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一种新的富含GC基因随机诱变方法的建立和细菌群体感应系统的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略语表第13-14页
第一章 一种GC碱基特异诱变方法的建立第14-54页
 1 前言第14-30页
   ·体外分子定向进化技术的兴起第14-16页
   ·多样性基因文库构建的标准第16-17页
     ·基因突变的偏爱性第16页
     ·基因突变的频率第16-17页
   ·多样性基因文库构建的策略第17-29页
     ·随机诱变第17-26页
     ·基因重组第26-29页
   ·本研究目的和意义第29-30页
 2 材料与方法第30-40页
   ·实验材料第30-33页
     ·菌株与质粒第30页
     ·聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)引物第30页
     ·培养基第30-31页
     ·试剂第31页
     ·试剂配制第31-32页
     ·主要仪器第32-33页
   ·实验方法第33-40页
     ·解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)甘露聚糖酶基因(man)的克隆第33-36页
     ·用亚硫酸氢钠对man基因诱变第36-39页
     ·TEM-1型β-内酰胺酶的定向进化第39-40页
 3. 结果与分析第40-51页
   ·解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)甘露聚糖酶基因(man)的克隆第40-42页
   ·亚硫酸氢钠诱变第42-48页
     ·诱变原理第42-43页
     ·诱变条件及效果第43-48页
   ·用亚硫酸氢钠诱变法改变β-内酰胺酶基因的底物特异性第48-51页
 4. 总结与讨论第51-54页
第二章 细菌群体感应系统的研究第54-112页
 1 前言第54-84页
   ·细菌的群体感应第54-67页
     ·群体感应的信号分子第55-58页
     ·群体感应的调控机制第58-67页
   ·群体感应的干扰第67-76页
     ·抑制信号分子的合成第68页
     ·降解信号分子第68-74页
     ·AHL类似物竞争性结合LuxR型蛋白第74-75页
     ·降解LuxR型受体蛋白第75-76页
   ·AHL分子的检测第76-83页
     ·AHL分子的物理检测第77页
     ·AHL分子的生物检测第77-83页
   ·本研究目的和意义第83-84页
 2 材料与方法第84-93页
   ·实验材料第84-87页
     ·菌株与质粒第84页
     ·培养基第84-85页
     ·试剂第85页
     ·溶液配制第85-86页
     ·主要仪器第86-87页
   ·实验方法第87-93页
     ·群体感应细菌的筛选及性质初步研究第87-88页
     ·AHL分子降解菌的筛选及性质研究第88-89页
     ·新的生测菌株的构建及应用第89-93页
 3 结果与讨论第93-110页
   ·群体感应海洋菌的筛选和性质初步研究第93-96页
     ·OOHL浓度曲线的确定第93-95页
     ·群体感应海洋细菌的筛选第95页
     ·1A01058菌生长曲线测定及AHL分子浓度随时间的变化第95-96页
   ·AHL分子降解菌的筛选及性质研究第96-100页
     ·AHL分子降解菌的筛选第96-97页
     ·AHL分子降解菌的活性初步研究第97-99页
     ·AHL分子降解菌的性质初步研究第99-100页
   ·新的群体感应生测系统的建立第100-110页
     ·生测质粒的构建第100-105页
     ·生测菌株用于AHL分子检测第105-110页
 4 总结与讨论第110-112页
参考文献第112-127页
致谢第127-128页
附录:已发表和待发表的文章和专利第128页

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