| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 葡萄卷叶病研究 | 第12-16页 |
| ·葡萄卷叶病的发现 | 第12-13页 |
| ·葡萄卷叶病症状表现、寄主范围及其传播方式 | 第13页 |
| ·葡萄卷叶病的病原和伴随病毒-2(GLRaV-2) | 第13-16页 |
| 2 植物基因工程研究 | 第16-21页 |
| ·植物转基因研究 | 第17页 |
| ·植物抗病毒基因工程研究 | 第17-21页 |
| ·外壳蛋白抗病毒基因工程 | 第18-19页 |
| ·复制酶抗病毒基因工程 | 第19-20页 |
| ·反义RNA技术抗病毒基因工程 | 第20-21页 |
| 3 葡萄遗传转化研究进展 | 第21-22页 |
| 4 植物组织培养技术发展概述 | 第22-24页 |
| ·植物组织培养理论起源 | 第23页 |
| ·植物组织培养基本培养基的研究 | 第23-24页 |
| ·植物生长调节物质在组织培养中的地位与作用 | 第24页 |
| 5 研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 GLRaV-2 CP基因正义链植物表达载体的构建 | 第25-32页 |
| 1 主要试剂与材料 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·供试材料 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-29页 |
| ·抽提质粒 | 第25-26页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·GLRaV-2 CP基因的PCR扩增与检测 | 第26页 |
| ·目标片段的回收与纯化 | 第26-27页 |
| ·连接 | 第27页 |
| ·连接产物转化宿主菌DH10B感受态细胞 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌DH10B感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第28页 |
| ·抽提重组质粒和酶切鉴定 | 第28页 |
| ·GLRaV-2 CP基因正义链的植物表达载体构建 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-32页 |
| ·GLRaV-2 CP基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·GLRaV-2 CP基因正义链的植物表达载体构建 | 第30-32页 |
| 第三章 GLRaV-2 CP基因转化烟草研究 | 第32-41页 |
| 1 主要试剂与材料 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·供试材料 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-35页 |
| ·本氏烟无菌实生苗的培育 | 第32页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第32-33页 |
| ·农杆菌EHA105电转感受态细胞制备 | 第32-33页 |
| ·转化农杆菌 | 第33页 |
| ·单克隆的PCR检测 | 第33页 |
| ·农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草 | 第33-34页 |
| ·制备侵染液 | 第33页 |
| ·侵染液侵染叶盘 | 第33-34页 |
| ·共培养 | 第34页 |
| ·选择诱导培养 | 第34页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-41页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌感受态细胞 | 第35-37页 |
| ·农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草 | 第37-38页 |
| ·侵染液侵染叶盘和共培养 | 第37页 |
| ·选择诱导培养 | 第37-38页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第38-41页 |
| 第四章 转基因植株的扩繁、生根和移栽 | 第41-47页 |
| 1 主要试剂与材料 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·供试材料 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-42页 |
| ·转基因植株的扩繁 | 第41页 |
| ·转基因植株的生根 | 第41页 |
| ·转基因植株的移栽 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-47页 |
| ·叶盘法扩繁幼芽分化情况 | 第42页 |
| ·最佳生根条件 | 第42-44页 |
| ·转基因植株的移栽成活率 | 第44-47页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第47-49页 |
| 附录 试验常用溶液配方 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
