| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第1章 类泛素蛋白功能的研究进展 | 第11-49页 |
| ·引言 | 第11页 |
| ·真核生物类泛素蛋白的种类及修饰过程 | 第11-24页 |
| ·真核生物泛素化的发现及研究现状 | 第11-22页 |
| ·真核生物中类泛素蛋白的种类及修饰过程 | 第22-24页 |
| ·古细菌类泛素蛋白及其修饰过程 | 第24-28页 |
| ·原核生物类泛素蛋白Pup及其修饰过程 | 第28-32页 |
| ·SUMO蛋白参与的细胞生物学进程及与疾病发生的相关性 | 第32-41页 |
| ·SUMO蛋白参与姐妹染色单体分离的机制 | 第33-37页 |
| ·SUMO蛋白参与DNA修复的机制 | 第37-40页 |
| ·SUMO蛋白与疾病 | 第40-41页 |
| ·Nedd8蛋白参与的细胞生物学进程及与疾病的相关性 | 第41-46页 |
| ·Nedd8蛋白与蛋白质降解 | 第42-45页 |
| ·Nedd8蛋白与基因转录调节和DNA复制执照的发放 | 第45页 |
| ·Nedd8蛋白与疾病 | 第45-46页 |
| ·布氏锥虫中的类泛素蛋白及研究价值 | 第46-49页 |
| ·布氏锥虫中的类泛素蛋白 | 第46-47页 |
| ·研究布氏锥虫类泛素蛋白的意义及价值 | 第47-49页 |
| 第2章 原核生物类泛素蛋白Pup的结构和功能研究 | 第49-61页 |
| ·原核生物类泛素蛋白Pup研究背景介绍 | 第49页 |
| ·研究结果与讨论 | 第49-56页 |
| ·蛋白序列分析、圆二色光谱实验以及核磁共振实验结果揭示Pup的无序性 | 第49-53页 |
| ·表面等离子体共振实验及核磁共振实验验证Pup蛋白与蛋白酶体调节亚基Mpa的结合 | 第53-56页 |
| ·Pup可能通过识别Mpa介导其修饰蛋白被20S蛋白酶体降解 | 第56页 |
| ·实验材料及方法 | 第56-58页 |
| ·序列分析与进化树分析 | 第57页 |
| ·Pup蛋白与Mpa蛋白纯化 | 第57页 |
| ·圆二色光谱(CD)检测 | 第57页 |
| ·表面等离子体共振实验检测 | 第57-58页 |
| ·核磁共振实验 | 第58页 |
| ·总结 | 第58-61页 |
| 第3章 布氏锥虫中SUMO蛋白在细胞周期中的调节功能 | 第61-77页 |
| ·SUMO蛋白研究背景介绍 | 第61页 |
| ·布氏锥虫细胞周期 | 第61-62页 |
| ·实验材料与方法 | 第62-65页 |
| ·细胞培养与转化 | 第63页 |
| ·实时定量反转录PCR | 第63-64页 |
| ·流式细胞术分析 | 第64页 |
| ·核型统计 | 第64页 |
| ·免疫荧光 | 第64-65页 |
| ·BrdU掺入实验 | 第65页 |
| ·体外SUMO化实验 | 第65页 |
| ·免疫印迹实验 | 第65页 |
| ·研究结果与讨论 | 第65-75页 |
| ·从基因组中鉴定SUMO蛋白 | 第66页 |
| ·在前循环形式细胞中干扰SUMO蛋白表达 | 第66-67页 |
| ·SUMO敲除对细胞周期的影响 | 第67-68页 |
| ·SUMO敲除导致细胞出现异常核型 | 第68-70页 |
| ·SUMO敲除不影响S期的DNA合成 | 第70-71页 |
| ·SUMO敲除不影响纺锤体形成 | 第71-72页 |
| ·SUMO蛋白前体的成熟化 | 第72页 |
| ·SUMO蛋白的定位 | 第72-74页 |
| ·参与布氏锥虫SUMO化的酶 | 第74-75页 |
| ·总结 | 第75-77页 |
| 第4章 布氏锥虫中Nedd8蛋白在细胞周期中的调节功能 | 第77-99页 |
| ·Nedd8系统研究背景介绍 | 第77页 |
| ·实验材料与方法 | 第77-81页 |
| ·细胞培养与转化 | 第77-78页 |
| ·免疫荧光 | 第78页 |
| ·核型统计 | 第78页 |
| ·流式细胞数分析 | 第78-79页 |
| ·实时定量反转录PCR | 第79页 |
| ·免疫印迹实验 | 第79页 |
| ·酵母双杂交 | 第79-80页 |
| ·BrdU掺入实验 | 第80页 |
| ·串联亲和纯化 | 第80页 |
| ·提取细胞骨架 | 第80-81页 |
| ·研究结果与讨论 | 第81-96页 |
| ·鉴定可能的Nedd8蛋白 | 第81-83页 |
| ·在前循环形式的布氏锥虫中干扰Nedd8的表达 | 第83页 |
| ·Nedd8敲除对细胞周期的影响 | 第83-84页 |
| ·Nedd8敲除细胞的核型分析 | 第84-87页 |
| ·敲除Nedd8蛋白引起泛素化水平下降 | 第87页 |
| ·Nedd8修饰系统中的酶 | 第87-89页 |
| ·Nedd8敲除引起细胞重新开始DNA合成 | 第89页 |
| ·Nedd8敲除影响纺锤体形成 | 第89-91页 |
| ·Nedd8蛋白定位 | 第91-92页 |
| ·Nedd8与鞭毛贴附区(FAZ)的关系 | 第92-95页 |
| ·Nedd8的底物 | 第95-96页 |
| ·总结 | 第96-99页 |
| 第5章 总结 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-117页 |
| 附录 | 第117-121页 |
| 致谢 | 第121-123页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第123-124页 |
