致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-20页 |
·干旱胁迫信号的传导及基因表达调控网络 | 第10-11页 |
·干旱胁迫信号的传导途径 | 第10-11页 |
·干旱胁迫诱导的基因表达调控网络 | 第11页 |
·干旱胁迫诱导的功能基因及其在作物抗旱分子育种方面的应用 | 第11-13页 |
·参与渗透调节的基因 | 第12页 |
·提高植物抗氧化能力的相关基因 | 第12-13页 |
·与抗旱相关的膜蛋白基因 | 第13页 |
·植物胚胎后期丰富蛋白(LEA)及其功能 | 第13-15页 |
·LEA 蛋白的性质 | 第13页 |
·LEA 基因的表达与调控 | 第13-14页 |
·LEA 蛋白的分类与功能 | 第14-15页 |
·植物脱水素及其功能 | 第15-20页 |
·脱水素的结构及分类 | 第15-16页 |
·脱水素基因的表达与调控 | 第16-17页 |
·脱水素的亚细胞定位 | 第17页 |
·脱水素的功能与作用机理 | 第17-20页 |
·稳定细胞膜 | 第17-18页 |
·清除自由基 | 第18页 |
·结合金属离子 | 第18页 |
·分子伴侣作用 | 第18-19页 |
·脱水素与植物抗逆性 | 第19-20页 |
2 引言 | 第20页 |
3 材料与方法 | 第20-32页 |
·实验材料 | 第20-22页 |
·植物材料和菌株 | 第20-21页 |
·质粒载体 | 第21页 |
·工具酶及试剂盒 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·PCR 引物 | 第21-22页 |
·LB 培养基 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-25页 |
·总 RNA 提取、质量鉴定及纯化 | 第22-24页 |
·试验前的准备 | 第22页 |
·总 RNA 提取操作步骤(Trizol 法) | 第22-23页 |
·总 RNA 质量及浓度测定 | 第23页 |
·总 RNA 的纯化 | 第23-24页 |
·目的基因的克隆 | 第24-25页 |
·反转录:cDNA 第一链的合成 | 第24页 |
·克隆基因表达特性分析 | 第24-25页 |
·原核表达 | 第25-28页 |
·原核表达载体的构建 | 第25-26页 |
·目的蛋自完整 ORF 引物设计 | 第25页 |
·带酶切位点的 PCR 回收产物和原核表达载体 pET-28a 质粒的双酶切 | 第25页 |
·基因片段与原核表达载体 pET-28a 连接反应 | 第25-26页 |
·重组子的鉴定和转化 | 第26页 |
·目的蛋白的诱导表达 | 第26页 |
·SDS 一 PAGE 检测表达产物 | 第26-28页 |
·考马斯亮蓝 G-250 法进行蛋白浓度的测定 | 第28页 |
·Western blot 鉴定目的蛋白的免疫原性 | 第28-31页 |
·α-淀粉酶活性测定 | 第31-32页 |
4 结果与分析 | 第32-57页 |
·小麦脱水素基因的克隆及其特征分析 | 第32-44页 |
·总 RNA 的提取及 cDNA 的获得 | 第32页 |
·小麦脱水素基因的克隆及序列分析 | 第32-44页 |
·小麦脱水素基因 TaDHN-1 的克隆和序列分析 | 第33-34页 |
·小麦脱水素基因 TaDHN-2 的克隆及序列分析 | 第34-36页 |
·小麦脱水素基因 TaDHN-3 的克隆和序列分析 | 第36-39页 |
·小麦脱水素基因 TaDHN-1 编码蛋白的结构特性分析 | 第39-41页 |
·小麦脱水素基因 TaDHN-2 编码蛋白的结构特性分析 | 第41-43页 |
·小麦脱水素基因 TaDHN-3 编码蛋白的结构特性分析 | 第43-44页 |
·小麦脱水素基因对非生物胁迫的响应 | 第44-55页 |
·在植物激素 ABA 处理过程中脱水素基因的表达模式 | 第44-46页 |
·渗透胁迫过程中脱水素基因的表达模式 | 第46-50页 |
·温度胁迫对脱水素基因的表达的影响 | 第50-54页 |
·种子成熟过程中脱水素基因的表达模式 | 第54-55页 |
·小麦脱水素对酶活性的保护功能分析 | 第55-57页 |
·融合蛋白 HIS-TaDHN-2 的表达和纯化 | 第55-56页 |
·融合蛋白 HIS-TaDHN-2 对 a-淀粉酶酶活性的影响 | 第56-57页 |
5 讨论 | 第57-60页 |
·小麦脱水素基因的结构特性及其脱水保护功能 | 第57-58页 |
·小麦脱水素基因对非生物胁迫的响应及其功能探讨 | 第58-59页 |
·小麦种子发育过程中脱水素基因的表达模式及其脱水保护功能分析 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
Abstract | 第67-69页 |