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温和气单胞菌单克隆抗体的制备及初步应用

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
第一章 前言第10-22页
   ·致病性第11-12页
     ·淡水鱼类暴发性出血病第11页
     ·鳖类的多种病症第11-12页
     ·蛙的温和气单胞菌病第12页
   ·致病因子研究第12-17页
     ·粘附作用第12-15页
     ·脂多糖(Lipopolysaccharide LPS)第15页
     ·外毒素(Exotoxin)第15-17页
     ·蛋白酶第17页
   ·诊断和防治方法研究第17-18页
   ·水产致病菌单抗的研究现状第18-19页
   ·胶体金免疫层析技术综述第19-22页
     ·原理第19-20页
     ·免疫胶体金快速诊断技术的优点第20-21页
     ·胶体金免疫层析技术应用现状第21-22页
第二章 材料与方法第22-37页
   ·材料第22-24页
     ·菌株第22页
     ·实验动物第22页
     ·细胞株第22页
     ·主要培养基和试剂第22-23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·各种主要使用液第24页
   ·实验方法第24-37页
     ·细菌培养第24-25页
     ·动物试验第25页
     ·小鼠的免疫接种第25-26页
     ·间接 ELISA法检测血清效价第26页
     ·SP2/0细胞复苏和传代培养第26页
     ·饲养细胞板的准备第26-27页
     ·细胞融合第27-28页
     ·融合细胞观察与换液第28页
     ·杂交瘤细胞株筛选第28-29页
     ·克隆化培养第29页
     ·细胞冻存第29页
     ·BALB/c小鼠腹水单克隆抗体的诱生第29-30页
     ·腹水效价测定第30页
     ·抗温和气单胞菌单克隆抗体的鉴定第30-31页
     ·单抗的纯化第31-32页
     ·温和气单胞菌单抗胶体金免疫层析试纸的研制第32-37页
第三章 结果和分析第37-51页
   ·动物实验结果第37页
   ·全菌间接 ELISA第37-38页
   ·杂交瘤细胞株的建立第38-39页
   ·单抗的鉴定第39-43页
     ·特异性鉴定第39页
     ·单抗亚类的测定结果第39-40页
     ·效价测定第40页
     ·单抗结合位点分析第40-41页
     ·相对亲和力的测定第41-42页
     ·单抗稳定性检验第42页
     ·单抗的纯化第42-43页
   ·温和气单胞菌单抗胶体金免疫层析试纸的研制第43-51页
     ·胶体金的制备第43-44页
     ·胶体金标记抗体最低标记量的测定第44-45页
     ·胶体金的最适 PH值测定第45-46页
     ·超速离心法纯化胶体金标记蛋白第46-47页
     ·金标记抗体稀释度的确定第47-48页
     ·硝酸纤维素膜(NC)的活化与包被第48页
     ·玻璃纤维的预处理与金标抗体的喷涂第48页
     ·试纸条的结果判断第48-49页
     ·试纸条的测试第49-51页
第四章 讨论第51-57页
   ·单抗制备及鉴定中一些问题的分析第51-53页
   ·关于胶体金试纸条检测的建立第53-56页
     ·胶体金溶液及其制备第53-55页
     ·胶体金标记蛋白第55页
     ·免疫层析法中材料的选择第55-56页
     ·免疫层析材料的组装第56页
     ·金标免疫层析试纸条质量与性能要求第56页
   ·尚待解决的问题及进一步研究第56-57页
第五章 结论第57-58页
参考文献第58-67页
致谢第67-68页
攻读硕士学位期间发表的论文第68页

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