
     ·载体构建第28-35页
       ·PCR扩增目的片段第28-30页
       ·目的片段纯化回收第30-31页
       ·平末端DNA加A尾第31页
       ·连接反应第31-32页
       ·重组质粒的筛选与鉴定第32-33页
       ·大肠杆菌质粒提取第33-34页
       ·启动子驱动GUS报告基因表达载体的构建第34页
       ·35S::UF1-GFP表达载体的构建第34-35页
       ·pDEST-GBKT7-UF1表达载体的构建第35页
       ·pDEST-GADT7-UF2表达载体的构建第35页
     ·CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞TOP10第35-36页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第36页
     ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备第36-37页
     ·农杆菌GV3101感受态细胞的转化第37页
     ·野生型拟南芥的转化第37-38页
     ·转基因拟南芥的筛选与鉴定第38-39页
     ·拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定第39页
     ·GUS组织化学染色法步骤第39-40页
     ·拟南芥总RNA提取与反转录第40-42页
       ·试剂盒法提取拟南芥总RNA第40-41页
       ·第一链cDNA的合成第41-42页
     ·实时荧光定量PCR第42-43页
     ·半定量PCR第43-44页
     ·拟南芥UF1对盐胁迫响应的表型分析第44-45页
     ·拟南芥UF1对外源ABA响应的表型分析第45页
     ·拟南芥的杂交第45页
     ·酵母感受态细胞的制备与转化第45-48页
3 结果与分析第48-68页
   ·拟南芥UF1基因的时空表达分析第48-50页
     ·qRT-PCR方法检测拟南芥UF1基因表达模式第48页
     ·拟南芥UF1基因表达模式的GUS组织化学分析第48-50页
   ·拟南芥UF1的亚细胞定位第50-53页
   ·拟南芥UF1参与盐、渗透和氧化胁迫的响应第53-54页
   ·拟南芥UF1响应盐胁迫的研究第54-56页
     ·UF1超表达植株和uf1突变体的UF1基因表达分析第54-55页
     ·拟南芥uf1突变体、超表达植株在盐胁迫下的表型分析第55-56页
   ·拟南芥UF1参与ABA信号通路第56-64页
     ·拟南芥UF1基因受ABA的诱导第56-57页
     ·拟南芥uf1突变体、超表达植株在外源ABA条件下的表型分析第57-62页
       ·拟南芥uf1突变体、超表达植株在外源ABA条件下的萌发率分析第58-59页
       ·拟南芥uf1突变体、超表达植株在外源ABA条件下的子叶转绿率分析第59-61页
       ·拟南芥uf1突变体、超表达植株在外源ABA条件下的根长分析第61-62页
     ·uf1突变体和超表达植株ABA信号途径中几个关键基因的表达第62-64页
   ·拟南芥UF1可能参与微丝骨架的动态调控第64-66页
     ·拟南芥uf1突变体叶片表皮细胞中的微丝结构第65页
     ·拟南芥uf1突变体盐胁迫条件下表皮细胞中的微丝变化第65-66页
   ·拟南芥UF1互作蛋白的筛选和鉴定第66-68页
4 讨论第68-70页
5 结论第70-71页
参考文献第71-83页
致谢第83页

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