| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-36页 |
| 1. 研究背景 | 第14-15页 |
| 2. 文献综述 | 第15-35页 |
| ·发根农杆菌介导的遗传转化及其在柑橘遗传改良中的应用 | 第15-20页 |
| ·发根农杆菌及Ri质粒简介 | 第15-16页 |
| ·毛状根诱导及鉴定 | 第16-17页 |
| ·毛状根的应用 | 第17-20页 |
| ·发根农杆菌在柑橘遗传转化中的应用 | 第20页 |
| ·DR5报告系统在侧根发生和植物个体发育研究中的应用 | 第20-23页 |
| ·利用DR5报告系统观察侧根发生过程中的生长素分布 | 第20-21页 |
| ·利用DR5报告系统观察个体发育中的生长素分布 | 第21-23页 |
| ·植物先天性免疫与抗病育种 | 第23-28页 |
| ·病原相关分子模式(PAMP)激发的基础抗性(PTI) | 第23-26页 |
| ·病原菌效应蛋白(effector)促发的免疫反应 | 第26-28页 |
| ·植物先天性免疫机制对植物抗病遗传改良的启示 | 第28页 |
| ·柑橘溃疡病研究进展 | 第28-35页 |
| ·柑橘溃疡病分布及危害 | 第28-29页 |
| ·柑橘溃疡菌侵染机制 | 第29-31页 |
| ·柑橘转基因抗溃疡病研究进展 | 第31-35页 |
| 3. 本研究目的意义及内容 | 第35-36页 |
| 第二章 发根农杆菌MSU440介导DsREDl基因转化‘早金’甜橙及枳 | 第36-48页 |
| 1. 引言 | 第36页 |
| 2. 材料与方法 | 第36-40页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·培养基类型 | 第36-37页 |
| ·外植体准备及转化 | 第37页 |
| ·毛状根荧光检测、PCR鉴定及植株再生 | 第37-40页 |
| 3. 结果与分析 | 第40-45页 |
| ·毛状根诱导及荧光观察 | 第40-42页 |
| ·共转化毛状根PCR鉴定 | 第42-43页 |
| ·植株再生及表型分析 | 第43-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-47页 |
| 5. 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 发根农杆菌介导生长素报告体系DR5::GUS-YFP转化枳及植株再生 | 第48-71页 |
| 1. 引言 | 第48-49页 |
| 2. 材料与方法 | 第49-56页 |
| ·试验材料 | 第49-50页 |
| ·试验方法 | 第50-56页 |
| ·遗传转化 | 第50-51页 |
| ·转化材料GUS组织化学染色及荧光观察 | 第51-52页 |
| ·毛状根NAA及TIBA处理 | 第52页 |
| ·石蜡切片制作 | 第52页 |
| ·毛状根基因组DNA提取-微量法 | 第52-53页 |
| ·毛状根PCR鉴定 | 第53页 |
| ·转基因植株再生 | 第53页 |
| ·转基因植株基因组DNA提取及Southern blot鉴定 | 第53-55页 |
| ·转基因植株YFP基因qRT-PCR表达分析 | 第55-56页 |
| 3. 结果与分析 | 第56-67页 |
| ·枳毛状根诱导、GUS组织化学染色及YFP荧光观察 | 第56-58页 |
| ·枳毛状根PCR鉴定 | 第58-59页 |
| ·NAA及TIBA处理枳毛状根对DR5启动子生长素应答的影响 | 第59-60页 |
| ·枳毛状根及其侧根发育过程中生长素的分布 | 第60-61页 |
| ·枳毛状根再生植株 | 第61-65页 |
| ·再生植株分子鉴定和表达分析 | 第65-67页 |
| 4. 讨论 | 第67-71页 |
| ·毛状根在柑橘根系生物学及基因功能研究中的应用前景 | 第67-68页 |
| ·DR5::GUS-YFP应用于枳内源生长素分布和应答观察的可行性 | 第68页 |
| ·发根农杆菌应用于柑橘遗传改良的前景 | 第68-70页 |
| ·小结及后续研究设想 | 第70-71页 |
| 第四章 利用DR5::GUS-YFP体系观察枳内源生长素分布 | 第71-78页 |
| 1. 引言 | 第71页 |
| 2. 材料与方法 | 第71页 |
| ·植物材料 | 第71页 |
| ·试验方法 | 第71页 |
| 3. 结果与分析 | 第71-75页 |
| ·枳再生植株根中生长素分布 | 第71-74页 |
| ·枳再生植株茎中生长素分布 | 第74-75页 |
| ·枳再生植株叶内生长素分布 | 第75页 |
| 4. 讨论 | 第75-77页 |
| 5. 小结 | 第77-78页 |
| 第五章 转Xa21基因暗柳橙分子鉴定及溃疡病抗性分析 | 第78-86页 |
| 1. 引言 | 第78-79页 |
| 2. 材料与方法 | 第79-80页 |
| ·试验材料 | 第79页 |
| ·转基因材料嫁接扩繁 | 第79页 |
| ·转基因植株分子鉴定 | 第79-80页 |
| ·CTAB大量法提取转基因暗柳橙基因组DNA | 第79页 |
| ·转基因植株PCR扩增鉴定 | 第79页 |
| ·转基因植株Southern bolt杂交鉴定 | 第79页 |
| ·转基因植株qRT-PCR表达分析 | 第79-80页 |
| ·转基因植株叶片离体接种 | 第80页 |
| 3. 结果与分析 | 第80-83页 |
| ·转基因材料嫁接存活统计及叶片形态观察 | 第80-81页 |
| ·转基因植株分子鉴定 | 第81页 |
| ·转基因植株Xa21基因表达分析 | 第81-82页 |
| ·转Xa21基因暗柳橙抗病性分析 | 第82-83页 |
| 4. 讨论 | 第83-85页 |
| ·转基因植株Xa21基因表达水平及其与柑橘溃疡病抗性的关系 | 第83-84页 |
| ·Xa21基因参与柑橘溃疡病抗性反应机理 | 第84-85页 |
| 5. 小结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-105页 |
| 附录Ⅰ 作者简介及博士学习期间发表论文 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
