| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-13页 |
| 1 引言 | 第13-33页 |
| ·植物雄性不育研究现状 | 第13-16页 |
| ·植物雄性不育类型 | 第13-14页 |
| ·植物雄性不育经典遗传学研究进展 | 第14-15页 |
| ·植物雄性不育细胞生物学研究进展 | 第15页 |
| ·植物雄性不育分子生物学研究进展 | 第15-16页 |
| ·生物技术在植物雄性不育系上的应用 | 第16-28页 |
| ·组织培养技术在植物育种中的应用 | 第16-17页 |
| ·基因工程技术在植物育种中的应用 | 第17页 |
| ·花药培养单倍体育种技术 | 第17-23页 |
| ·植物雄性不育基因分子生物学研究 | 第23-28页 |
| ·国内外苜蓿雄性不育系研究现状 | 第28-30页 |
| ·国外苜蓿雄性不育系研究现状 | 第28-29页 |
| ·国内苜蓿雄性不育系研究现状 | 第29-30页 |
| ·研究目的意义 | 第30-31页 |
| ·研究主要内容 | 第31-32页 |
| ·技术路线图 | 第32-33页 |
| 2 苜蓿花药培养的研究 | 第33-49页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·试验方法 | 第33-38页 |
| ·材料预处理 | 第33-34页 |
| ·花药愈伤组织诱导培养条件的试验设计 | 第34-35页 |
| ·花药愈伤组织分化培养条件的试验设计 | 第35-36页 |
| ·花药植株生根培养条件的试验设计 | 第36页 |
| ·花药再生植株移栽成活条件的试验设计 | 第36-37页 |
| ·评价方法和指标 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-45页 |
| ·愈伤组织诱导培养条件的筛选 | 第38-41页 |
| ·愈伤组织分化培养条件的筛选 | 第41-43页 |
| ·再生植株生根诱导培养条件的筛选 | 第43-45页 |
| ·花药再生植株移栽成活情况 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| ·基本培养基对苜蓿花药培养的影响 | 第45-46页 |
| ·植物激素对苜蓿花药培养的影响 | 第46页 |
| ·取材时期的选择对苜蓿雄性不育株花药愈伤形成的影响 | 第46-47页 |
| ·低温对苜蓿雄性不育株花药愈伤形成的影响 | 第47页 |
| ·愈伤组织形态对分化能力的影响 | 第47页 |
| ·玻璃苗成因及防治措施 | 第47-48页 |
| ·不育材料与可育材料在花药培养中的差异 | 第48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 3 苜蓿花药培养再生植株的倍性鉴定 | 第49-62页 |
| ·试验材料 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-52页 |
| ·试验仪器及药品 | 第49-50页 |
| ·试验样品预处理 | 第50-51页 |
| ·上机测定 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-57页 |
| ·离心方法对细胞核悬液DNA分辨率的影响 | 第52页 |
| ·离心转速对细胞核悬液DNA分辨率的影响 | 第52-53页 |
| ·材料破碎方法对细胞核悬液DNA分辨率的影响 | 第53-54页 |
| ·不同分离缓冲液对细胞核悬液DNA分辨率的比较 | 第54-55页 |
| ·PI染液和RNA酶A浓度对细胞核悬液DNA分辨率的影响 | 第55-56页 |
| ·低温保存苜蓿花药培养再生植株叶片对倍性检测的影响 | 第56页 |
| ·苜蓿花药组培再生植株的倍性检测结果分析 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-61页 |
| ·细胞核悬液的质量对流式细胞仪测定的影响 | 第58-60页 |
| ·DNA荧光染色对流式细胞仪测定的影响 | 第60页 |
| ·参照样本的选择对流式细胞仪测定结果的影响 | 第60-61页 |
| ·流式细胞仪测定苜蓿花药培养再生植株倍性的可行性 | 第61页 |
| ·结论 | 第61-62页 |
| 4 苜蓿雄性不育株及其可育株的CD、N-AFLP差异显示分析 | 第62-89页 |
| ·试验材料 | 第62-63页 |
| ·试验方法 | 第63-74页 |
| ·总RNA的提取 | 第63-64页 |
| ·RNA浓度和质量的检测 | 第64-65页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第65-67页 |
| ·双链cDNA的电泳检测 | 第67页 |
| ·cDNA-AFLP分析 | 第67-71页 |
| ·扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第71-72页 |
| ·数据统计及分析 | 第72-73页 |
| ·水煮法回收差异片段 | 第73页 |
| ·差异片段的再扩增 | 第73页 |
| ·再扩增产物的纯化回收 | 第73-74页 |
| ·差异片段的测序与分析 | 第74页 |
| ·结果分析 | 第74-85页 |
| ·总RNA质量和浓度检测结果分析 | 第74页 |
| ·保存时间对RNA质量的影响 | 第74-75页 |
| ·cDNA的合成结果分析 | 第75页 |
| ·双酶切和连接产物结果分析 | 第75-76页 |
| ·预扩增体系筛选及优化 | 第76-78页 |
| ·选择性扩增体系分析 | 第78-79页 |
| ·差异表达基因片段模式 | 第79页 |
| ·苜蓿cDNA-AFLP的基因差异表达分析 | 第79-80页 |
| ·差异表达基因片段的回收与测序 | 第80-81页 |
| ·差异表达基因片段序列分析 | 第81-83页 |
| ·差异表达基因片段的同源性分析 | 第83页 |
| ·差异表达基因片段亲疏水性及跨膜结构的分析 | 第83-84页 |
| ·差异表达基因片段的二级结构预测 | 第84页 |
| ·差异表达基因片段的亚细胞定位 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-89页 |
| ·RNA提取及cDNA合成中的影响因素 | 第85-86页 |
| ·cDNA-AFLP技术体系优化 | 第86页 |
| ·多态性差异片段的表达 | 第86-87页 |
| ·差异片段的回收、测序及功能预测 | 第87页 |
| ·差异表达基因片段的序列及蛋白质结构分析 | 第87-88页 |
| ·苜蓿雄性不育性形成机理初探 | 第88-89页 |
| ·结论 | 第89页 |
| 5 下一步研究展望 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-113页 |
| 附录 | 第113-139页 |
| 作者简介 | 第139页 |
