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棉花GhMAP3K40参与调控植物的防御反应和生长发育

符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-23页
   ·MAPK级联信号途径第13-16页
     ·植物中MAPK级联途径的发现第14页
     ·植物MAPK级联途径成员的结构和分类第14-16页
       ·植物中MAPK的结构特点和分类第15页
       ·植物中MAP2K的结构特点和分类第15页
       ·植物中MAP3K的结构特点和分类第15-16页
   ·植物中MAPK级联途径的生物学功能第16-22页
     ·植物MAPK级联途径调节非生物胁迫应答反应第16-17页
     ·植物MAPK级联途径调节生物胁迫应答反应第17-20页
     ·植物MAPK级联途径在生长发育过程中的作用第20-22页
   ·本研究的目的及意义第22-23页
2 材料与方法第23-40页
   ·实验材料第23-24页
     ·植物材料第23页
     ·菌株与质粒第23页
     ·酶与各种生化试剂第23页
     ·引物第23-24页
   ·实验方法第24-40页
     ·植物材料的培养与处理第24-25页
     ·植物总RNA的提取第25-26页
       ·Trizol法提取RNA第25-26页
       ·CTAB法提取总RNA第26页
     ·RNA的纯化第26-28页
       ·RNA中基因组DNA的去除第26-27页
       ·琼脂糖变性凝胶电泳检测RNA质量第27-28页
     ·cDNA第一链的合成第28页
     ·cDNA的末端加尾反应(用于 5'RACE)第28-29页
     ·PCR扩增片段的回收第29页
     ·目的片段与克隆载体的连接第29-30页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第30页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第30页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化第30页
     ·大肠杆菌微量质粒DNA提取和质粒酶切鉴定第30-31页
       ·试剂盒微量提取大肠杆菌质粒DNA第30-31页
       ·重组质粒的酶切鉴定第31页
     ·DNA序列测定第31页
     ·GhMAP3K40全长cDNA序列的获得第31-34页
       ·PCR扩增获得中间片段第31-32页
       ·5'RACE获得 5'端序列第32-33页
       ·3'RACE获得 3'端序列第33-34页
       ·cDNA全长序列的获得第34页
     ·农杆菌介导的瞬时转化第34-36页
       ·目的基因融合GFP表达载体制备第34-35页
       ·农杆菌感受态细胞的制备第35页
       ·冻融法转化农杆菌感受态细胞第35页
       ·农杆菌介导的瞬时侵染第35-36页
     ·植物表达载体的构建与转化第36-37页
       ·植物表达载体的构建及农杆菌感受态细胞的转化第36页
       ·农杆菌介导转化烟草第36-37页
     ·小量法提取基因组DNA第37页
     ·转基因烟草鉴定第37页
     ·烟草的抗病分析第37-38页
       ·病原菌培养基的配制第37页
       ·病原菌的活化第37-38页
       ·病原真菌接种第38页
       ·病原细菌接种第38页
       ·转基因植株抗病性数据统计第38页
     ·组织化学染色分析第38页
     ·荧光实时定量RT-PCR分析第38-39页
     ·网络资源及数据库第39页
     ·生物学软件第39-40页
3 结果与分析第40-66页
   ·棉花GhMAP3K40基因全长的获得及序列分析第40-44页
     ·GhMAP3K40基因全长的获得第40-41页
     ·GhMAP3K40编码的蛋白质序列分析第41-44页
   ·GhMAP3K40的表达模式分析第44-48页
   ·GhMAP3K40超表达转基因本生烟的获取第48-49页
     ·GhMAP3K40正义表达载体的构建第48页
     ·转基因本生烟的获得第48-49页
   ·GhMAP3K40超表达植株对不良环境的抗性分析第49-58页
     ·GhMAP3K40超表达植株在萌发期对非生物胁迫的抗性第49-51页
     ·GhMAP3K40超表达植株在成苗期对不良环境的抗性分析第51-54页
       ·GhMAP3K40超表达植株在成苗期对病原菌的抗性第51页
       ·GhMAP3K40超表达植株在成苗期对干旱的抗性第51-52页
       ·GhMAP3K40超表达植株在成苗期对氧化胁迫的抗性第52-54页
     ·GhMAP3K40的超表达激活了抗性相关基因的表达第54-55页
     ·GhMAP3K40的超表达激活了转基因植株的抗氧化系统第55-58页
   ·GhMAP3K40影响转基因烟草的生长发育第58-61页
     ·GhMAP3K40的表达部位具有特异性第58-59页
     ·GhMAP3K40的超表达抑制了转基因植株根系的生长第59-60页
     ·GhMAP3K40的超表达影响了转基因植株叶片的结构第60-61页
   ·GhMAP3K40的互作蛋白第61-66页
     ·GhMAP3K40互作蛋白的获得第61-62页
     ·GhMAP3K40互作蛋白的表达模式第62-66页
4 讨论第66-71页
5 结论第71-72页
参考文献第72-82页
致谢第82-83页
攻读学位期间发表论文情况第83页

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