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绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa,PAO1)分泌的金属蛋白酶Elastase B对家蚕免疫系统的调控

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 文献综述第11-20页
   ·昆虫免疫系统第11-14页
     ·细胞免疫第11-12页
     ·体液免疫第12-14页
   ·绿脓杆菌 (P. aeruginosa, PAO1) 及其分泌的蛋白酶第14-16页
   ·细菌分泌蛋白酶调控昆虫免疫系统第16-18页
     ·粘质沙雷氏菌 (S. marcescens) 分泌蛋白酶Serralysin调控家蚕 (B. mori) 细胞免疫第16-17页
     ·嗜热菌蛋白酶Thermolysin调控家蚕 (B. mori)免疫系统第17-18页
     ·绿脓杆菌 (P. aeruginosa) 分泌蛋白酶Protease IV调控黄粉虫 (T. molitor)免疫系统第18页
   ·选题目的和意义第18-20页
第二章 材料与方法第20-26页
   ·实验材料第20-21页
     ·供试昆虫第20页
     ·细菌菌株第20页
     ·主要仪器设备第20页
     ·主要试剂第20-21页
   ·实验方法第21-26页
     ·家蚕的饲养及细菌的培养第21页
     ·Elastase B的纯化第21页
     ·突变体菌株P.a-ΔLasB的制备第21-22页
     ·三氯乙酸沉淀P.a-WT和P.a-ΔLasB分泌蛋白第22-23页
     ·细菌和Elastase B的注射第23页
     ·注射PAO1后家蚕体内Elastase B活性检测第23页
     ·酚氧化酶 (PO) 活力测定第23-24页
     ·Western blot检测PPO的剪切第24页
     ·抗菌肽样品制备、抑菌圈检测和质谱鉴定第24-25页
     ·脂肪体总 RNA 提取、纯化和 c DNA 的合成及定量检测抗菌肽基因表达第25页
     ·作图和数据分析方法第25-26页
第三章 结果与分析第26-39页
   ·PAO1分泌的主要胞外蛋白鉴定分析第26-27页
   ·Elastase B的纯化和活性检测第27页
   ·Elastase B对家蚕PO活力和PPO剪切及黄粉虫PO活力的影响第27-29页
   ·Elastase B对家蚕抗菌肽的影响第29-30页
   ·Elastase B降解家蚕血淋巴中蛋白组分第30-32页
   ·较高剂量的Elastase B抑制家蚕伤口凝结并破坏家蚕组织第32页
   ·PAO1侵染家蚕后LasB转录及Elastase B活性检测第32-33页
   ·P.a-ΔLasB突变体的制备第33-35页
   ·P.a-WT和P.a-ΔLasB对家蚕对PO活力及黑化反应的影响第35-36页
   ·P.a-WT和P.a-ΔLasB侵染家蚕后诱导家蚕产生抗菌肽的分析第36-38页
   ·P.a-WT和P.a-ΔLas B侵染家蚕后对家蚕死亡率和家蚕体内细菌CFU的分析第38-39页
第四章 结论与讨论第39-42页
参考文献第42-47页
附录第47-50页
致谢第50-51页
作者简介第51页

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