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SCFFBXL19调节Rac3蛋白泛素化和降解的研究

前言第1-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-12页
英文缩写词表第12-13页
第1章 绪论第13-27页
   ·Rho GTP 酶家族与肿瘤第13-17页
     ·Rho GTP 酶家族的结构与功能第13-15页
     ·Rho GTP 酶家族与肿瘤第15-17页
     ·Rac3 的结构与功能第17页
   ·SCF~(FBX)蛋白第17-21页
     ·泛素蛋白酶水解系统(Ubiquitin-Proteasome System,UPS)第17-18页
     ·F-box 蛋白第18-21页
   ·E-cadherin 蛋白与肿瘤转移第21-23页
     ·E-cadherin 蛋白(钙粘附蛋白 E)第21-22页
     ·E-cadherin 蛋白与肿瘤转移第22-23页
   ·TGFβ1第23-27页
     ·TGFβ1 结构与功能第23页
     ·TGFβ通过 Smad 信号转导通路激活 EMT第23-27页
第2章 实验材料与方法第27-41页
   ·实验材料第27-31页
     ·细胞系及培养条件第27页
     ·主要试剂及来源第27-29页
     ·质粒第29页
     ·主要仪器第29-30页
     ·常用试剂的配制第30-31页
   ·实验方法第31-40页
     ·细胞培养和冻存第31页
     ·FBXL19 和 Rac3 质粒构建第31-35页
     ·质粒转染细胞第35-36页
     ·免疫印迹检测第36-37页
     ·免疫共沉淀反应第37页
     ·细胞免疫荧光染色第37-38页
     ·蛋白质活性分析第38页
     ·转化生长因子β1(TGFβ1)刺激细胞第38页
     ·总 RNA 提取第38-39页
     ·逆转录合成 cDNA第39页
     ·半定量 RT-PCR 检测 Rac3 mRNA 水平第39-40页
   ·数据的获取及分析第40-41页
     ·数据的获取第40页
     ·细胞形态分析第40页
     ·荧光信号强度分析第40页
     ·统计分析第40-41页
第3章 实验结果第41-55页
   ·FBXL19 降低 Rac3 蛋白的表达量第41-43页
     ·FBXL19 介导 Rac3 蛋白降解第41页
     ·FBXL19 降解 Rac3 蛋白的特异性第41-42页
     ·不同细胞系中的 Rac1 蛋白与 Rac3 蛋白的表达第42页
     ·FBXL19 介导 Rac3 蛋白降解呈剂量依赖性第42页
     ·FBXL19 调节 Rac3 蛋白稳定性第42-43页
   ·FBXL19 介导 Rac3 蛋白降解位于蛋白酶体系统第43-45页
     ·饥饿状态诱发 Rac3 蛋白降解第43页
     ·Rac3 蛋白降解位于蛋白酶体系统第43-44页
     ·FBXL19 介导 Rac3 蛋白降解位于蛋白酶体系统第44-45页
   ·赖氨酸~(166)为 FBXL19 介导 Rac3 蛋白泛素化靶位点第45-47页
     ·FBXL19 介导 Rac3 蛋白泛素化第45-46页
     ·赖氨酸~(166)为 FBXL19 介导 Rac3 泛素化靶位点第46-47页
   ·FBXL19 氨基端与羧基端在 Rac3 蛋白降解中的作用第47-49页
     ·FBXL19 氨基端与 Rac3 蛋白降解第47页
     ·FBXL19 羧基端与 Rac3 蛋白降解第47-48页
     ·FBXL19 羧基端与 Rac3 蛋白泛素化第48-49页
   ·TGFβ1 介导食道癌细胞钙黏连蛋白(E-cadherin)下调第49页
   ·Rac3 蛋白调节 TGFβ1 介导 E-cadherin 下调第49-51页
     ·Rac3N17 降低 TGFβ1 介导 E-cadherin 下调第49-50页
     ·Rac3 shRNA 降低 TGFβ1 介导 E-cadherin 下调第50页
     ·Rac3 蛋白上调 Snail 表达第50-51页
     ·Rac3 失活降低 TGFβ1 介导细胞拉伸第51页
   ·FBXL19 调节 TGFβ1 介导的 E-cadherin 下调第51-55页
     ·FBXL19 介导食道癌细胞 Rac3 蛋白降解第51-52页
     ·FBXL19 降低 Rac3 蛋白活性第52页
     ·FBXL19 降低 TGFβ1 介导食道癌细胞 E-cadherin 下调第52-53页
     ·FBXL19 阻抑 Rac3 诱导 Snail 表达第53页
     ·FBXL19 降低 TGFβ1 介导细胞拉伸第53-55页
第4章 讨论第55-59页
   ·Rac3 蛋白的研究第55-56页
   ·泛素蛋白酶体系统第56-57页
   ·钙黏连蛋白与肿瘤转移第57-59页
第5章 结论第59-61页
参考文献第61-74页
作者简介及在学期间科研成果第74-75页
致谢第75页

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