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牛病毒性腹泻病毒RT-LAMP检测方法的建立及初步应用

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-23页
   ·牛病毒性腹泻病毒的生物学特征第11-12页
   ·牛病毒性腹泻病毒的基因组第12-13页
   ·牛病毒性腹泻-黏膜病的类型第13-14页
     ·黏膜病第13页
     ·病毒性腹泻型第13-14页
     ·持续性感染与免疫抑制第14页
   ·牛病毒性腹泻流行病学第14-15页
     ·传染源第14-15页
     ·传播媒介第15页
     ·易感动物及流行特征第15页
   ·牛病毒性腹泻的防治第15-16页
   ·牛病毒性腹泻检测技术研究进展第16-19页
     ·血清学试验第16-17页
     ·病原鉴定第17-19页
   ·环介导等温扩增技术第19-22页
     ·靶序列与引物序列结构第19-20页
     ·LAMP 方法的基本原理第20-21页
     ·LAMP 技术的应用第21-22页
   ·研究目的与意义第22-23页
2 材料与方法第23-32页
   ·材料第23-25页
     ·病毒、质粒和血清第23页
     ·生物学试剂第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·引物第24-25页
   ·实验方法第25-32页
     ·BVDV 增殖和 TCID50测定第25-26页
     ·样品处理和模板制备第26页
     ·BVDV RT-LAMP 方法的标准化第26-27页
     ·BVDV RT-LAMP 方法的特异性检测第27页
     ·BVDV RT-LAMP 方法的灵敏性检测及与 RT-PCR 敏感性的比较第27-28页
     ·BVDV RT-LAMP 方法的实时监控第28页
     ·BVDV RT-LAMP 方法的可视化观察第28页
     ·BVDV RT-LAMP 方法的符合试验第28-29页
     ·黑龙江省部分奶牛场 BVDV 感染的监测第29-30页
     ·BVDV RT-LAMP 方法在规模化奶牛场 BVDV 净化中的应用第30-32页
3 结果与分析第32-44页
   ·BVDV 的增殖第32页
   ·BVDV RT-LAMP 方法的标准化第32-36页
     ·扩增温度优化结果第32-33页
     ·引物浓度优化结果第33页
     ·扩增时间优化结果第33-34页
     ·Betaine 浓度优化结果第34页
     ·Mg~(2+)浓度优化结果第34-35页
     ·体系优化结果第35-36页
   ·BVDV RT-LAMP 方法的特异性结果第36页
   ·BVDV RT-LAMP 方法的灵敏性检测及与 RT-PCR 敏感性的比较结果第36-37页
   ·BVDV RT-LAMP 方法的实时监控结果第37页
   ·BVDV RT-LAMP 方法的可视化观察第37-38页
   ·RT-LAMP 方法的符合试验结果第38-39页
   ·黑龙江省部分奶牛场牛病毒性腹泻病毒感染监测结果第39-41页
     ·BVDV 血清学监测结果第39页
     ·BVDV 病原学监测结果第39-41页
   ·BVDV RT-LAMP 方法在规模化奶牛场 BVDV 净化中的应用第41-44页
4 讨论第44-46页
   ·BVDV RT-LAMP 检测方法反应体系的建立及优化第44页
   ·BVDV RT-LAMP 方法的符合试验第44-45页
   ·黑龙江省部分奶牛场牛病毒性腹泻病毒感染监测第45页
   ·RT-LAMP 方法在规模化奶牛场 BVDV 净化中的应用第45-46页
5 结论第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-54页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第54页

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