| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| ·立体选择性羰基还原酶催化手性醇合成 | 第9-10页 |
| ·手性醇类化合物的应用 | 第9页 |
| ·立体选择性羰基还原酶 | 第9页 |
| ·羰基还原酶催化手性醇合成 | 第9-10页 |
| ·羰基还原酶催化手性醇合成存在的问题 | 第10页 |
| ·羰基还原酶基因的克隆及表达 | 第10-11页 |
| ·羰基还原酶表达体系的选择 | 第11-12页 |
| ·常用表达体系 | 第11页 |
| ·羰基还原酶表达存在的问题 | 第11-12页 |
| ·羰基还原酶在大肠杆菌中的外分泌表达 | 第12-14页 |
| ·改善细胞壁通透性提高羰基还原酶表达 | 第13页 |
| ·温和型化学渗透剂提高细胞通透性 | 第13-14页 |
| ·原位表达 | 第14页 |
| ·原位表达系统的构建 | 第14-17页 |
| ·基因敲除技术 | 第14-15页 |
| ·原位表达质粒的构建 | 第15-16页 |
| ·羰基还原酶在 C. parapsilosis 中的原位表达 | 第16-17页 |
| ·论文的研究意义及内容 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-27页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·菌种与质粒 | 第18页 |
| ·实验试剂 | 第18-19页 |
| ·试验仪器 | 第19页 |
| ·培养基及相关溶液 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-27页 |
| ·大肠杆菌外分泌表达系统的构建 | 第20-22页 |
| ·C. parapsilosis 原位表达系统的构建 | 第22-26页 |
| ·重组酶的酶学性质分析 | 第26页 |
| ·不对称转化反应 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-40页 |
| ·RCR 在大肠杆菌中的外分泌表达 | 第27-30页 |
| ·大肠杆菌外分泌表达系统的构建 | 第27页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白酶活力的测定 | 第28-29页 |
| ·细胞通透性的改善对胞外酶活的影响 | 第29-30页 |
| ·不对称还原 2-羟基苯乙酮 | 第30页 |
| ·C. parapsilosis 原位表达质粒的构建 | 第30-32页 |
| ·原位表达质粒的设计 | 第30-31页 |
| ·启动子、终止子、相关基因及同源区序列的钓取 | 第31页 |
| ·原位表达质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·RCR 在 C. parapsilosis 中的原位表达 | 第32-35页 |
| ·RCR 原位表达质粒的构建 | 第32页 |
| ·C. parapsilosis 感受态的制备和电击转化 | 第32页 |
| ·转化子的鉴定 | 第32-33页 |
| ·酶活力测定 | 第33-34页 |
| ·酶最适反应 pH 和 pH 稳定性的研究 | 第34页 |
| ·酶最适反应温度和温度稳定性的研究 | 第34-35页 |
| ·重组菌 C. parapsilosis/pCP-rcr 催化不对称转化的研究 | 第35-40页 |
| ·酶液催化不对称转化反应 | 第36页 |
| ·全细胞催化不对称转化反应 | 第36-38页 |
| ·温度对不对称转化反应的影响 | 第38页 |
| ·反应体系的 pH 对全细胞不对称转化反应的影响 | 第38-40页 |
| 主要结论与展望 | 第40-42页 |
| 主要结论 | 第40-41页 |
| 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |
