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琼脂糖包埋的GM-CSF基因修饰小鼠肝癌细胞体外抑制人肝癌细胞生长的研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-17页
第1章 绪论(综述)第17-23页
   ·肝癌免疫细胞治疗第17-21页
     ·DC 细胞肝癌治疗第17-19页
     ·肝癌 CIK 细胞治疗第19-20页
     ·肝癌 NK 细胞治疗第20-21页
   ·肝癌细胞因子治疗第21页
   ·肝癌肿瘤疫苗治疗第21页
   ·肝癌治疗的免疫调节细胞的清除第21-23页
第2章 实验研究第23-69页
 第1节 亲水性琼脂糖包埋小鼠肝癌细胞Hapa1-6杀伤人肝癌细胞HepG2 的研究第25-36页
   ·材料与仪器第25-26页
     ·主要材料第25页
     ·主要仪器第25-26页
   ·实验方法第26-29页
     ·细胞的培养第26-27页
     ·亲水性琼脂糖进行小鼠 Hapa1-6 细胞包埋培养第27页
     ·包埋细胞上清对 Hapa1-6 细胞以及人 HepG2 细胞生长影响第27-28页
     ·包埋细胞的巨珠与 HepG2 细胞共培养对 HepG2 细胞生长影响第28-29页
   ·实验结果第29-36页
     ·亲水性琼脂糖包埋细胞后形成巨珠的形态第29-30页
     ·包埋 Hapa1-6 细胞上清对 Hapa1-6 细胞生长影响第30-33页
     ·包埋 Hapa1-6 细胞上清对 HepG2 细胞生长影响第33-35页
     ·包埋 Hapa1-6 细胞巨珠与 HepG2 细胞共培养对 HepG2 细胞生长影响第35-36页
 第2节 基因表达载体构建以及在小鼠肝癌细胞的稳定表达第36-61页
   ·材料与仪器第36-38页
     ·主要材料第36-37页
     ·主要仪器第37-38页
   ·实验方法第38-51页
     ·引物设计第38-39页
     ·基因 PCR 扩增第39-40页
     ·PCR 产物凝胶回收第40页
     ·PCR 产物 T 载体克隆第40-42页
     ·基因真核表达载体构建第42-44页
     ·重组真核表达载体 pIP-GM-CSF 稳定转染 Hapa1-6 细胞第44-46页
     ·RT-PCR 检测 GM-CSF 基因在细胞表达第46-47页
     ·ELISA 检测 GM-CSF 蛋白在细胞培养上清表达第47-48页
     ·稳定表达 GM-CSF 细胞的 HSV-TK 基因稳定转染第48-49页
     ·RT-PCR 检测 HSV-TK 基因在细胞表达第49-50页
     ·HSV -TK/GCV 对肿瘤细胞的杀伤作用第50-51页
   ·实验结果第51-61页
     ·GM-CSF 基因真核载体构建结果第51-54页
     ·HSV-TK 基因真核载体构建结果第54-57页
     ·GM-CSF 基因在 Hapa1-6 细胞稳定表达的检测结果第57-59页
     ·RT-PCR 检测 HSV-TK 基因在稳定转染 GM-CSF Hapa1-6细胞稳定表达第59页
     ·MTT 法检测不同浓度 GCV 对转染基因的细胞的杀伤作用第59-61页
 第3节 亲水性琼脂糖包埋稳定基因表达小鼠肝癌细胞杀伤人肝癌细胞的研究第61-69页
   ·材料与仪器第61-62页
     ·主要材料第61-62页
     ·主要仪器第62页
   ·实验方法第62-64页
     ·稳定表达 GM-CSF 与 HSV-TK 基因小鼠 Hapa1-6 细胞进行亲水性琼脂糖包埋培养第62-63页
     ·包埋细胞上清对人 HepG2 细胞进行生长影响第63页
     ·包埋细胞的巨珠与 HepG2 细胞共培养对 HepG2 细胞生长影响第63-64页
     ·包埋细胞上清 GM-CSF 含量检测第64页
     ·HSV-TK 系统对包埋细胞的杀伤作用第64页
   ·实验结果第64-69页
     ·包埋细胞上清对人 HepG2 细胞生长影响第64-65页
     ·包埋细胞上清对 HepG2 细胞生长抑制第65-66页
     ·包埋细胞巨珠与 HepG2 细胞共培养对 HepG2 细胞生长影响第66-67页
     ·包埋细胞上清 GM-CSF 含量检测结果第67-68页
     ·给予 GCV 后,包埋细胞巨珠分泌 GM-CSF 检测结果第68-69页
第3章 讨论第69-73页
   ·亲水性琼脂糖包埋的小鼠肝癌细胞分泌物抑制人肝癌细胞的生长第69-70页
   ·稳定表达 GM-CSF 与 HSV-TK 双基因产物的细胞株的建立第70-71页
   ·包埋的基因稳定表达的小鼠肝癌细胞的抗肿瘤生长功能第71-73页
第4章 结论第73-75页
参考文献第75-89页
附图第89-95页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第95-96页
致谢第96页

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