| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-20页 |
| 第一章 绪论 | 第20-38页 |
| ·肿瘤多药耐药 | 第20-23页 |
| ·膜转运蛋白介导的MDR | 第20-22页 |
| ·凋亡抵抗介导的MDR | 第22-23页 |
| ·白血病多药耐药 | 第23-25页 |
| ·雷公藤在肿瘤治疗中的应用 | 第25-30页 |
| ·雷公藤甲素的抗肿瘤作用 | 第26-28页 |
| ·雷公藤红素(南蛇藤素)的抗肿瘤作用 | 第28-30页 |
| ·miR-21与肿瘤耐药 | 第30-35页 |
| ·本研究的目的、意义、方法和技术路线 | 第35-38页 |
| ·研究目的 | 第35页 |
| ·研究意义 | 第35-36页 |
| ·研究方法和技术路线 | 第36-38页 |
| 第二章 雷公藤甲素抑制白血病细胞miR-21表达的机制 | 第38-72页 |
| ·材料 | 第39-48页 |
| ·细胞株 | 第39页 |
| ·主要仪器和器材 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39-41页 |
| ·溶液配制 | 第41-48页 |
| ·方法 | 第48-65页 |
| ·细胞培养 | 第48-50页 |
| ·MTT法观察雷公藤甲素对K562细胞增殖的抑制作用 | 第50页 |
| ·microRNA和mRNA的荧光定量PCR检测 | 第50-54页 |
| ·western blot实验方法 | 第54-58页 |
| ·报告基因检测雷公藤甲素对NF-κB信号通路的调控 | 第58-60页 |
| ·电泳迁移率变动分析(EMSA)检测NF-κB DNA结合活性 | 第60-63页 |
| ·染色质免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) | 第63-65页 |
| ·结果 | 第65-69页 |
| ·雷公藤甲素的毒性 | 第65-66页 |
| ·雷公藤甲素对miR一12表达的影响 | 第66页 |
| ·雷公藤甲素对P65表达的影响 | 第66-67页 |
| ·雷公藤甲素对NF-κB DNA结合能力的影响 | 第67-68页 |
| ·雷公藤甲素对P65结合miR-21启动子能力的影响 | 第68页 |
| ·雷公藤甲素对miR-21启动子活性的影响 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| 第三章 雷公藤甲素通过miR-21抑制K562/A02细胞P-gp表达的机制 | 第72-109页 |
| ·材料 | 第73-82页 |
| ·细胞株 | 第73页 |
| ·主要仪器和器材 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73-75页 |
| ·溶液配制 | 第75-82页 |
| ·方法 | 第82-99页 |
| ·细胞培养 | 第82-84页 |
| ·MTT法观察雷公藤甲素对K562细胞增殖的抑制作用 | 第84页 |
| ·microRNA的荧光定量PCR检测 | 第84-88页 |
| ·western blot实验方法 | 第88-92页 |
| ·报告基因验证PTEN是miR-21的直接靶基因 | 第92-94页 |
| ·流式细胞仪检测P-gp | 第94-95页 |
| ·罗丹明-123蓄积试验 | 第95页 |
| ·流式细胞仪检测凋亡 | 第95-96页 |
| ·microRNA模拟物和抑制物转染 | 第96-97页 |
| ·siRNA于扰PTEN表达 | 第97-99页 |
| ·结果 | 第99-107页 |
| ·雷公藤甲素的毒性 | 第99-100页 |
| ·雷公藤甲素对阿霉素敏感性的影响 | 第100-101页 |
| ·雷公藤甲素抑制P糖蛋白表达和功能 | 第101-102页 |
| ·雷公藤甲素降低miR-21表达和上调PTEN水平 | 第102-103页 |
| ·miR-21水平与K562细胞耐药的关系 | 第103-104页 |
| ·miR-21调节K562和K562/A02细胞PTEN/AKT表达 | 第104-106页 |
| ·PTEN在白血病耐药中的作用 | 第106-107页 |
| ·讨论 | 第107-109页 |
| 第四章 雷公藤甲素通过miR-21影响白血病凋亡的机制 | 第109-137页 |
| ·材料 | 第109-119页 |
| ·细胞株 | 第109-110页 |
| ·主要仪器和器材 | 第110页 |
| ·主要试剂 | 第110-112页 |
| ·溶液配制 | 第112-119页 |
| ·方法 | 第119-130页 |
| ·细胞培养 | 第119-120页 |
| ·MTT法观察雷公藤甲素对K562细胞增殖的抑制作用 | 第120-121页 |
| ·microRNA的荧光定量PCR检测 | 第121-124页 |
| ·westernblot实验方法 | 第124-129页 |
| ·流式细胞仪检测凋亡 | 第129-130页 |
| ·结果 | 第130-134页 |
| ·雷公藤甲素的毒性 | 第130-131页 |
| ·雷公藤甲素对阿霉素敏感性的影响 | 第131-132页 |
| ·miR-21水平与K562细胞耐药的关系 | 第132-133页 |
| ·miR-21调节K562和K562/A02细胞BCL-2表达 | 第133-134页 |
| ·讨论 | 第134-137页 |
| 第五章 结论 | 第137-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 参考文献 | 第139-162页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第162页 |
