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福建桉树焦枯病菌鉴定及其诱导下桉树转录组和蛋白组学研究

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
第一章 前言第13-36页
 1 桉树焦枯病菌第14-17页
 2 植物抗病机制研究进展第17-20页
   ·植物抗病相关基因第18-20页
     ·抗病基因第18-19页
     ·防卫基因第19-20页
 3 桉树抗病分子机制研究概况第20-21页
 4 转录组和蛋白组第21-24页
   ·转录组及其研究方法第21-22页
   ·RNA-Seq技术及其在植物抗病方面的应用第22页
   ·蛋白组及其研究方法第22-23页
   ·iTRAQ技术及其在植物抗逆性中的应用第23-24页
 5 立论依据和研究意义第24-26页
 6 技术路线图第26-27页
 参考文献第27-36页
第二章 福建省桉树焦枯病菌收集与分类鉴定第36-55页
 1 材料与方法第36-42页
   ·材料第36-37页
     ·供试菌株第36-37页
     ·主要仪器及试剂第37页
   ·方法第37-42页
     ·形态学观察第37页
     ·分子生物学鉴定第37-39页
       ·菌丝制备第37页
       ·基因组DNA提取第37-38页
       ·BT、HIS3及TEF-1α片段扩增第38页
       ·扩增产物的回收第38-39页
       ·序列分析及系统发育树构建第39页
     ·致病性测定第39-42页
 2 结果与分析第42-51页
   ·形态学观察第42-47页
   ·分子鉴定第47-51页
     ·基因组DNA提取第47页
     ·BT、HIS3和TEF-1α片段扩增与回收第47-48页
     ·序列分析第48页
     ·系统发育树构建第48-51页
   ·致病性测定第51页
 3 讨论第51-53页
 参考文献第53-55页
第三章 焦枯病菌胁迫下桉树转录组学分析第55-96页
 1 材料与方法第55-60页
   ·材料处理第55页
     ·孢子悬浮液配制第55页
     ·样品处理与采集第55页
   ·主要仪器与试剂第55-56页
   ·方法与步骤第56-60页
     ·Total RNA的提取第56页
     ·RNA提取质量检测第56页
     ·文库构建第56-57页
     ·数据处理与评估第57页
       ·Clean reads的获得第57页
       ·测序质量评估第57页
       ·比对与分析第57页
     ·基因表达注释第57-58页
     ·差异表达基因分析第58-59页
       ·差异表达基因的筛选第58页
       ·差异表达基因的GO功能分析第58页
       ·差异表达基因的Pathway分析第58-59页
     ·qRT-PCR验证第59-60页
       ·cDNA的合成第59页
       ·实时荧光定量PCR第59-60页
 2 结果分析第60-81页
   ·RNA提取质量分析第60-61页
   ·测序质量评估第61-63页
     ·测序reads评估第61页
     ·测序饱和度分析第61页
     ·测序随机性评价第61-63页
     ·比对统计第63页
   ·qRT-PCR验证第63-64页
   ·差异表达基因研究第64-81页
     ·病原菌接种后差异表达基因数量分析第64-65页
     ·病原菌接种后的差异表达基因分析第65-76页
     ·差异表达基因的 GO 功能注释第76页
     ·差异表达基因的Pathway分析第76-81页
 3 讨论第81-93页
   ·呼吸作用相关基因第81-82页
   ·植物激素介导的防御反应信号途径相关基因第82-84页
     ·SA、JA/ET介导的抗病信号途径第82-83页
     ·BRs介导的抗病信号途径第83-84页
     ·CTK及Auxins介导的抗病信号途径第84页
   ·抗氧化相关基因第84-85页
   ·苯丙烷类代谢相关基因第85-86页
   ·类异戊二烯代谢途径相关基因第86页
   ·植物与病原互作相关基因第86-93页
 参考文献第93-96页
第四章 焦枯病菌胁迫下桉树蛋白组学研究第96-124页
 1 材料与方法第96-99页
   ·材料第96页
   ·主要仪器与试剂第96页
   ·方法与步骤第96-99页
     ·蛋白提取第96-97页
     ·蛋白质量检测第97页
     ·蛋白酶解第97页
     ·iTRAQ标记第97页
     ·SCX分离第97-98页
     ·LC-MS/MS分析第98页
     ·生物信息学分析第98-99页
       ·原始数据处理第98页
       ·基本鉴定信息统计第98-99页
       ·GO分析第99页
       ·COG分析第99页
       ·Pathway分析第99页
       ·差异蛋白的GO及Pathway富集分析第99页
 2 结果与分析第99-115页
   ·蛋白质检测第99-100页
     ·定量标准曲线第99-100页
     ·蛋白质浓度第100页
   ·蛋白质鉴定第100-103页
     ·肽段鉴定质量评估第100-101页
     ·基本鉴定信息第101页
     ·蛋白相对分子质量分布第101-102页
     ·肽段序列长度分布第102页
     ·肽段序列覆盖度分布第102-103页
     ·Unique肽段数量分布第103页
   ·蛋白质注释第103-107页
     ·GO分析第103-106页
     ·COG功能分类第106页
     ·Pathway分析第106-107页
   ·差异表达蛋白分析第107-114页
     ·蛋白质丰度比分布第107-108页
     ·差异蛋白统计分析第108页
     ·差异蛋白的GO富集分析第108-113页
     ·差异蛋白的Pathway富集分析第113-114页
   ·差异蛋白和差异基因的关联性分析第114-115页
     ·蛋白组与转录组关联分析第114-115页
     ·差异蛋白及其与对应基因的关联分析第115页
 3 讨论第115-123页
 参考文献第123-124页
第五章 结论与创新点第124-126页
 1 结论第124-125页
 2 主要创新点第125页
 3 下阶段计划第125-126页
附图 1 Ca. pseudoreteaudii 多重比对序列第126-136页
附图 2 Ca. pseudocolhounii 多重比对序列第136-142页
附图 3 Ca. kyotensis 多重比对序列第142-150页
附图 4 Ca. pseudoreteaudii 接种后尾细桉 M1 病斑发展状况第150-151页
致谢第151-152页

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