| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 1. 前言 | 第10-19页 |
| ·立题背景 | 第10-11页 |
| ·双歧杆菌检测方法的研究进展 | 第11-14页 |
| ·传统平板菌落计数法 | 第11-12页 |
| ·以分子生物学技术为基础的定量分析法 | 第12-14页 |
| ·免疫学技术与平板培养方法相结合的检测技术 | 第14页 |
| ·ELISA 检测技术 | 第14-16页 |
| ·原理 | 第14-15页 |
| ·ELISA 检测技术在微生物检测中的应用 | 第15-16页 |
| ·ELISA 检测技术在双歧杆菌检测中的应用 | 第16页 |
| ·本研究的主要目的与意义 | 第16-17页 |
| ·本研究拟采取的技术路线 | 第17-19页 |
| 2 试验材料与方法 | 第19-29页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·试验用菌株 | 第19页 |
| ·实验动物 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·主要试剂和材料及其来源 | 第20-21页 |
| ·ELISA 方法中主要试剂的配制 | 第21页 |
| ·仪器与设备 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-29页 |
| ·菌种的活化与培养 | 第22页 |
| ·免疫原的制备 | 第22-23页 |
| ·免疫血清的制备 | 第23-24页 |
| ·双抗夹心ELISA 方法检测双歧杆菌最适反应条件的建立 | 第24-26页 |
| ·试剂盒的组装 | 第26页 |
| ·试剂盒的方法学评价 | 第26-27页 |
| ·试剂盒的保存期实验 | 第27页 |
| ·试剂盒在双歧杆菌检测中的应用 | 第27-28页 |
| ·数据处理 | 第28-29页 |
| 3. 结果与分析 | 第29-45页 |
| ·免疫血清的制备 | 第29-30页 |
| ·双抗夹心ELISA 方法检测双歧杆菌最适反应条件的建立 | 第30-37页 |
| ·包被抗体与二抗最佳反应浓度的优化 | 第30-31页 |
| ·包被液的选择 | 第31-32页 |
| ·封闭液的选择 | 第32-33页 |
| ·封闭时间的选择 | 第33-34页 |
| ·酶标抗体最佳稀释度的优化 | 第34页 |
| ·酶标抗体作用时间的优化 | 第34-35页 |
| ·TMB 底物作用时间的优化选择 | 第35-36页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第36-37页 |
| ·试剂盒的组装 | 第37-39页 |
| ·试剂盒包含的试剂及材料 | 第37-38页 |
| ·试剂盒的操作方法与结果判断 | 第38页 |
| ·试剂盒的操作说明 | 第38-39页 |
| ·试剂盒的方法学评价 | 第39-42页 |
| ·特异性评价 | 第39-40页 |
| ·重复性评价 | 第40-41页 |
| ·灵敏度评价 | 第41-42页 |
| ·试剂盒的保存期实验 | 第42-43页 |
| ·试剂盒在双歧杆菌检测中的应用 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-49页 |
| ·双歧杆菌免疫血清的制备方法 | 第45-46页 |
| ·抗原剂量对血清效价的影响 | 第45页 |
| ·佐剂的使用对血清效价及特异性的影响 | 第45-46页 |
| ·双抗夹心ELISA 检测方法的影响因素 | 第46-47页 |
| ·包被条件及包被抗体浓度对ELISA 检测方法的影响 | 第46页 |
| ·酶标抗体的选择及稀释倍数对ELISA 检测方法的影响 | 第46-47页 |
| ·底物的选择对ELISA 检测方法的影响 | 第47页 |
| ·双抗夹心ELISA 法在双歧杆菌检测中的优点与不足 | 第47-48页 |
| ·双歧杆菌双抗体夹心ELISA 法检测试剂盒的应用前景 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第56页 |
