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多花水仙若干品种类型亲缘关系的分子生物学研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
缩略语表第11-12页
文献综述第12-34页
 1 同工酶技术及其在植物科学研究中的应用第13-17页
   ·同工酶技术概述第13页
   ·同工酶技术在植物科学研究中的应用第13-16页
     ·同工酶技术在植物种质资源研究中的应用第14页
     ·利用同工酶技术对植物品种进行分类第14页
     ·利用同工酶技术对杂交育种的预测第14-15页
     ·应用同工酶技术进行遗传基因的定位第15页
     ·同工酶技术在植物生理学研究中的应用第15-16页
     ·同工酶技术在其它方面的应用第16页
   ·同工酶技术的局限性和应用前景第16-17页
 2 RAPD技术及其在植物研究中的应用第17-23页
   ·RAPD技术的原理与特点第17-18页
   ·RAPD技术在植物科学研究中的应用第18-22页
     ·种质资源的鉴定第18-19页
     ·物种亲缘关系探讨第19页
     ·构建遗传图谱第19-20页
     ·遗传变异的检测第20-21页
     ·基因定位和基因分离第21页
     ·在植物育种实践中的应用第21-22页
   ·RAPD技术在存在的问题、解决途径及展望第22-23页
 3 FISH技术及在植物科学研究中的应用第23-29页
   ·FISH技术概述第23页
   ·常用的探针类型及标记方法第23-24页
     ·探针类型第24页
     ·探针的标记方法第24页
   ·FISH技术的应用第24-28页
     ·构建遗传图谱第25页
     ·异源染色质及多种染色体畸变检测第25-26页
     ·在植物基因工程及基因表达研究上的应用第26页
     ·鉴别基因组的同源性,探讨种的起源和种间亲缘关系第26-27页
     ·研究基因组的结构及空间排列顺序第27页
     ·在染色体RNA研究上的应用第27页
     ·基因定位第27-28页
   ·FISH技术和其它技术的结合第28-29页
     ·原位PCR技术第28页
     ·FISH和显带标记技术的结合第28页
     ·FISH和分子标记的结合第28-29页
     ·FISH和结合免疫组织化学结合的双标记技术第29页
   ·FISH技术存在的问题、解决途径和展望第29页
 4 染色体微切割、微克隆技术研究进展第29-34页
   ·染色体微切割、微克隆的技术程序第30-31页
     ·染色体标本的制备第30页
     ·染色体的微分离第30-31页
     ·染色体的微克隆第31页
   ·染色体微克隆技术的应用第31-34页
     ·染色体或染色体区段高密度遗传连锁图谱的构建第31-32页
     ·基因组物理作图第32页
     ·基因的定位与克隆第32-33页
     ·染色体进化研究第33-34页
多花水仙若干品种类型亲缘关系的分子生物学研究第34-64页
 第一章 多花水仙若干品种类型的过氧化物酶同工酶分析第34-38页
  1 材料与方法第34-35页
   ·供试材料第34-35页
   ·实验方法第35页
     ·酶液的提取第35页
     ·电泳第35页
     ·染色第35页
   ·结果记录及数据处理第35页
  2 结果与分析第35-37页
   ·过氧化物酶同工酶酶谱比较第35-36页
   ·各品种间酶谱的聚类分析第36-37页
  3 讨论第37-38页
 第二章 多花水仙若干品种类型的RAPD分析第38-46页
  1 材料和方法第38-39页
   ·实验材料第38页
   ·实验方法第38-39页
     ·基因组DNA的提取第38-39页
     ·PCR条件的优化第39页
     ·RAPD的反应程序第39页
   ·引物的筛选第39页
   ·相似率分析第39页
  2 结果与分析第39-42页
   ·水仙DNA的提取第39页
   ·PCR条件的优化第39-41页
     ·Mg~(2+)浓度对PCR反应的影响第39-40页
     ·dNTPs浓度对PCR反应的影响第40页
     ·引物浓度对PCR反应的影响第40-41页
     ·模板浓度对PCR反应的影响第41页
   ·引物的筛选第41页
   ·多态性分析第41-42页
   ·多花水仙亲缘关系的聚类分析第42页
  3 讨论第42-46页
 第三章 多花水仙若干品种类型染色体原位杂交分析第46-56页
  1 材料与方法第46-49页
   ·实验材料第46页
   ·水仙根尖的获得第46-47页
   ·染色体标本的制备第47页
   ·染色体原位杂交探针的制备第47-48页
     ·基因组总DNA探针的制备第47页
     ·rDNA探针的制备第47-48页
   ·染色体荧光原位杂交第48-49页
     ·原位杂交预处理第48页
     ·原位杂交第48页
     ·杂交后洗涤第48-49页
     ·信号检测第49页
  2 结果与分析第49-51页
   ·优良染色体标本的获得第49页
   ·rDNA的定位第49-50页
     ·45S rDNA的定位第49-50页
     ·5S rDNA的定位第50页
   ·多花水仙Ⅲ-3的GISH分析第50-51页
     ·用黄花类型Ⅱ-1(2n=20)的总基因组DNA为探针进行GISH分析第50页
     ·用白花类型Ⅰ-1(2n=22)的总基因组DNA为探针进行GISH分析第50-51页
     ·用黄花类型Ⅱ-2(2n=30)的总基因组DNA为探针进行GISH分析第51页
  3 讨论第51-56页
 第四章 水仙单染色体的体外扩增和微克隆第56-64页
  1 材料和方法第56-59页
   ·材料第56页
   ·染色体标本制作第56页
   ·目标染色体的显微分离第56-57页
   ·单染色体的体外扩增第57-58页
     ·蛋白酶K消化第57页
     ·Sau3A酶切第57页
     ·Sau3A接头的制备第57页
     ·接头连接第57页
     ·PCR反应第57-58页
   ·Southern杂交分析第58页
   ·单染色体PCR产物的克隆第58-59页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第59页
     ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞第59页
     ·重组克隆的筛选和插入片段大小的分析第59页
   ·水仙单染色体扩增产物的原位杂交第59页
  2 结果与分析第59-62页
   ·水仙单染色体的显微分离第59-60页
   ·水仙单染色体的体外扩增第60-61页
   ·Southern杂交分析第61页
   ·单染色体文库的初步分析第61页
   ·水仙单染色体原位杂交分析第61-62页
  3 讨论第62-64页
小结第64-65页
参考文献第65-73页
致谢第73-74页
附录第74-75页

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