| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-24页 |
| 1 PLD基因家族及其结构特征 | 第16页 |
| 2 PLD的调控因子 | 第16-17页 |
| ·Ca~(2+)和pH | 第16-17页 |
| ·磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP2) | 第17页 |
| ·G蛋白 | 第17页 |
| 3 PLD的亚细胞分布及组织表达 | 第17-18页 |
| 4 PLD底物选择性 | 第18页 |
| 5 PLD及其水解产物PA在植物生长发育中的作用 | 第18-19页 |
| 6 PLD参与植物激素信号途径 | 第19-21页 |
| ·ABA | 第19-20页 |
| ·其他植物激素 | 第20-21页 |
| 7 PLD在非生物胁迫中的作用 | 第21-23页 |
| ·PLD在低温胁迫中的作用 | 第21页 |
| ·PLD在高温胁迫中的作用 | 第21页 |
| ·PLD在渗透胁迫中的作用 | 第21-22页 |
| ·PLD在氧化胁迫中的作用 | 第22页 |
| ·PLD在机械损伤中的作用 | 第22页 |
| ·PLD对缺素的响应 | 第22-23页 |
| 8 PLD在生物胁迫中的作用 | 第23页 |
| ·PLD响应病害的作用机制 | 第23页 |
| ·PLD响应虫害的作用机制 | 第23页 |
| 9 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 菊花CmPLDa基因的克隆与序列分析 | 第24-38页 |
| 1 材料与方法 | 第24-33页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·试剂与仪器 | 第24-25页 |
| ·试剂及菌株 | 第24-25页 |
| ·仪器设备 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·简并引物及特异性引物的设计 | 第25-26页 |
| ·RNA提取 | 第26页 |
| ·1 st-Strand cDNA合成及检测 | 第26-28页 |
| ·中间片段扩增 | 第28页 |
| ·目的片段纯化、连接转化 | 第28-29页 |
| ·重组子筛选与测序 | 第29页 |
| ·3’RACE | 第29-30页 |
| ·5’RACE | 第30-32页 |
| ·cDNA全长扩增 | 第32页 |
| ·序列比对与进化树构建 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-36页 |
| ·RNA提取、反转录质量检测 | 第33页 |
| ·CmPLDa基因的克隆 | 第33-35页 |
| ·CmPLDa中间保守片段的获得 | 第33页 |
| ·CmPLDa TRACE的结果 | 第33-34页 |
| ·CmPLDa 5'RACE的结果 | 第34页 |
| ·CmPLDa全长序列的获得及分析 | 第34-35页 |
| ·CmPLDa氨基酸序列同源性比对 | 第35-36页 |
| ·CmPLDa系统进化树的构建 | 第36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 菊花CmPLDa基因的表达特性分析 | 第38-48页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·试剂与仪器 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·仪器设备 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·组织表达特性分析 | 第39页 |
| ·非生物胁迫处理 | 第39-40页 |
| ·ABA处理 | 第40页 |
| ·生物胁迫处理 | 第40页 |
| ·RNA提取、纯化、反转录 | 第40-41页 |
| ·CmPLDa的实时定量(Real time-PCR)分析 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-45页 |
| ·CmPLDa在不同组织中的表达特性 | 第41-42页 |
| ·非生物胁迫处理下CmPLDa的表达分析 | 第42-43页 |
| ·生物胁迫处理下CmPLDa的表达分析 | 第43-44页 |
| ·ABA处理后CmPLDa的表达分析 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-48页 |
| 第四章 菊花CmPLDa基因的遗传转化研究 | 第48-64页 |
| 1 材料与方法 | 第48-55页 |
| ·植物材料 | 第48页 |
| ·试剂与仪器 | 第48-49页 |
| ·试剂及菌株 | 第48-49页 |
| ·仪器设备 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-55页 |
| ·CmPLDα正义及反义表达载体的构建 | 第49-52页 |
| ·转化农杆菌感受态 | 第52-53页 |
| ·农杆菌叶盘法转化‘神马’ | 第53页 |
| ·转基因抗性植株的分子检测 | 第53-54页 |
| ·转基因植株后代的抗旱性鉴定 | 第54-55页 |
| 2 结果及分析 | 第55-62页 |
| ·菊花表达载体pBIG-(+/-)-CmPLDa的获得 | 第55页 |
| ·CmPLDa转基因菊花的获得与检测 | 第55-57页 |
| ·CmPLDa转基因菊花的获得 | 第55-56页 |
| ·CmPLDa转基因菊花的检测 | 第56-57页 |
| ·抗旱性分析结果 | 第57-62页 |
| ·形态指标分析 | 第57-58页 |
| ·生理指标分析 | 第58-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 全文结论 | 第64-66页 |
| 创新点 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-84页 |
| 发表论文及所获奖励 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86页 |