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乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一部分 文献综述第12-24页
 第一章 乙型脑炎的研究进展第12-24页
  1 乙型脑炎病毒的病原特征第12-13页
   ·乙型脑炎病毒的分类及形态第12页
   ·乙型脑炎病毒的生物学特征第12页
   ·乙型脑炎病毒的培养特性第12-13页
   ·乙型脑炎病毒对外界的抵抗力第13页
   ·乙型脑炎病毒的致病性第13页
  2 乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白研究进展第13-14页
   ·乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白的重要性第13页
   ·乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白的研究进展第13-14页
  3 乙型脑炎的流行情况第14-15页
   ·乙型脑炎的流行特点第14页
   ·乙型脑炎的分布区域第14页
   ·乙型脑炎的发病规律第14-15页
  4 乙型脑炎的诊断、预防和治疗第15-17页
   ·乙型脑炎的诊断第15-16页
     ·乙型脑炎的临诊症状第15页
     ·乙型脑炎的病理变化第15页
     ·乙型脑炎的临床诊断第15-16页
   ·乙型脑炎的预防第16页
     ·免疫接种第16页
     ·杜绝传播媒介第16页
   ·乙型脑炎的治疗第16-17页
     ·乙型脑炎的一般性治疗第16-17页
     ·乙型脑炎的对症治疗第17页
     ·乙型脑炎的抗病毒治疗第17页
  5 单克隆抗体技术和应用第17-21页
   ·单克隆抗体的研究进展第17页
   ·单克隆抗体技术第17-18页
     ·嵌合单克隆抗体技术第17-18页
     ·噬菌体抗体库技术第18页
     ·核糖体展示技术第18页
     ·RNA-多肽融合技术第18页
     ·转基因小鼠制备全人类抗体第18页
   ·单克隆抗体的应用第18-19页
     ·单克隆抗体在免疫组织化学中的应用第18-19页
     ·单克隆抗体在病毒学中的应用第19页
     ·单克隆抗体在细菌学中的应用第19页
     ·单克隆抗体在寄生虫中的应用第19页
   ·乙型脑炎病毒单克隆抗体研究进展第19-21页
  参考文献第21-24页
第二部分 实验研究第24-54页
 第二章 乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白单克隆抗体的制备及鉴定第24-40页
  1 材料第25页
   ·实验动物、细胞系、菌种第25页
   ·主要试剂第25页
   ·仪器和设备第25页
  2 方法第25-32页
   ·EDⅢ蛋白的诱导表达及纯化第25-27页
     ·EDⅢ蛋白的诱导表达第25-26页
     ·EDⅢ蛋白的亲和层析纯化第26页
     ·纯化的EDⅢ蛋白的SDS-PAGE凝胶电泳分析第26-27页
     ·EDⅢ蛋白Western-blot分析第27页
   ·小鼠的免疫第27页
   ·间接ELISA方法测血清效价第27-28页
   ·SP2/0骨髓瘤细胞的准备第28-29页
     ·SP2/0骨髓瘤细胞的复苏第28页
     ·SP2/0骨髓瘤细胞的筛选及扩大培养第28-29页
   ·饲养细胞的准备第29页
   ·脾细胞的准备第29页
   ·细胞融合第29-30页
   ·EDⅢ杂交瘤细胞株的建立第30-31页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选第30页
     ·亚克隆第30-31页
     ·杂交瘤细胞的冻存第31页
   ·腹水的制备第31页
   ·单克隆抗体的鉴定第31-32页
     ·单克隆抗体效价的测定第31页
     ·单克隆抗体Ig亚类的鉴定第31页
     ·单克隆抗体的特异性鉴定第31-32页
     ·杂交瘤细胞分泌抗体稳定性的鉴定第32页
     ·间接免疫荧光试验(IFA)第32页
  3 结果第32-36页
   ·EDⅢ蛋白的诱导表达、纯化及Western-blot鉴定第32-34页
     ·EDⅢ蛋白的诱导表达及纯化第32-33页
     ·EDⅢ蛋白的Western-blot鉴定第33-34页
   ·EDⅢ蛋白单克隆抗体的鉴定第34-36页
     ·EDⅢ蛋白单抗效价的测定第34页
     ·EDⅢ蛋白单抗亚型的测定第34页
     ·EDⅢ蛋白单抗特异性鉴定第34-35页
     ·EDⅢ蛋白单抗分泌稳定性的鉴定第35-36页
     ·间接免疫荧光试验(IFA)第36页
  4 讨论第36-38页
  参考文献第38-40页
 第三章 EDⅢ蛋白单克隆抗体对病毒中和作用的研究第40-54页
  1 材料第40-41页
   ·细胞和病毒第40页
   ·试剂第40-41页
   ·仪器和设备第41页
  2 方法第41-43页
   ·乙型脑炎病毒NJ2008株的扩增第41页
     ·鼠脑扩增乙型脑炎病毒NJ2008株第41页
     ·乙型脑炎病毒NJ2008株的鉴定第41页
   ·空斑形成试验检测乙脑病毒NJ2008株的毒价第41-42页
   ·空斑减少试验检测1C3单抗的中和活性第42页
   ·结果判定第42-43页
   ·乳鼠脑内接种单抗和病毒第43页
  3 结果第43-50页
   ·乙型脑炎病毒NJ2008株的Western-blot鉴定第43-44页
   ·空斑形成试验测乙脑病毒NJ2008株的毒价第44-45页
   ·空斑减少试验测1C3单抗中和活性第45-46页
   ·乳鼠发病情况统计第46-47页
   ·乳鼠鼠脑组织解剖观察第47-48页
   ·乳鼠鼠脑组织和脾脏的HE染色第48-50页
  4 讨论第50-52页
  参考文献第52-54页
全文总结第54-56页
附录第56-60页
致谢第60页

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