摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-54页 |
·海绵微生物 | 第14-24页 |
·海绵及海绵微生物简介 | 第14-16页 |
·海绵微生物种类多样性 | 第16-17页 |
·海绵中微生物的分布及其作用 | 第17-19页 |
·海绵微生物和海绵天然产物 | 第19-24页 |
·海绵放线菌分离 | 第24-34页 |
·放线菌简介 | 第24-25页 |
·海洋放线菌 | 第25-27页 |
·放线菌分离 | 第27-34页 |
·陆生放线菌分离 | 第27-31页 |
·放线菌分离样品前处理 | 第27-29页 |
·分离培养基和抗生素 | 第29页 |
·放线菌分离培养温度和时间 | 第29-31页 |
·其它放线菌分离技术介绍 | 第31页 |
·海洋放线菌分离 | 第31-32页 |
·海绵放线菌分离 | 第32-34页 |
·海绵微生物分离方式 | 第32-33页 |
·海绵微生物分离培养基和培养方法 | 第33页 |
·海绵放线菌分离 | 第33-34页 |
·放线菌鉴定技术 | 第34-38页 |
·海绵微生物资源开发前景 | 第38-40页 |
·海绵微生物分离培养深入研究 | 第38页 |
·未可培养水平海绵微生物多样性研究 | 第38-40页 |
·海绵微生物活性产物基因开发 | 第40页 |
·课题研究背景和计划 | 第40-42页 |
·研究背景 | 第40-41页 |
·研究计划 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-54页 |
第二章 繁茂膜海绵中放线菌的分离研究 | 第54-67页 |
·引言 | 第54页 |
·实验材料及仪器 | 第54-56页 |
·样品采集 | 第54-55页 |
·试剂 | 第55-56页 |
·仪器 | 第56页 |
·实验方法 | 第56-59页 |
·海绵样品的前处理 | 第56-57页 |
·放线菌分离培养基 | 第57-59页 |
·海绵中放线菌的分离培养 | 第59页 |
·海绵组织的电镜分析 | 第59页 |
·结果与讨论 | 第59-65页 |
·海绵中微生物的电镜观察 | 第59-60页 |
·海绵中放线菌的分离结果 | 第60-65页 |
·小结 | 第65页 |
参考文献 | 第65-67页 |
第三章 繁茂膜海绵中可培养放线菌多样性研究 | 第67-88页 |
·引言 | 第67页 |
·材料和方法 | 第67-69页 |
·仪器和试剂 | 第67-69页 |
·仪器 | 第67-68页 |
·试剂 | 第68-69页 |
·实验方法 | 第69-74页 |
·海绵中可培养放线菌基因组 DNA 的提取 | 第69-70页 |
·放线菌16S rDNA 的 PCR 扩增 | 第70页 |
·PCR 产物凝胶电泳 | 第70页 |
·适于放线菌16S rDNA RFLP 限制型内切酶筛选 | 第70-71页 |
·海绵放线菌16S rDNA 的RFLP 分析 | 第71页 |
·16S rDNA 产物纯化和测序分析 | 第71-73页 |
·16S rDNA 系统发育树分析和Vector NTI 模拟电泳分析 | 第73页 |
·GenBank 序列号申请 | 第73-74页 |
·结果与讨论 | 第74-86页 |
·放线菌基因组 DNA 提取 | 第74-75页 |
·16S rDNA 的 PCR 反应结果 | 第75-76页 |
·RFLP 限制型内切酶筛选结果 | 第76-78页 |
·RFLP 结果 | 第78-80页 |
·海绵放线菌的16S rDNA 的序列分析 | 第80-86页 |
·小结 | 第86页 |
参考文献 | 第86-88页 |
第四章 HPA177 菌种的鉴定 | 第88-98页 |
·引言 | 第88页 |
·材料与方法 | 第88-89页 |
·测试菌株 | 第88页 |
·培养、形态和生理生化鉴定 | 第88-89页 |
·菌株HPA177 的16S rDNA 序列分析 | 第89页 |
·鉴定结果 | 第89-95页 |
·讨论 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-98页 |
第五章 海绵放线菌分离技术的推广研究 | 第98-109页 |
·材料与方法 | 第98-101页 |
