中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
缩写词 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.ISSR技术的原理和特点 | 第13-14页 |
2.ISSR技术在研究中的应用 | 第14-17页 |
3.龙眼亲缘关系的研究进展 | 第17-19页 |
4.研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 龙眼品种的ISSR分析 | 第20-41页 |
1. 材料和方法 | 第20-25页 |
·供试材料 | 第20-21页 |
·主要实验仪器、试剂及试验所需溶液的配置 | 第21-22页 |
·主要实验仪器 | 第21页 |
·试剂 | 第21页 |
·试验所需溶液及其配制 | 第21-22页 |
·龙眼基因组DNA的提取 | 第22-24页 |
·CTAB法制备龙眼基因组DNA | 第22-23页 |
·龙眼基因组DNA浓度和纯度的测定 | 第23-24页 |
·龙眼基因组DNA的电泳检测 | 第24页 |
·龙眼基因组DNA的ISSR-PCR扩增反应 | 第24页 |
·ISSR-PCR扩增反应体系的优化 | 第24页 |
·ISSR-PCR扩增反应引物的筛选 | 第24页 |
·ISSR-PCR扩增反应的优化体系及程序 | 第24页 |
·检测与成像 | 第24页 |
·数据分析 | 第24-25页 |
2. 结果与分析 | 第25-36页 |
·龙眼基因组DNA的提取结果与分析 | 第25页 |
·ISSR-PCR扩增反应体系的优化 | 第25-30页 |
·Mg~(2+)浓度对反应体系的影响 | 第25-26页 |
·Taq DNA聚合酶对反应体系的影响 | 第26页 |
·模板DNA浓度对反应体系的影响 | 第26-27页 |
·随机引物浓度对反应体系的影响 | 第27页 |
·dNTPs浓度对反应体系的影响 | 第27-28页 |
·热循环参数对扩增结果的影响 | 第28页 |
·引物 | 第28-30页 |
·51份供试材料的ISSR扩增分析 | 第30-36页 |
·供试材料的ISSR扩增结果 | 第30-31页 |
·ISSR在品种鉴别上的应用 | 第31-36页 |
3. 讨论 | 第36-41页 |
·龙眼DNA的提取 | 第36页 |
·ISSR-PCR扩增反应体系及程序的建立 | 第36-37页 |
·ISSR-PCR扩增对基因组DNA的要求 | 第37页 |
·关于龙眼的ISSR分析 | 第37-38页 |
·龙眼遗传多样性分析 | 第38-41页 |
第三章 龙眼焦核性状的ISSR分子标记研究 | 第41-48页 |
1. 材料与方法 | 第41-44页 |
·焦核池和非焦核池的建立 | 第41页 |
·焦核池和非焦核池多态性引物的筛选 | 第41页 |
·个体检验验证 | 第41页 |
·特异条带的回收及检测 | 第41-42页 |
·目的片段与pMD_(18)-T-vector的连接 | 第42页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备——CaCl_2法 | 第42-43页 |
·连接产物的转化与蓝白斑筛选 | 第43页 |
·重组质粒的PCR检测 | 第43-44页 |
2. 结果与分析 | 第44-46页 |
·焦核池和非焦核池的多态性 | 第44页 |
·分离集团中各单株ISSR分析 | 第44-45页 |
·特异条带的测序 | 第45-46页 |
3. 讨论 | 第46-48页 |
·关于所选ISSR标记UBC842_(666) | 第46页 |
·ISSR标记转换的必要性及方法 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
致谢 | 第56页 |