| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-22页 |
| 1. 动物细胞培养的发展状况 | 第11-12页 |
| 2. 乳腺上皮细胞培养的发展状况 | 第12-15页 |
| ·乳腺 | 第12页 |
| ·乳腺上皮细胞的培养 | 第12-15页 |
| ·乳腺上皮细胞的分离 | 第13页 |
| ·乳腺上皮细胞的纯化 | 第13-14页 |
| ·乳腺上皮细胞的永生化 | 第14-15页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞系的研究进展 | 第15页 |
| 3. 苷类物质及其在细胞水平的研究 | 第15-18页 |
| ·四种苷类物质概况 | 第15-17页 |
| ·大豆苷(Daidzin)和染料木苷(Genistin) | 第15-16页 |
| ·淫羊藿苷(Icariin) | 第16-17页 |
| ·桔梗总皂昔 | 第17页 |
| ·苷类物质在细胞水平的研究 | 第17-18页 |
| 4. 细胞增殖与凋亡 | 第18页 |
| 5. 山羊乳腺上皮细胞分泌的蛋白及其影响因素 | 第18-20页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞分泌的蛋白 | 第18-19页 |
| ·乳蛋白的合成及其调控 | 第19-20页 |
| ·乳蛋白合成的营养调控 | 第19-20页 |
| ·乳蛋白合成的内分泌调控 | 第20页 |
| 6. 本论文研究的意义和主要内容 | 第20-22页 |
| 试验部分 | 第22-53页 |
| 试验一 山羊乳腺上皮细胞的培养及鉴定 | 第22-34页 |
| 1 材料和方法 | 第22-25页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·有关试剂配置 | 第22-23页 |
| ·培养仪器和用具 | 第23页 |
| ·山羊MEC分离纯化方法 | 第23-24页 |
| ·山羊乳腺组织的采集 | 第23页 |
| ·山羊MEC的分离培养 | 第23页 |
| ·山羊MEC的纯化 | 第23-24页 |
| ·山羊MEC的传代 | 第24页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第24页 |
| ·山羊MEC的鉴定 | 第24-25页 |
| ·形态学鉴定 | 第24页 |
| ·免疫组化鉴定 | 第24-25页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第25页 |
| ·细胞的冻存 | 第25页 |
| ·细胞的复苏 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-31页 |
| ·山羊MEC的分离 | 第25-26页 |
| ·山羊MEC的纯化与传代 | 第26-29页 |
| ·山羊MEC生长曲线的绘制 | 第29-30页 |
| ·山羊MEC形态学鉴定 | 第30页 |
| ·山羊MEC免疫组化鉴定 | 第30-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| ·山羊MEC的分离纯化 | 第31-32页 |
| ·乳腺组织 | 第31页 |
| ·山羊MEC的分离 | 第31页 |
| ·山羊MEC的纯化 | 第31-32页 |
| ·山羊MEC的传代 | 第32页 |
| ·山羊MEC生长曲线的绘制 | 第32页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第32-33页 |
| ·细胞冻存与冷冻保护液 | 第33页 |
| ·细胞复苏 | 第33页 |
| 4 小结 | 第33-34页 |
| 试验二 营类物质对山羊MEC增殖的影响 | 第34-43页 |
| 1 材料与方法 | 第34-35页 |
| ·材料与试剂 | 第34页 |
| ·仪器和用具 | 第34页 |
| ·试验方法 | 第34-35页 |
| ·山羊MEC培养及鉴定 | 第34页 |
| ·MTT法检测细胞增殖 | 第34-35页 |
| ·四种苷处理山羊MEC | 第35页 |
| ·四种苷微克级别的浓度设置 | 第35页 |
| ·四种苷纳克级别的浓度设置 | 第35页 |
| ·不同浓度下处理细胞的时间设置 | 第35页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·微克级别四种苷对山羊MEC增殖的影响 | 第35-38页 |
| ·纳克级别四种苷对山羊MEC增殖的影响 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 4 小结 | 第42-43页 |
| 试验三 苷类物质对山羊MEC α_(sl)和β-酪蛋白基因表达的影响 | 第43-53页 |
| 1 材料与方法 | 第43-47页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43-44页 |
| ·仪器 | 第44页 |
| ·不同浓度的四种苷处理细胞 | 第44页 |
| ·提取细胞总RNA并反转录生成cDNA | 第44-45页 |
| ·细胞总RNA的提取(六孔板) | 第44-45页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第45页 |
| ·Real Time PCR检测α_(sl)酪蛋白和β-酪蛋白基因的相对表达 | 第45-46页 |
| ·引物设计 | 第45-46页 |
| ·Real Time PCR测定α_(sl)酪蛋白和α-酪蛋白基因的相对表达量 | 第46页 |
| ·数据处理 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-50页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第47页 |
| ·实时荧光定量PCR检测α_(sl)-casein和β-casein基因的相对表达 | 第47-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 4 小结 | 第51-53页 |
| 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第62-63页 |
