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利用亲和磷酸蛋白组学筛选和鉴定氧化应激重塑型LPS信号通路中的新信号分子

ACKNOWLEDGMENTS第1-8页
ABBREVIATIONS第8-10页
摘要第10-12页
Abstract第12-15页
1 INTRODUCTION第15-25页
   ·Two Hit Hypothesis第15页
   ·Molecular Mechanism of Oxidative Stress in Inflammation第15-16页
   ·Molecular Mechanism of Classical LPS signaling第16-18页
   ·Progressions Made at Understanding Mechanism of LPS Signaling Reprogrammed by Antecedent Oxidative Stress第18-20页
   ·Systematically Study the Classical and the Reprogrammed LPS Pathway第20-21页
     ·Drawbacks of Previous Studies on LPS Signal Transduction第20页
       ·Advantages of Application of Proteomic Study to Signal Transduction第20-21页
   ·Current Opinions of Phosphoproteomic Techniques第21-25页
2 METHODOLOGIES OF PHOSPHOPROTEOMICS第25-37页
   ·Summary第25页
   ·Cell Culture第25-26页
   ·Testing Cell's Responsibility to LPS by Liquid Chip第26-27页
   ·Phosphoprotein Enrichment Procedure第27-29页
  A. Extracting Proteins from Cells第27-28页
  B. Column Enrichment第28-29页
   ·Desaiting of Phosphoproteins第29-30页
   ·2-D Electrophoresis第30-31页
  A. Isoelectric Focusing第30-31页
  B. Equilibration and the Second Dimension第31页
   ·Combined Staining Approach Using Both "Blue Silver" Coomassie Blue Staining and "Modified Blum" Silver Staining第31-32页
   ·Analysis of 2-D Gels第32-34页
   ·Preparation of Samples for Mass Spectrometry第34-35页
  A. Destaining of silver stained gel pieces第34页
  B. In Gel Digestion第34-35页
  C. Peptide extraction第35页
   ·Mass Spectrometry Analysis and Database Searching of The Determined PMF第35-37页
3 RESULTS AND DISCUSSIONS第37-82页
   ·Results第37-71页
     ·Phosphoproteome Profile of Thp-1 Cells After LPS Stimulation第38-39页
     ·Oxidative Stress Induced Changes in Phosphoproteome of LPS Stimulated Thp-1 Cells第39-44页
     ·Identification of Candidate Targets of LPS Signalling Pathway Reprogrammed by Antecedent Oxidative Stress第44-66页
     ·Possible Functional Roles of the Identified Phosphoproteins第66-71页
   ·Discussion第71-79页
     ·Advantages and Limitations of This Study第71-73页
     ·Possible Functional Roles Proteasome and NMP-238 Plays in Reprogramming LPS Signalling Pathway第73-79页
   ·Conclusion Remarks第79-82页
4 IMPLICATIONS AND FUTURE DIRECTIONS第82-85页
REFERENCES第85-89页

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