符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-23页 |
·MAPK级联信号途径 | 第13-16页 |
·植物中MAPK级联途径的发现 | 第14页 |
·植物MAPK级联途径成员的结构和分类 | 第14-16页 |
·植物中MAPK的结构特点和分类 | 第15页 |
·植物中MAP2K的结构特点和分类 | 第15页 |
·植物中MAP3K的结构特点和分类 | 第15-16页 |
·植物中MAPK级联途径的生物学功能 | 第16-22页 |
·植物MAPK级联途径调节非生物胁迫应答反应 | 第16-17页 |
·植物MAPK级联途径调节生物胁迫应答反应 | 第17-20页 |
·植物MAPK级联途径在生长发育过程中的作用 | 第20-22页 |
·本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-40页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌株与质粒 | 第23页 |
·酶与各种生化试剂 | 第23页 |
·引物 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-40页 |
·植物材料的培养与处理 | 第24-25页 |
·植物总RNA的提取 | 第25-26页 |
·Trizol法提取RNA | 第25-26页 |
·CTAB法提取总RNA | 第26页 |
·RNA的纯化 | 第26-28页 |
·RNA中基因组DNA的去除 | 第26-27页 |
·琼脂糖变性凝胶电泳检测RNA质量 | 第27-28页 |
·cDNA第一链的合成 | 第28页 |
·cDNA的末端加尾反应(用于 5'RACE) | 第28-29页 |
·PCR扩增片段的回收 | 第29页 |
·目的片段与克隆载体的连接 | 第29-30页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第30页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第30页 |
·大肠杆菌微量质粒DNA提取和质粒酶切鉴定 | 第30-31页 |
·试剂盒微量提取大肠杆菌质粒DNA | 第30-31页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第31页 |
·DNA序列测定 | 第31页 |
·GhMAP3K40全长cDNA序列的获得 | 第31-34页 |
·PCR扩增获得中间片段 | 第31-32页 |
·5'RACE获得 5'端序列 | 第32-33页 |
·3'RACE获得 3'端序列 | 第33-34页 |
·cDNA全长序列的获得 | 第34页 |
·农杆菌介导的瞬时转化 | 第34-36页 |
·目的基因融合GFP表达载体制备 | 第34-35页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
·冻融法转化农杆菌感受态细胞 | 第35页 |
·农杆菌介导的瞬时侵染 | 第35-36页 |
·植物表达载体的构建与转化 | 第36-37页 |
·植物表达载体的构建及农杆菌感受态细胞的转化 | 第36页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第36-37页 |
·小量法提取基因组DNA | 第37页 |
·转基因烟草鉴定 | 第37页 |
·烟草的抗病分析 | 第37-38页 |
·病原菌培养基的配制 | 第37页 |
·病原菌的活化 | 第37-38页 |
·病原真菌接种 | 第38页 |
·病原细菌接种 | 第38页 |
·转基因植株抗病性数据统计 | 第38页 |
·组织化学染色分析 | 第38页 |
·荧光实时定量RT-PCR分析 | 第38-39页 |
·网络资源及数据库 | 第39页 |
·生物学软件 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-66页 |
·棉花GhMAP3K40基因全长的获得及序列分析 | 第40-44页 |
·GhMAP3K40基因全长的获得 | 第40-41页 |
·GhMAP3K40编码的蛋白质序列分析 | 第41-44页 |
·GhMAP3K40的表达模式分析 | 第44-48页 |
·GhMAP3K40超表达转基因本生烟的获取 | 第48-49页 |
·GhMAP3K40正义表达载体的构建 | 第48页 |
·转基因本生烟的获得 | 第48-49页 |
·GhMAP3K40超表达植株对不良环境的抗性分析 | 第49-58页 |
·GhMAP3K40超表达植株在萌发期对非生物胁迫的抗性 | 第49-51页 |
·GhMAP3K40超表达植株在成苗期对不良环境的抗性分析 | 第51-54页 |
·GhMAP3K40超表达植株在成苗期对病原菌的抗性 | 第51页 |
·GhMAP3K40超表达植株在成苗期对干旱的抗性 | 第51-52页 |
·GhMAP3K40超表达植株在成苗期对氧化胁迫的抗性 | 第52-54页 |
·GhMAP3K40的超表达激活了抗性相关基因的表达 | 第54-55页 |
·GhMAP3K40的超表达激活了转基因植株的抗氧化系统 | 第55-58页 |
·GhMAP3K40影响转基因烟草的生长发育 | 第58-61页 |
·GhMAP3K40的表达部位具有特异性 | 第58-59页 |
·GhMAP3K40的超表达抑制了转基因植株根系的生长 | 第59-60页 |
·GhMAP3K40的超表达影响了转基因植株叶片的结构 | 第60-61页 |
·GhMAP3K40的互作蛋白 | 第61-66页 |
·GhMAP3K40互作蛋白的获得 | 第61-62页 |
·GhMAP3K40互作蛋白的表达模式 | 第62-66页 |
4 讨论 | 第66-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第83页 |