| 目录 | 第1-6页 |
| CONTENTS | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-23页 |
| ·PCV2 病原学 | 第12-13页 |
| ·病毒的分类 | 第12页 |
| ·病毒的结构及理化特性 | 第12页 |
| ·病毒的基因组结构 | 第12-13页 |
| ·病毒的培养特性 | 第13页 |
| ·PCV 分子生物学 | 第13-14页 |
| ·病毒的复制与转录 | 第13-14页 |
| ·病毒编码的主要蛋白 | 第14页 |
| ·引起疾病的临床症状 | 第14-15页 |
| ·断奶仔猪多系统衰竭综合征的临床症状 | 第15页 |
| ·猪皮炎肾病综合征的临床症状 | 第15页 |
| ·猪呼吸道疾病综合征 | 第15页 |
| ·母猪繁殖障碍 | 第15页 |
| ·PCV2 流行病学 | 第15-16页 |
| ·传播途径 | 第15-16页 |
| ·易感动物及宿主 | 第16页 |
| ·PCV2 免疫抑制机理的研究 | 第16-18页 |
| ·PCV2 对树突状细胞的影响 | 第16-17页 |
| ·PCV2 对单核/巨噬细胞的影响（MLCs） | 第17页 |
| ·PCV2 对细胞因子变化的影响 | 第17-18页 |
| ·病毒诊断技术的研究进展 | 第18-21页 |
| ·病原学诊断技术 | 第18-20页 |
| ·血清学诊断技术 | 第20-21页 |
| ·疫苗的研究进展 | 第21-22页 |
| ·PCV2 灭活疫苗 | 第21页 |
| ·PCV2 弱毒疫苗 | 第21-22页 |
| ·PCV2 亚单位疫苗 | 第22页 |
| ·目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-32页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·毒株和细胞与抗体 | 第23页 |
| ·质粒和菌株 | 第23页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-32页 |
| ·Rep 和 Rep’基因克隆 | 第26页 |
| ·重组病毒拯救 | 第26-27页 |
| ·病毒蚀斑克隆 | 第27页 |
| ·重组蛋白表达 | 第27页 |
| ·重组蛋白反应活性鉴定 | 第27页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第27页 |
| ·重组蛋白免疫原性鉴定测定 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第28页 |
| ·动物免疫与细胞融合 | 第28页 |
| ·MAb 亚类鉴定及腹水制备 | 第28页 |
| ·MAb 反应活性鉴定 | 第28页 |
| ·MAb 抗原交叉反应鉴定 | 第28页 |
| ·合成肽法抗原识别表位初步定位 | 第28-29页 |
| ·肽扫描法抗原识别表位精确定位 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白亚单位疫苗的制备 | 第30页 |
| ·动物免疫与攻毒试验 | 第30页 |
| ·免疫血清抗体的测定 | 第30页 |
| ·血清中和试验 | 第30页 |
| ·常规与荧光定量 PCR | 第30-31页 |
| ·组织病理学检验 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-45页 |
| ·基因克隆与测序 | 第32页 |
| ·重组病毒蚀斑克隆 | 第32-33页 |
| ·重组病毒繁殖特性 | 第33-34页 |
| ·Rep 蛋白表达及反应原性鉴定 | 第34页 |
| ·Rep’蛋白表达及反应原性鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·Rep 和 Rep’蛋白免疫原性测定 | 第36-37页 |
| ·PCV2 感染细胞中 Rep 和 Rep’蛋白检测 | 第37-38页 |
| ·MAb 筛选及亚类鉴定 | 第38页 |
| ·MAb 反应原性鉴定 | 第38-39页 |
| ·MAb 特异性鉴定 | 第39页 |
| ·抗原识别表位的初步定位 | 第39-40页 |
| ·抗原识别表位的精确定位 | 第40页 |
| ·PCV2-rCap、-Rep 和 Rep’蛋白免疫鼠抗体测定 | 第40-41页 |
| ·PCV2-rCap、-Rep 和 Rep’免疫鼠中和抗体测定 | 第41-42页 |
| ·PCV2-rCap、-Rep 和 Rep’免疫鼠攻毒后病毒血症测定 | 第42页 |
| ·PCV2-rCap、-Rep 和 Rep’免疫鼠攻毒后肺脏病毒载量测定 | 第42-43页 |
| ·PCV2-rCap、-Rep 和 Rep’免疫鼠攻毒后肺脏组织病理观察 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·PCV2-Rep 和-Rep’蛋白表达及其免疫原性 | 第45页 |
| ·PCV2-Rep’蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定 | 第45-46页 |
| ·PCV2-Rep 和-Rep’和 Cap 蛋白免疫保护性研究 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59页 |
