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荸荠枯萎病菌病原学、分子检测及防治技术研究

摘要第1-11页
Abstract第11-15页
第一章 文献综述第15-28页
 1 荸荠枯萎病研究概况第15-16页
   ·荸荠的分布与价值第15页
   ·荸荠枯萎病的发生及危害第15-16页
   ·病原菌及生物学特性第16页
 2 镰刀菌研究概况第16-24页
   ·镰刀菌引起的植物病害第16-19页
   ·镰刀菌菌属的分类研究第19-20页
   ·镰刀菌群体遗传多样性研究第20-24页
     ·群体遗传学的概述第20页
     ·遗传多样性分子标记的方法第20-24页
       ·随机扩增片段长度多态RAPD第21页
       ·限制性片段长度多态RFLP第21-22页
       ·扩增片段长度多态AFLP第22页
       ·微卫星标记第22-23页
       ·简单重复序列区间扩增ISSR第23页
       ·单核苷酸多态性SNP第23-24页
 3 分子生物学技术在真菌鉴定和检测中的应用第24-27页
   ·分子标记在真菌鉴定中的应用第24-26页
   ·实时荧光定量PCR技术的应用第26-27页
 4 本研究的目的与意义第27-28页
第二章 荸荠枯萎病病原学研究第28-51页
 1 材料和方法第28-33页
   ·真菌的分离与保存第28页
   ·形态学鉴定第28-29页
   ·DNA序列测定第29-31页
     ·基因组DNA提取第29页
     ·PCR引物第29-30页
     ·PCR反应条件第30-31页
   ·特异性引物检测第31页
   ·不同菌株致病力测定第31-32页
   ·系统发育分析第32-33页
   ·数据统计与分析第33页
 2 结果与分析第33-48页
   ·病原菌分离和纯化第33页
   ·病原菌形态学鉴定第33-35页
   ·F.commune的分子鉴定第35-40页
   ·致病力测定第40-41页
   ·系统发育分析第41-48页
 3 讨论第48-51页
第三章 荸荠枯萎病菌遗传特性的ISSR分析第51-65页
 1 材料与方法第51-55页
   ·供试菌株第51-53页
   ·DNA提取第53页
   ·ISSR-PCR反应体系的正交设计第53页
   ·ISSR-PCR扩增引物的筛选第53-54页
   ·荸荠枯萎病菌的ISSR-PCR扩增第54页
   ·ISSR-PCR扩增产物的电泳检测第54页
   ·数据统计与分析第54-55页
 2 结果与分析第55-63页
   ·ISSR-PCR正交设计试验第55-56页
   ·ISSR-PCR扩增引物的筛选第56-58页
   ·荸荠枯萎病菌遗传多样性水平第58-59页
   ·荸荠枯萎病菌群体遗传结构与分化第59-60页
   ·种群间遗传变异分析第60-62页
   ·荸荠枯萎病菌的聚类分析第62-63页
 3 讨论第63-65页
第四章 Fusarium commune的实时荧光定量PCR检测第65-83页
 1 材料与方法第65-71页
   ·供试菌株第65-67页
   ·基因组DNA的制备第67-68页
     ·菌丝和植物组织基因组DNA的提取第67页
     ·土壤中F.commune基因组DNA的提取第67-68页
   ·引物设计与筛选第68页
   ·PCR反应体系及灵敏度检测第68-69页
     ·PCR反应体系第68-69页
     ·PCR灵敏度检测第69页
   ·SYBR Green I Real-time PCR标准曲线的绘制及灵敏度检测第69-70页
     ·实时荧光定量PCR扩增第69页
     ·F. commune基因组DNA标准曲线的绘制及灵敏度检测第69页
     ·加入植物组织DNA后F. commune基因组DNA的标准曲线绘制及灵敏度检测第69页
     ·接种土壤中F. commune的标准曲线绘制及灵敏度检测第69-70页
       ·F. commune分生孢子悬液接种土壤第69-70页
       ·土壤中F. commune的实时荧光定量检测第70页
   ·不同发病级别植株中F. commune的实时荧光定量PCR检测第70页
   ·不同发病级别植株的地下土壤中F. commune的实时荧光定量PCR检测第70页
   ·病害发生动态调查和田间土壤样品中F. commune含量检测第70-71页
   ·数据分析第71页
 2 结果与分析第71-81页
   ·引物的筛选第71-72页
   ·PCR引物灵敏度检测第72-74页
   ·F.commune基因组DNA标准曲线的绘制及灵敏度检测第74页
   ·加入植物组织DNA后F. commune基因组DNA标准曲线的绘制及灵敏度检测第74-76页
   ·接种土壤中F. commune标准曲线的绘制及灵敏度检测第76-78页
   ·不同发病级别植株中F. commune与病害严重度相关性分析第78页
   ·不同发病级别植株下的土壤中F. commune含量与病害严重度相关性分析第78-79页
   ·田间土壤带菌量与病害发生动态的相关性分析第79-81页
 3 讨论第81-83页
第五章 荸荠枯萎病发生动态与防治技术研究第83-95页
 1 材料与方法第83-86页
   ·荸荠枯萎病田间流行因素分析第83页
   ·不同荸荠品种对枯萎病的抗病性评价第83-84页
     ·供试品种第83页
     ·试验设计及调查方法第83-84页
   ·药剂防治第84-86页
     ·供试药剂第84-85页
     ·供试药剂对病原菌TF5的菌丝抑制作用第85页
     ·荸荠球茎药剂处理对枯萎病防治效果第85-86页
       ·球茎药剂处理盆栽试验第85页
       ·球茎药剂处理对田间荸荠枯萎病的防治效果第85-86页
   ·数据分析第86页
 2 结果与分析第86-93页
   ·荸荠枯萎病田间流行因素分析第86-90页
   ·不同荸荠品种对枯萎病的抗病性评价第90-91页
   ·不同杀菌剂对菌丝生长的抑制作用第91页
   ·球茎药剂处理盆栽试验第91-92页
   ·球茎药剂处理对田间荸荠枯萎病的防治效果第92-93页
 3 讨论第93-95页
第六章 结论、创新点与展望第95-98页
 1 结论第95-96页
 2 创新点第96页
 3 展望第96-98页
参考文献第98-109页
附录 攻读博士期间发表的学术论文第109-110页
致谢第110页

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