丙酮丁醇梭菌磷酸化蛋白质组学研究
| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 专业词汇中英文对照表 | 第11-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-35页 |
| ·丙酮丁醇梭菌的特点及研究意义 | 第15-20页 |
| ·生物学分类与基本特点 | 第15-16页 |
| ·生物发酵产有机溶剂的研究价值 | 第16-17页 |
| ·丙酮丁醇梭菌的研究现状 | 第17-20页 |
| ·细菌中的蛋白质磷酸化修饰 | 第20-24页 |
| ·原核生物蛋白磷酸化修饰的特点 | 第20页 |
| ·原核蛋白磷酸化修饰的研究现状 | 第20-22页 |
| ·磷酸化修饰与代谢调节的关系 | 第22-23页 |
| ·细菌中的磷酸化蛋白质组研究 | 第23-24页 |
| ·磷酸化蛋白质组的研究策略 | 第24-31页 |
| ·蛋白质的分离 | 第25页 |
| ·磷酸化肽段的富集 | 第25-27页 |
| ·磷酸化修饰的质谱鉴定 | 第27-31页 |
| ·丙酮丁醇梭菌产酸/溶剂相关酶的研究 | 第31-33页 |
| ·乙酸激酶的生理作用 | 第31-32页 |
| ·丙酮丁醇梭菌中的乙酸激酶及其活性测定 | 第32页 |
| ·其它产酸/溶剂相关酶的研究 | 第32-33页 |
| ·本课题的研究目标与策略 | 第33-35页 |
| ·丙酮丁醇梭菌与磷酸化蛋白质组 | 第33页 |
| ·基本假设 | 第33-34页 |
| ·研究目标 | 第34页 |
| ·研究策略 | 第34-35页 |
| 第二章 丙酮丁醇梭菌的培养和全蛋白样品的提取 | 第35-51页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·实验材料和方法 | 第35-41页 |
| ·实验材料 | 第35-37页 |
| ·实验方法 | 第37-41页 |
| ·实验结果 | 第41-49页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第41-43页 |
| ·pH变化曲线的绘制 | 第43-44页 |
| ·主要产物浓度的测定 | 第44-49页 |
| ·蛋白质样品的提取 | 第49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第三章 磷酸化蛋白质组的鉴定 | 第51-81页 |
| ·引言 | 第51-52页 |
| ·实验材料和方法 | 第52-58页 |
| ·主要实验试剂和耗材 | 第52-53页 |
| ·主要实验仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-58页 |
| ·实验结果 | 第58-79页 |
| ·磷酸化修饰存在性的初步验证 | 第58-61页 |
| ·液体消化 | 第61-62页 |
| ·TiO2富集磷酸化修饰肽段 | 第62-67页 |
| ·LC-MS/MS鉴定磷酸化蛋白质组 | 第67-75页 |
| ·生物信息学分析 | 第75-79页 |
| ·本章小结 | 第79-81页 |
| 第四章 磷酸化修饰对蛋白功能影响的初步分析 | 第81-99页 |
| ·引言 | 第81-82页 |
| ·实验材料与方法 | 第82-88页 |
| ·实验材料 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83-88页 |
| ·实验结果 | 第88-97页 |
| ·抗原肽段的筛选和单克隆抗体的评价 | 第88-89页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第89-92页 |
| ·体内实验检测乙酸激酶的修饰水平与活性 | 第92-94页 |
| ·体外实验检测乙酸激酶的修饰水平与活性 | 第94-97页 |
| ·本章小结 | 第97-99页 |
| 第五章 讨论 | 第99-105页 |
| ·本研究鉴定的磷酸化肽段的偏好性和准确性 | 第99-100页 |
| ·蛋白磷酸化修饰位点的分布 | 第100页 |
| ·不同物种间磷酸化蛋白质组学比较 | 第100-102页 |
| ·真核生物与原核生物的磷酸化蛋白质组学比较 | 第100-101页 |
| ·原核生物间磷酸化蛋白质组学比较 | 第101-102页 |
| ·磷酸化蛋白在代谢中的作用 | 第102-103页 |
| ·乙酸激酶在代谢通路中的作用 | 第103-105页 |
| ·乙酸激酶活性调控对有机溶剂产生的作用 | 第103页 |
| ·氨基酸酸碱性对乙酸激酶活性的影响 | 第103-105页 |
| 结论 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-117页 |
| 附录 | 第117-121页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第121页 |
