紫花苜蓿抗褐斑病基因的ISSR和SCAR标记研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-25页 |
| ·苜蓿褐斑病研究概况 | 第12-16页 |
| ·苜蓿褐斑病的分布与危害 | 第12-13页 |
| ·苜蓿褐斑病的发病规律 | 第13页 |
| ·苜蓿褐斑病抗性筛选的研究 | 第13-14页 |
| ·苜蓿假盘菌的研究进展 | 第14-15页 |
| ·苜蓿假盘菌的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·苜蓿假盘菌的分离培养 | 第15页 |
| ·遗传标记在苜蓿褐斑病研究上的应用 | 第15-16页 |
| ·同工酶标记 | 第15-16页 |
| ·DNA 分子标记 | 第16页 |
| ·ISSR 分子标记技术原理及其应用 | 第16-20页 |
| ·分子标记的概念和原理 | 第16-17页 |
| ·ISSR 分子标记技术原理及特点 | 第17-18页 |
| ·ISSR 分子标记技术的应用 | 第18-20页 |
| ·遗传图谱的构建及基因定位 | 第18-19页 |
| ·亲缘关系和遗传多样性研究 | 第19-20页 |
| ·分子标记辅助育种的潜力 | 第20页 |
| ·SCAR 分子标记原理及应用 | 第20-24页 |
| ·SCAR 分子标记的原理及特点 | 第20-22页 |
| ·SCAR 分子标记的应用 | 第22-24页 |
| ·目标基因的辅助选择 | 第22页 |
| ·品种鉴定和种质评价 | 第22-23页 |
| ·基因定位与遗传图谱构建 | 第23页 |
| ·植物遗传进化 | 第23-24页 |
| ·本实验的主旨 | 第24-25页 |
| 2 紫花苜蓿抗褐斑病基因的ISSR 标记研究 | 第25-37页 |
| ·供试材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·供试菌种来源 | 第25页 |
| ·主要仪器与供试试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-31页 |
| ·试剂配制 | 第26-27页 |
| ·育苗 | 第27页 |
| ·接种鉴定 | 第27-28页 |
| ·DNA 的提取及定量 | 第28-29页 |
| ·DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·DNA 的浓度测定 | 第29页 |
| ·抗、感病DNA 池的建立 | 第29页 |
| ·ISSR-PCR 扩增与产物检测 | 第29-30页 |
| ·ISSR-PCR 扩增反应体系和反应程序 | 第29-30页 |
| ·ISSR 扩增产物的检测 | 第30页 |
| ·ISSR 引物的筛选和最佳退火温度的确定 | 第30-31页 |
| ·ISSR 标记的筛选和验证 | 第31页 |
| ·数据处理 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·接种鉴定筛选 | 第31-32页 |
| ·DNA 提取 | 第32页 |
| ·ISSR 标记的筛选 | 第32-33页 |
| ·单株验证 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 3 紫花苜蓿抗褐斑病基因的SCAR 标记研究 | 第37-52页 |
| ·供试材料 | 第37页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·ISSR 标记来源 | 第37页 |
| ·主要仪器及供试试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·试验方法 | 第37-41页 |
| ·试剂配制方法 | 第37-38页 |
| ·特异条带的回收、克隆、测序 | 第38-41页 |
| ·ISSR 产物多态性片断的回收 | 第38-39页 |
| ·多态性片断的连接 | 第39页 |
| ·氯化钙法制备感受态细胞 | 第39-40页 |
| ·转化（注意无菌操作） | 第40页 |
| ·重组克隆筛选与检测（注意无菌操作） | 第40-41页 |
| ·序列结果的比对 | 第41页 |
| ·SCAR 标记引物的设计 | 第41页 |
| ·SCAR 反应体系的优化 | 第41页 |
| ·SCAR 标记的单株验证 | 第41页 |
| ·数据处理 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-50页 |
| ·ISSR 特异片段纯化大小检测 | 第41-42页 |
| ·特异片段的连接与转化 | 第42页 |
| ·克隆片段的测序结果及序列分析 | 第42-47页 |
| ·20-R750 标记序列测定结果及同源性分析 | 第42-44页 |
| ·11-S750 标记序列测定结果及同源性分析 | 第44-47页 |
| ·SCAR 引物的设计及反应体系优化 | 第47-48页 |
| ·SCAR 标记的PCR 检测 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 4. 全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
| 导师简介 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