·材料和试剂 | 第98-99页 |
·海绵样品 | 第98-99页 |
·实验试剂及仪器 | 第99页 |
·实验方法 | 第99-101页 |
·海绵放线菌的分离培养 | 第99-100页 |
·分离方法 | 第99-100页 |
·放线菌分离培养基 | 第100页 |
·分离放线菌的纯化和培养 | 第100页 |
·海绵中放线菌鉴定和多样性研究 | 第100页 |
·序列号申请 | 第100-101页 |
·实验结果 | 第101-108页 |
·海绵中放线菌的分离结果 | 第101-103页 |
·海绵中放线菌16S rDNA 扩增结果 | 第103页 |
·RFLP 结果 | 第103-108页 |
·小结 | 第108页 |
参考文献 | 第108-109页 |
第六章 繁茂膜海绵中放线菌的活性筛选 | 第109-121页 |
·海绵放线菌的抗菌活性筛选 | 第109-114页 |
·材料 | 第109-111页 |
·抗菌活性筛选待测菌株 | 第109页 |
·测试菌 | 第109-111页 |
·活性菌株筛选方法 | 第111页 |
·琼脂块法 | 第111页 |
·发酵液牛津杯法 | 第111页 |
·筛选结果 | 第111-114页 |
·海绵放线菌的抗肿瘤活性筛选 | 第114-119页 |
·材料 | 第114页 |
·细胞株 | 第114页 |
·仪器与药品 | 第114页 |
·实验方法 | 第114-117页 |
·肿瘤细胞的培养 | 第114-116页 |
·细胞活化 | 第114-115页 |
·细胞的传代与保存 | 第115-116页 |
·待测样品的配制 | 第116页 |
·MTT 法检测发酵液的细胞毒活性 | 第116-117页 |
·实验结果 | 第117-119页 |
·讨论 | 第119页 |
·小结 | 第119-120页 |
参考文献 | 第120-121页 |
第七章 繁茂膜海绵分离株 B37 的鉴定研究 | 第121-131页 |
·材料与方法 | 第121-127页 |
·供试菌株 | 第121页 |
·主要仪器和药品 | 第121-122页 |
·鉴定方法 | 第122-127页 |
·显微镜和电镜下对孢子和孢子丝观察 | 第122-123页 |
·不同培养基上菌落形态、菌丝和可溶性色素观察 | 第123页 |
·部分生理生化实验 | 第123-126页 |
·唯一碳源利用实验 | 第126页 |
·16S rDNA 序列测定和序列分析 | 第126-127页 |
·实验结果 | 第127-130页 |
·链霉菌 B37 的鉴定 | 第127-130页 |
·形态培养特征 | 第127-128页 |
·生理生化鉴定结果 | 第128-129页 |
·鉴定结果 | 第129-130页 |
·小结 | 第130页 |
参考文献 | 第130-131页 |
第八章 B37 的发酵和产物提取 | 第131-144页 |
·材料 | 第131-132页 |
·实验试剂和仪器 | 第131页 |
·供试菌株 | 第131页 |
·抗菌活性测定菌株 | 第131-132页 |
·培养基 | 第132页 |
·实验方法 | 第132-134页 |
·发酵及发酵液优化实验 | 第132-133页 |
·培养基的优化 | 第132页 |
·发酵液热稳定性研究 | 第132-133页 |
·发酵液萃取的pH 稳定性研究 | 第133页 |
·发酵液的浓缩 | 第133页 |
·发酵液的薄层层析(TLC) | 第133页 |
·发酵液有机相的生物自显影研究 | 第133-134页 |
·发酵液的柱层析提取 | 第134页 |
·发酵液活性产物的结构研究 | 第134页 |
·实验结果 | 第134-142页 |
·发酵优化结果 | 第134-136页 |
·发酵液处理结果 | 第136-137页 |
·薄层层析流动相优化结果 | 第137-138页 |
·薄层层析生物自显影研究结果 | 第138页 |
·发酵液的柱层析分离研究和结构解析 | 第138-142页 |
·小结 | 第142页 |
参考文献 | 第142-144页 |
第九章 总结 | 第144-146页 |
附录 1 | 第146-148页 |
附录 2 | 第148-150页 |
作者简介 | 第150页 |
攻读博士学位期间发表文章目录 | 第150-152页 |
获奖情况 | 第152-153页 |
致谢 | 第153页 |