摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-20页 |
·昆虫免疫系统 | 第11-14页 |
·细胞免疫 | 第11-12页 |
·体液免疫 | 第12-14页 |
·绿脓杆菌 (P. aeruginosa, PAO1) 及其分泌的蛋白酶 | 第14-16页 |
·细菌分泌蛋白酶调控昆虫免疫系统 | 第16-18页 |
·粘质沙雷氏菌 (S. marcescens) 分泌蛋白酶Serralysin调控家蚕 (B. mori) 细胞免疫 | 第16-17页 |
·嗜热菌蛋白酶Thermolysin调控家蚕 (B. mori)免疫系统 | 第17-18页 |
·绿脓杆菌 (P. aeruginosa) 分泌蛋白酶Protease IV调控黄粉虫 (T. molitor)免疫系统 | 第18页 |
·选题目的和意义 | 第18-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-26页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·供试昆虫 | 第20页 |
·细菌菌株 | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-26页 |
·家蚕的饲养及细菌的培养 | 第21页 |
·Elastase B的纯化 | 第21页 |
·突变体菌株P.a-ΔLasB的制备 | 第21-22页 |
·三氯乙酸沉淀P.a-WT和P.a-ΔLasB分泌蛋白 | 第22-23页 |
·细菌和Elastase B的注射 | 第23页 |
·注射PAO1后家蚕体内Elastase B活性检测 | 第23页 |
·酚氧化酶 (PO) 活力测定 | 第23-24页 |
·Western blot检测PPO的剪切 | 第24页 |
·抗菌肽样品制备、抑菌圈检测和质谱鉴定 | 第24-25页 |
·脂肪体总 RNA 提取、纯化和 c DNA 的合成及定量检测抗菌肽基因表达 | 第25页 |
·作图和数据分析方法 | 第25-26页 |
第三章 结果与分析 | 第26-39页 |
·PAO1分泌的主要胞外蛋白鉴定分析 | 第26-27页 |
·Elastase B的纯化和活性检测 | 第27页 |
·Elastase B对家蚕PO活力和PPO剪切及黄粉虫PO活力的影响 | 第27-29页 |
·Elastase B对家蚕抗菌肽的影响 | 第29-30页 |
·Elastase B降解家蚕血淋巴中蛋白组分 | 第30-32页 |
·较高剂量的Elastase B抑制家蚕伤口凝结并破坏家蚕组织 | 第32页 |
·PAO1侵染家蚕后LasB转录及Elastase B活性检测 | 第32-33页 |
·P.a-ΔLasB突变体的制备 | 第33-35页 |
·P.a-WT和P.a-ΔLasB对家蚕对PO活力及黑化反应的影响 | 第35-36页 |
·P.a-WT和P.a-ΔLasB侵染家蚕后诱导家蚕产生抗菌肽的分析 | 第36-38页 |
·P.a-WT和P.a-ΔLas B侵染家蚕后对家蚕死亡率和家蚕体内细菌CFU的分析 | 第38-39页 |
第四章 结论与讨论 | 第39-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
附录 | 第47-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |