摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
前言 | 第7-12页 |
第一部分 FCR1P 多克隆抗体制备 | 第12-31页 |
材料与方法 | 第12-25页 |
1 实验动物、菌株及质粒 | 第12页 |
2 主要试剂 | 第12-14页 |
3 主要仪器 | 第14-15页 |
4 实验方法 | 第15-25页 |
结果 | 第25-31页 |
1 重组表达质粒的构建 | 第25-27页 |
2 重组蛋白诱导表达 | 第27页 |
3 重组蛋白的亲和层析纯化 | 第27-28页 |
4 血清效价检测(ELISA 法) | 第28-29页 |
5 多克隆抗体与目的蛋白结合能力检测 | 第29页 |
6 兔抗体灵敏度检测(Western Blot) | 第29-31页 |
第二部分 FCR1P 在白念珠菌耐药性形成过程中的作用研究 | 第31-60页 |
材料与方法 | 第31-48页 |
1 实验菌株 | 第31页 |
2 主要试剂 | 第31-32页 |
3 主要仪器 | 第32-34页 |
4 实验方法 | 第34-48页 |
结果 | 第48-60页 |
1 CAI4 [YPB-ADH],FM7[YPB-ADH],FM7[YPB-ADH/FCR1]菌珠构建 | 第48-50页 |
2 FCR1 基因亲本菌CA14 [YPB-ADH]、缺失菌FM7[YPB-ADH]、高表达菌珠FM7[YPB-ADH/FCR1]基因型验证 | 第50-51页 |
3 白念珠菌耐药性形成过程中FCR1 基因表达 | 第51-53页 |
4 FCR1 基因对白念珠菌耐药形成过程的影响 | 第53-56页 |
5 氟康唑体外诱导白念珠菌耐药性形成过程中FCR1 对CDR1 基因表达调控作用 | 第56-60页 |
·白念珠菌FCR1 基因亲本菌CA14 [YPB-ADH]、缺失菌FM7[YPB-ADH]、高表达菌株FM7[YPB-ADH/FCR1]氟康唑加压诱导前、后CDR1 基因表达差异 | 第56页 |
·氟康唑加压诱导后白念珠菌FCR1 基因亲本菌CA14 [YPB-ADH]、缺失菌FM7[YPB-ADH]、高表达菌株FM7[YPB-ADH/FCR1] CDR1 基因表达差异 | 第56-57页 |
·氟康唑体外诱导白念珠菌耐药性形成过程中FCR1 对白念珠菌外排功能的影响 | 第57-60页 |
讨论 | 第60-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附件一:在读期间发表论文 | 第68-69页 |
附件二:YPB-ADHP1 表达质粒图谱 | 第69-70页 |
附件三:PET21 表达质粒图谱 | 第70-71页 |
附件四:综述 | 第71-77页 |