低能Ar~+束介导的家蚕卵转基因技术研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 文献综述 | 第10-19页 |
| 1 离子束生物工程学概述 | 第10-11页 |
| ·低能离子注入生物体的原初过程 | 第10-11页 |
| ·低能离子束生物技术的应用 | 第11页 |
| 2 低能离子束转基因研究概述 | 第11-13页 |
| ·低能离子束生物工程装置和工作原理 | 第11-12页 |
| ·低能离子束转基因的原理 | 第12页 |
| ·低能离子束转基因的研究进展 | 第12-13页 |
| 3 家蚕在辐射生物学研究中的应用 | 第13-14页 |
| ·家蚕作为离子束转基因材料的优点 | 第13-14页 |
| ·家蚕在辐射生物学研究中的应用 | 第14页 |
| 4 转基因家蚕概述 | 第14-16页 |
| ·转基因的概念 | 第14-15页 |
| ·转基因家蚕的技术研究 | 第15页 |
| ·转基因家蚕的应用 | 第15-16页 |
| 5 PiggyBac转座子概述 | 第16-19页 |
| ·转座子的概念和类型 | 第16-17页 |
| ·PiggyBac转座子的结构和转座机制 | 第17-18页 |
| ·piggyBac转座子在转基因家蚕中的研究 | 第18-19页 |
| 1 引言 | 第19-21页 |
| ·研究目的 | 第19页 |
| ·研究意义 | 第19页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-34页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·家蚕品系 | 第21页 |
| ·实验所用到的质粒、菌株和试剂 | 第21页 |
| ·常用溶液的配制 | 第21-24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-34页 |
| ·确定离子注入物理参数的预实验 | 第25页 |
| ·质粒大量抽提和纯化 | 第25-26页 |
| ·注入前处理 | 第26页 |
| ·离子注入和质粒浸泡孵育 | 第26-27页 |
| ·荧光显微镜检测外源基因gfp的表达 | 第27页 |
| ·转基因个体继代和PCR检测 | 第27-28页 |
| ·转基因个体iPCR检测插入位点 | 第28-30页 |
| ·转基因个体Southern杂交检测拷贝数 | 第30-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-41页 |
| ·离子束注入参数的优化 | 第34页 |
| ·质粒大抽产物的检测 | 第34-35页 |
| ·GFP蛋白的荧光表达检测 | 第35页 |
| ·阳性个体的PCR筛选 | 第35-37页 |
| ·G0代实验组个体PCR法阳性初选结果 | 第36-37页 |
| ·G1代实验组个体PCR法阳性检测结果 | 第37页 |
| ·iPCR及插入位点分析 | 第37-39页 |
| ·iPCR鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·iPCR产物序列分析 | 第38-39页 |
| ·插入位点分析 | 第39页 |
| ·Southern杂交检测插入位点个数 | 第39-41页 |
| ·Dig标记探针制备结果 | 第39-40页 |
| ·基因组酶切产物检测 | 第40页 |
| ·Southern杂交位点个数分析 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 5 结论与工作展望 | 第43-45页 |
| ·主要结论 | 第43-44页 |
| ·工作展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 个人简介 | 第51页 |
| 在学期间发表的论文 | 第51页 |
